Authors thank Mr. Kotaro Okubo for the kind assistance with SEM imaging. This work was supported by the Japan Society for the Promotion of Science Grant-in-Aid for Basic Research (B) (20310069), Grant-in-Aid for Research Activity Start-up (25880021), and by research grants from the Kurata Memorial Hitachi Science and Technology Foundation and the Nippon Sheet Glass Foundation for Materials Science and Engineering.

包被的玻璃盖玻片1.准备二氧化钛<ol><li>号码使用金刚石划片盖玻片。这不仅有助于跟踪每个盖玻片的同时也确保了样品的正确的一面朝上。清洁的盖玻片，第一下运行DDH 2 O的，然后通过浸入它们食人鱼溶液（H 2 SO 4 :H 2 O 2 = 4：1）。 10分钟后，彻底冲洗盖玻片，8次双蒸2 O.在干燥N 2流盖玻片。 </li><li>在射频（RF）溅射系统设置的 TiO 2靶。附加的盖玻片上使用聚酰亚胺胶带将溅射设备的一个样品架。将样本保持在溅射室中。疏散室，直到压力达到2.0×10 -4帕。 </li><li>引入Ar气到腔室内，并设置在沉积压力为4.0毫乇。当保持闸板关闭时，逐渐增加RF功率至70瓦</li><li>打开快门和溅射15分钟，得到一个薄膜的厚度为120-150毫微米（ 图1：步骤A）。膜的生长速率需要被衍生为每个机。 </li></ol> 2.表面涂层与细胞排斥膜<ol><li>通过用O 2等离子体处理样品，以下由等离子体反应器的制造商提供的说明书亲水在TiO 2表面上。我们治疗的样品进行5分钟，在200瓦与O 2流量以100sccm。沉浸在样品中DDH 2 O的，并确认表面超亲水性。表面干燥彻底在N 2流。 </li><li>制备1mM的十八烷基三氯硅烷（OTS）溶液中加入39.6微升的OTS 100毫升甲苯。浸在1小时在室温下的溶液中的样品。进行此步骤内的N 2 -filled手套袋中（ 图1：步骤B）。 </li><li>要除去物理吸附的分子，sonicatE中的样品中的甲苯，丙酮，乙醇和DDH 2 O的，每次5分钟，在该顺序。冲洗样品四次新鲜的DDH 2 O的和干燥在N 2流的表面。表面应是疏水为100-110°的接触角。 </li></ol> 3. 前现场表面图案<ol><li>工作在层流罩，得出一些划痕，表面上的钻石划线。这些标记有助于跟踪处理过的区域，也使显微镜聚焦。通过浸渍在70％乙醇的样品5分钟消毒OTS涂覆的 TiO 2。然后用清水冲洗样品两次消毒的双蒸2 O. </li><li>放置在一个35毫米的培养皿的样品，并加2ml的PC12生长培养基（参见步骤4.2）。孵育超过3小时，在CO 2培养箱中（37℃）。这个程序的目的是让血清白蛋白吸收在表面上。吸附白蛋白抑制其他prote随后的吸附插件和细胞 （图1：步骤C）。 </li><li>在等待时，设置了倒置荧光显微镜。 <ol><li>打开弧光灯，插入UV滤光立方体，和物镜设置为20X。 </li><li>测量光强度 I（W厘米-2）用紫外线强度计，并计算辐照时间 t（秒）为一个在剂量d的（以J厘米-2）为：T = D / I。 例如，照射在为200J厘米-2的剂量使用的600毫瓦cm -2的光源，333秒的照射是必需的。 </li><li>使用一个阶段微米和关闭场光阑设置要被照射的区域的尺寸，例如，200微米。 </li></ol></li><li>在3小时温育后，补充用200μl的3.0毫克毫升-1 IV型胶原的培养基（COL-IV;最终浓度300微克毫升-1）。 </li><li>转移35毫米的菜显微镜阶段。发现划痕米柜，聚焦显微镜到样品表面上，并且照射UV光以为200J cm -2的（ 图1：步骤D）的剂量。紫外线照射的面积可以通过调整视场光阑的开口，或通过与仲裁几何形状的金属掩模代替场光阑被改变。 </li><li>替换为新鲜生长培养基的培养基（无COL-IV）中，并将样品放回到培养箱。 </li></ol> 4.细胞培养<ol><li> PC12细胞常规培养进行在胶原包被的塑料盘。 <ol><li>涂覆60mm的组织培养皿山口-Ⅳ，第一润湿表面与DDH 2 O的，吸所有双蒸2 O. </li><li>用双蒸2 O稀释原液（3毫克毫升-1）10X准备300微克毫升-1 COL-IV </li><li>加入200μl的300微克毫升-1每60毫米的菜COL-IV。让该溶液通过表面扩散。 </li><li>干吨他菜在层流罩约1小时。 </li><li>用4ml的Dulbecco磷酸盐缓冲盐水（D-PBS）的漂清表面的两倍。如果不立 ​​即使用的涂层菜，用4mL双蒸2 O.的涮菜一次吸气DDH 2 O的后，保存在孵化器的菜。尽量不要把它存放超过两个星期。 </li></ol></li><li> PC12细胞生长在该组成的生长培养基：Dulbecco改良的Eagle培养基（低葡萄糖）+ 10％胎牛血清+ 5％马血清+ 1％青霉素 - 链霉素溶液。孵育细胞在 CO 2培养箱中（37℃，5％的CO 2），并更换一半培养基每隔一天。传代细胞才达到汇合。 <ol><li>吸出生长培养基，并加入2毫升PBS +（D-PBS + 10毫克毫升-1牛血清白蛋白（BSA）+ 10mM EDTA的）预热至37℃。孵育5分钟，在37℃。轻轻敲击菜分离所有CELLS。 </li><li>收集细胞在15ml锥形管中。冲洗用3毫升新鲜的D-PBS，预热至37℃的菜。 </li><li>离心反应管，在150×g下4分钟。 </li><li>吸出上清液，并添加1毫升生长培养基。 </li><li>对于常规培养，分裂细胞1：3至1：5。 </li></ol></li><li>板块细胞对紫外线改性的OTS / TiO 2的样品，计数细胞密度，并在35毫米培养皿（ 图1：步骤E）添加3.0×10 5个细胞 。孵育在加湿培养箱的培养皿（37℃，5％CO 2）1-2天。既幼稚和神经生长因子（NGF）-differentiated PC12细胞可用于构图实验。对于NGF分化的7S-NGF 100纳克毫升-1电镀细胞到样品之前加入到生长培养基中数天。 NGF分化似乎增加了PC12细胞的粘附性和使处理更容易，尤其是在原位图案化Éxperiments。 </li></ol> 5. 原位表面图案<ol><li>经过1-2天的培养上易地修饰表面，确认细胞附着并只在紫外线照射区域增长。设置的显微镜，如步骤3.4中所述。 </li><li>将样品转移到含有生长培养基的新35毫米组织培养皿，100纳克毫升-1 NGF（在使用NGF分化的细胞的情况下），和100μg毫升-1 COL-IV。 </li><li>放在显微镜阶段的菜。找到相应的位置，并且照射UV光以为200J cm -2的（ 图1：步骤F，G）的 ​​剂量。新创建的许可区域表示与图1中以星号：步骤G </li><li>尽量在30分钟内完成一个样品的处理。照射后，将样品转移回未经COL-IV。 </li><li>携带与铜的菜时，要特别小心ltured细胞和从盘传送样品盘，以防止拆卸图案的细胞。 </li></ol><img alt="图1" src="/files/ftp_upload/53045/53045fig1highres.jpg" width="700" /> 图中，整个过程1示意图。详见说明书。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53045/53045fig1large.jpg" target="_blank">请点击此处查看该图的放大版本。</a>

<ol>
	<li>Hughes, M. A., Brennan, P. M., Bunting, A. S., Shipston, M. J., Murray, A. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+Patterning+on+Photolithographically+Defined+Parylene-C:+SiO2+Substrates.">Cell Patterning on Photolithographically Defined Parylene-C: SiO2 Substrates.</a> J. Vis. Exp. (85), e50929 (2014).</li><li>Kleinfeld, D., Kahler, K. H., Hockberger, P. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Controlled+Outgrowth+of+Dissociated+Neurons+on+Patterned+Substrates.">Controlled Outgrowth of Dissociated Neurons on Patterned Substrates.</a> J. Neurosci. 8, 4098-4120 (1988).</li><li>Pensen, D., Heinz, W. F., Werbin, J. L., Hoh, J. H., Haviland, D. 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C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microcontact+Printing+of+Proteins+for+Cell+Biology.">Microcontact Printing of Proteins for Cell Biology.</a> J. Vis. Exp. (22), e1065 (2008).</li><li>Johnson, D. M., LaFranzo, N. A., Maurer, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Creating+Two-Dimensional+Patterned+Substrates+for+Protein+and+Cell+Confinement.">Creating Two-Dimensional Patterned Substrates for Protein and Cell Confinement.</a> J. Vis. Exp. (55), e3164 (2011).</li><li>Singhvi, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Engineering+Cell+Shape+and+Function.">Engineering Cell Shape and Function.</a> Science. 264, 696-698 (1126).</li><li>Chen, C. 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(46), e2514 (2010).</li><li>Nakanishi, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Photoactivation+of+a+Substrate+for+Cell+Adhesion+under+Standard+Fluorescence+Microscopes.">Photoactivation of a Substrate for Cell Adhesion under Standard Fluorescence Microscopes.</a> J. Am. Chem. Soc. 126, 16314-16315 (2004).</li><li>Kim, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Addressable+Micropatterning+of+Multiple+Proteins+and+Cells+by+Microscope+Projection+Photolithography+Based+on+a+Protein+Friendly+Photoresist.">Addressable Micropatterning of Multiple Proteins and Cells by Microscope Projection Photolithography Based on a Protein Friendly Photoresist.</a> Langmuir. 26, 12112-12118 (2010).</li><li>Deka, G., Okano, K., Kao, F. -. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dynamic+Photopatterning+of+Cells+In+Situ+by+Q-Switched+Neodymium-Doped+Yttrium+Ortho-Vanadate.">Dynamic Photopatterning of Cells In Situ by Q-Switched Neodymium-Doped Yttrium Ortho-Vanadate.</a> Laser. J. Biomed. Opt. 19, 011012 (2014).</li><li>Robertus, J., Browne, W. R., Feringa, B. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dynamic+Control+over+Cell+Adhesive+Properties+using+Molecular-Based+Surface+Engineering+Strategies.">Dynamic Control over Cell Adhesive Properties using Molecular-Based Surface Engineering Strategies.</a> Chem. Soc. Rev. 39, 354-378 (2010).</li><li>Choi, I., Yeo, W. -. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Self-Assembled+Monolayers+with+Dynamicity+Stemming+from+(Bio)chemical+Conversions:+From+Construction+to+Application.">Self-Assembled Monolayers with Dynamicity Stemming from (Bio)chemical Conversions: From Construction to Application.</a> ChemPhysChem. 14, 55-69 (2013).</li><li>Nakanishi, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Switchable+Substrates+for+Analyzing+and+Engineering+Cellular+Functions.">Switchable Substrates for Analyzing and Engineering Cellular Functions.</a> Chem. Asian J. 9, 406-417 (2014).</li><li>Yamamoto, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+Situ+Modification+of+Cell-Culture+Scaffolds+by+Photocatalytic+Decomposition+of+Organosilane+Monolayers.">In Situ Modification of Cell-Culture Scaffolds by Photocatalytic Decomposition of Organosilane Monolayers.</a> Biofabrication. 6, 035021 (2014).</li><li>Sekine, K., Yamamoto, H., Kono, S., Ikeda, T., Kuroda, A., Tanii, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surface+Modification+of+Cell+Scaffold+in+Aqueous+Solution+using+TiO2+Photocatalysis+and+Linker+Protein+L2+for+Patterning+Primary+Neurons.">Surface Modification of Cell Scaffold in Aqueous Solution using TiO2 Photocatalysis and Linker Protein L2 for Patterning Primary Neurons.</a> e-J. Surf. Sci. Nanotech. 13, 213-218 (2015).</li><li>Arima, Y., Iwata, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+Surface+Functional+Groups+on+Protein+Adsorption+and+Subsequent+Cell+Adhesion+using+Self-Assembled+Monolayers.">Effects of Surface Functional Groups on Protein Adsorption and Subsequent Cell Adhesion using Self-Assembled Monolayers.</a> J. Mater. Chem. 17, 4079-4087 (2007).</li><li>Fujishima, A., Zhang, X., Tryk, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TiO2+Photocatalysis+and+Related+Surface+Phenomena.">TiO2 Photocatalysis and Related Surface Phenomena.</a> Surf. Sci. Rep. 63, 515-582 (2008).</li><li>Sigal, G. B., Mrksich, M., Whitesides, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+Surface+Wettability+on+the+Adsorption+of+Proteins+and+Detergents.">Effect of Surface Wettability on the Adsorption of Proteins and Detergents.</a> J. Am. Chem. Soc. 120, 3464-3473 (1998).</li><li>Zhang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Transparent+and+Photo-Patternable+Superhydrophobic+Film.">A Transparent and Photo-Patternable Superhydrophobic Film.</a> Chem. Commun. 2007, 4949-4951 (1039).</li><li>Kaech, S., Banker, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Culturing+Hippocampal+Neurons.">Culturing Hippocampal Neurons.</a> Nat. Protoc. 1, 2406-2415 (2006).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

在我们目前的协议， 二氧化钛膜通过射频磁控溅射形成。我们是有利于沉积的这种方法，因为它允许我们可重复使用亚纳米粗糙度调制成光催化二氧化钛薄膜。虽然溅射淀积过程是熟悉的材料科学家和电子工程师，它可能不是很访问生物学家。在这种情况下，旋涂的TiO 2膜 。将另外的选择23。在该方法中， 二氧化钛纳米颗粒溶解在溶剂中通过离心力铺展?...

半导体光刻工艺及其衍生物-诸如光刻1,2，电子束光刻3-6，和微接触印刷7-10 -现在已成为一个既定的工具在细胞生物学生长的活细胞在限定位置和几何形状。图案形成方法依赖于使用微制造基底的，由微岛细胞容许涂料在非允许的背景。例如基底用作模板图案的细胞。这些技术为我们提供了新的方法来设计的细胞和它们的功能在一个单和多细胞水平上，以提取细胞的固有特性，并增加细胞为基础的药物筛选11的吞吐量。 在细胞图案化的自由度度会大大增加，如果模板图案几何可以改变在原位 ， 即 ，当细胞是上一次一培养urface。常规方法的图案形成，不能直接应用于这里，因为它们处理样品中的气氛或真空。因此各 ​​种新型的表面改性技术已被提出，它是基于，例如，在光反应性化合物12,13或激光烧蚀5,14，仅举几例。所提出的方法已经由Robertus 等人已很好地审查 。15，以及最近由Choi 等人的 16和中西17。 在这里，在这篇文章中，我们描述了一种新的原位表面修饰，这需要对二氧化钛的优势有机分子的光催化分解（ 二氧化钛）表面18,19协议。在该方法中，TiO 2膜被插入在玻璃基板和接口单元中的有机薄膜之间，且有机薄膜通过局部地照射紫外线（UV）的分解原位光到感兴趣的区域（λ&lt;388纳米）。我们表明，新的协议可以用于创建细胞外基质蛋白和活细胞双方易地和原位微图案。 二氧化钛是生物相容的，化学稳定的，且光学透明的，特征，其中使得它友好引入在细胞培养实验。该协议提供了一个材料科学为基础的替代修改细胞培养支架的细胞培养环境。

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Glass coverslip</td>
			<td>Warner Instruments</td>
			<td>CS-15R15</td>
			<td>15 mm, #1.5 thickness</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Diamond scriber</td>
			<td>Ogura Jewel Industry</td>
			<td>D-Point Pen</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RF sputtering system</td>
			<td>ANELVA</td>
			<td>SPC350</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TiO2 sputtering target</td>
			<td>Kojundo Chemical Lab</td>
			<td>Titanium (IV) oxide, target</td>
			<td>Purity, 99.9%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plasma reactor</td>
			<td>Yamato</td>
			<td>PR301</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>n-octadecyltrichlorosilane 
			(OTS)</td>
			<td>Aldrich</td>
			<td>104817</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Toluene</td>
			<td>Wako</td>
			<td>204-01866</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue-culture dish (35 mm)</td>
			<td>Greiner</td>
			<td>627160</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue-culture dish (60 mm)</td>
			<td>BD Falcon</td>
			<td>353002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Type-IV collagen</td>
			<td>Nitta Gelatin</td>
			<td>Cellmatrix Type IV</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D-PBS</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>14190-144</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#39;s modified Eagle&#39;s medium (DMEM)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11885-084</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal bovine serum</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>12483-020</td>
			<td>Heat-inactivate and pass through a 0.22 mm filter before use</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Horse serum</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>26050-088</td>
			<td>Pass through a 0.22 mm filter before use</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin-streptomycin (100x)</td>
			<td>Nacalai tesque</td>
			<td>26253-84</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>7S nerve growth factor (NGF)</td>
			<td>Alomone Labs</td>
			<td>N-130</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine serum albumin (BSA)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A2153</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EDTA</td>
			<td>Dojindo</td>
			<td>N001</td>
			<td>Stock solution in 0.5 M</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TiO2 nanoparticle</td>
			<td>Tayca</td>
			<td>TKD-701</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

photopatterning proteins and cells in aqueous environment using tio2 photocatalysis

吸附的二氧化钛（TiO 2的）的表面上的有机污染物可以通过光催化下的紫外线（UV）光分解。在这里，我们描述了一种新的协议采用二氧化钛光催化局部改变衬底表面的细胞亲和力。在这个实验中，一个薄的TiO 2膜为溅射镀膜在玻璃盖玻片，并在TiO 2表面随后改性以从十八烷基三氯硅烷（OTS）衍生的有机硅烷单层，其抑制细胞粘附。将样品浸在细胞培养基中，和聚焦UV光照射至一个八角形区域。当神经元细胞系PC12细胞铺在样本，细胞粘附只在紫外线照射的区域。进一步的研究表明这种表面改性也可以在原位进行，也就是说，即使当细胞生长在衬底上。适当的修改表面的所需的细胞外矩阵Protein胶原存在于在紫外线照射时的介质。这里提出的技术可以潜在地在图案形成多种细胞类型可以采用用于构建共培养系统或任意地操纵细胞培养下。

图2A示出了溅射沉积的 TiO 2膜的横截面扫描电子显微镜（SEM）图像。从观察，膜的厚度估计为大约150纳米。引人注目这里是所沉积的TiO 2膜的平整度。通过原子力显微镜（AFM）进一步分析显示，在表面的根均方（RMS）粗糙度为0.2纳米（ 图2B）。 当TiO 2的表面被改性以OTS，然后浸渍在含有血清的生长培养基中，血清白蛋白吸附到...

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Photopatterning Proteins and Cells in Aqueous Environment Using TiO2 Photocatalysis

We describe a protocol for modifying cell affinity of a scaffold surface in aqueous environment. The method takes advantage of titanium dioxide photocatalysis to decompose organic film in the photo-irradiated region. We show that it can be used to create microdomains of scaffolding proteins, both ex situ and in situ.

光图案蛋白质和细胞中的水环境中使用二氧化钛<sub&gt; 2</sub&gt;光催化

Organic contaminants adsorbed on the surface of titanium dioxide (TiO2) can be decomposed by photocatalysis under ultraviolet (UV) light. Here we describe ...

photopatterning-proteins-cells-aqueous-environment-using-tio2

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Photopatterning Proteins and Cells in Aqueous Environment Using TiO2 Photocatalysis

7.8K 次观看.  Tohoku University. We describe a protocol for modifying cell affinity of a scaffold surface in aqueous environment. The method takes advantage of titanium dioxide photocatalysis to decompose organic film in the photo-irradiated region. We show that it can be used to create microdomains of scaffolding proteins, both ex situ and in situ.