血管化异位脾移植小鼠模型在脾细胞生物学和移植免疫研究中的应用

脾脏移植的小鼠模型为揭示脾脏细胞在炎症性疾病中局部和全身免疫反应的作用提供了绝佳的机会。该协议的主要优点是，通过使用致癌小鼠，脾脏移植可以检查脾脏细胞的命运、寿命和功能。在开始手术之前，在手术平台上放置一个无菌的一次性窗帘，并确认麻醉供体小鼠对手趾捏缺乏反应。

剃毛从整个腹部区域，并放置鼠标在手术显微镜下在6至10倍的放大率无菌手术平台。用酒精准备垫对裸露的皮肤进行消毒，用手术胶带固定四肢。通过三到四厘米的中线垂直皮肤切口进入腹部，从到 xyphoid 过程。

使皮肤血管发白，将切口延伸到两侧的侧腹部，以便更好地暴露。使用无菌棉签，将肠子移动到腹部右侧以暴露脾脏，并使用无菌低温烧灼烧灼附于脾脏的短胃静脉。将一块无菌纱布浸泡在脾脏上，用37摄氏度的盐水浸泡，以保持其湿润，分离和调动入口静脉从胰腺组织。

如所证明，将门户静脉的分支进行拉起。将缝合线从脾脏静脉的入口静脉周围放置，然后将脾脏翻转到右侧，以暴露腹腔躯干的主动脉和脾动脉。解剖和调动主动脉腹腔动脉，并在主动脉周围缝合到腹腔动脉附近。

将 100 个国际肝素单位注入劣质的文纳卡瓦或 IVC 中， 使全身肝素化。三分钟后，将主动脉的肝动脉和胃动脉与腹腔动脉连接。从腹主动脉到腹腔躯干，用10毫升的4摄氏度肝素盐水将全身透水。

收集脾脏移植和块与相关的动脉腹腔脾脏片段在门户静脉以及脾脏静脉和胰腺组织的一小部分。然后在五毫升四摄氏度的盐水中保存移植物。手术区域准备后，通过中线切口进入接收者腹部，就像为捐赠者一样，通过连接脾脏和动脉来去除接受者的原生脾脏。

用37摄氏度浸泡的纱布盖住肠组织，小心地将肠子移动到左侧。用两个四毫升微血管夹解剖和合接 IVC 中下动脉大动脉的腰椎，并交叉夹紧 IVC 中的下动脉。将11-0尼龙缝合线穿过骨道，并缩回容器，以便创建带微切口的椭圆肌。

使用 30 量针刺穿 IVC 以创建椭圆形静脉切除术，并延长开口到供体入口静脉的长度。用500微升的肝素盐水冲洗大动脉和 IVC，清除血管中的血内血或血块，将供体脾脏移植物放入接受者腹部的右侧。仔细识别供体大动脉袖口和入口静脉。

在确认容器没有扭曲后，用四摄氏度的盐水浸泡纱布盖住脾脏移植物。使用两个 11-0 留缝合线，将供体大动脉袖口连接到接受者动脉切除术的近位和近侧顶点，并在供体大动脉袖口和接受者耳管切除术前壁之间用两到三口连续 11-0 尼龙缝合进行心肺病。将脾脏移植物转向接受者左侧，在供体大动脉袖口和接受者耳皮后壁之间进行心肺病。

在供体入口静脉和接受者 IVC 之间进行静脉动脉瘤，每侧有四到五口连续缝合。先缝合容器流明内的后壁，然后使用相同的缝合线关闭前壁。在 IVC 外的下角放置一个结，完成结切除术。

现在释放容器夹，并使用无菌棉签棉布棉布，直到脾脏颜色恢复。以连续图案的 5-0 合成可吸收的 Vicryl 缝合线关闭腹部，并在中断的图案中用 5-0 尼龙缝合线关闭皮肤层。然后将250微升热盐水下皮注射到四个不同的位置，并在30摄氏度的温度控制培养箱中加热小鼠，在手术后最初几个小时进行监测，直到动物恢复足够的意识，转移到家庭笼子。

移植后脾脏异体的第一天和七天，脾脏异丙酮的血氧素和eosin显示，脾脏异体结构在术后的第一周保持不变。流动细胞测量分析，研究移植后供体脾细胞迁移，结果表明，约50%的脾细胞是移植后一天产生的供体，约46%是接受者。移植后七天，供体衍生的白细胞约占脾细胞总数的32%，而接受者衍生的细胞增加至约53%，供体白细胞早在第一天就迁移到淋巴结、血液和骨髓中，并至少维持到第七天，产生一种独特的奇美拉，对脾细胞贩运研究有价值。

使用转基因敲击小鼠作为脾脏捐赠者将允许调查脾脏细胞衍生中介或关键信号通路在疾病过程中的作用。该模型可能是探索脾脏细胞群的反应病原体，损伤，炎症或移植排斥机制的有力工具。