牛磺胆酸钠诱导C57BL / 6小鼠严重急性胰腺炎

该方法可用于重现急性胆道胰腺炎中发生的炎症事件。可以在早期阶段研究胰腺组织的变化，这在临床上通常是不可能的。这种技术的主要优点是，对于训练有素的研究人员来说，繁殖起来既快速又容易，并且它提供了与人类急性胰腺炎相似的结果。

该方法可用于研究药物分子的药理学免疫反应和其他治疗干预措施，因为它允许研究胰腺和邻近器官中的炎症介导细胞。在尝试该协议时，定位器官并建立插管区域至关重要。记住器官的位置，并首先使用亚甲蓝等有色溶液进行注射应用。

用脚趾捏检查麻醉深度后，用5%聚维酮碘溶液清洁麻醉小鼠的腹部区域。使用修剪器去除胸部和下腹部之间的毛发，并用70%的酒精清洁约两平方厘米的手术区域。将动物固定在手术板上，用剪刀水平切开腹部上部五毫米的皮肤，并在西腓手术下方一厘米处切割。

在腹膜上重复切口，以最小的腔暴露进行剖腹手术。使用牵开器，将肝脏拉向头部，距离肠道约一厘米，并定位胰腺和十二指肠的区域。使用镊子，将肝脏抬向动物头部。

通过轻轻拉动小肠的部分，用6-0聚丙烯缝合线固定两个侧端，以便更好地观察胆总管的远端。使用微血管夹，暂时闭塞近端胆总管。将器官暴露在腹腔外。

然后用8-0暂时闭塞远端胆总管缝合。为了进入胆总管，刺穿壶腹周围区域，该区域表现为小肠壁的白色部分。将0.4毫米的针头连接到0.54毫米的聚乙烯管，启动输液泵，以每10克体重10微升的恒定速度输注2.5%牛磺胆酸钠溶液三分钟。

输液后，取出微血管夹，临时8-0缝合线，并将注射针头从胰胆管中取出。用6-0非吸水性单丝聚丙烯缝合线缝合腹部。剖腹手术和末端缝合之间的时间不应超过30分钟。

手术后，将动物放在聚乙烯箱中，里面衬有木屑和水，随意食物。轻轻握住动物，将皮肤向后拉，促进眼球的轻微突出，并将动物的眼睛朝上放置。在动物的眼睛中滴入含有局部麻醉剂的眼药膏。

将毛细管的末端置于眼角，并以约30至45度的角度将其轻轻插入眼球下方。旋转毛细管直至血流开始。收集结束后，通过轻轻按压眼睑来确保体内平衡。

之后，使用27号针，将四毫升冰冷的PBS注射到小鼠的腹膜腔中。注射后，轻轻按摩腹膜10秒钟以去除粘附的细胞。使用剪刀和镊子，在内层皮肤和肌肉组织上做一小块0.5厘米的切口，露出腹腔。

将球形移液管插入腹膜并收集尽可能多的液体，注意不要吸入脂肪组织。从头部区域收集一部分胰腺进行进一步处理。将收集的液体沉积在冰上保存的管中。

然后将腹膜液以250倍G离心5分钟，并储备上清液用于白细胞介素-6剂量。为了获得血清，将收集的血液样品以700倍G离心15分钟，并储备上清液用于淀粉酶和白细胞介素-6剂量。与假组的组织样本相比，诱导急性胰腺炎后12小时的胰腺组织分析显示受影响器官的强烈炎症。

在对假和APTA组织样本进行苏木精曙红染色后的组织学检查表示了类似的结果。血清分析显示，与假组相比，AP组的血清淀粉酶和白细胞介素-6细胞因子浓度显着增加。同时，AP组腹膜腔液中白细胞介素-6浓度显著升高。

该模型中胰腺炎的严重程度与输注的浓度、体积和压力以及急性胰腺炎诱导的时间成比例地取决于。在这种技术的帮助下，可以研究连续腹膜灌洗对严重急性胰腺炎的影响。