甲状旁腺是一个具有非常重要功能的小器官。我们的协议可用于开发新的PG识别技术,可以帮助外科医生在甲状腺癌甲状腺切除术期间保护它。该模型的主要优点是可以通过IONP的阴性成像观察到甲状腺和PG之间的明显差异。
此外,这种大鼠模型的成本和操作难度比大型动物模型低得多。首先,将预热的加热垫放在手术台上,以便在手术过程中维持动物的体温,然后将麻醉的大鼠转移到放置在手术台上的手术单上。使用橡皮筋将大鼠的四肢固定在手术台上,并在大鼠的肩膀下放置一个由悬垂物制成的圆柱形枕头,使其头部向后倾斜,完全暴露颈部区域,然后在颈部区域涂抹脱毛膏,直至下颌下间隙,向下至剑突,两侧涂抹至胸锁乳突肌外侧。
三分钟后,用纸巾轻轻擦拭头发和脱毛膏。接下来,使用碘伏棉球对颈部中部和周围区域进行消毒。从中去除头发。
用手术布覆盖动物,使孔与消毒区域对齐。使用手术刀,在大鼠颈部的前中线做一个大约五厘米的纵向切口。沿着切口两侧提起皮肤,并使用剪刀,沿白颈线纵向切割。
用镊子分离胸舌骨肌和胸骨肌。使用血管钳将分离的肌肉夹在颈部前面,然后将夹紧的组织拉到外面。使用针头将缝合线穿过夹紧的组织。
打一个结并将缝合线固定在手术台的手术布上。在手术区以盾状定位甲状腺软骨,以环形环状定位环状软骨为上边界,然后以颈部前部和中部的管状软骨环形定位气管作为手术区的下边界。找到甲状腺,这是一个红色的蝴蝶形腺体,位于气管另一侧的上下边界之间。
接下来,找到两个梭形甲状旁腺,它们呈红色,但比周围的甲状腺轻,在甲状腺的上侧和外侧有一定的边界。拍摄甲状旁腺与气管、甲状腺和喉部的正面照片。解剖食道后部并使用牵开器,暴露甲状旁腺的右侧。
拍摄甲状旁腺与甲状腺和气管的右侧照片,并同样曝光和捕获腺体的左侧。使用胰岛素注射器将10微升黑色氧化铁纳米颗粒悬浮液局部注射到甲状腺中心,并用纱布轻轻按压注射部位5秒钟,然后观察黑色氧化铁纳米颗粒在甲状腺内的快速扩散,而不是甲状旁腺,因为它对甲状旁腺进行负染色并将其与周围的甲状腺区分开来。拍摄负染色甲状旁腺与气管、甲状腺和喉部的正面、左侧和右侧照片。
注射后,造影剂黑色氧化铁纳米颗粒容易在甲状腺内扩散并将其染成黑色,但由于其高组织密度,不能浸润甲状旁腺。对注射甲状腺的黑色氧化铁纳米颗粒的组织学分析表明,甲状旁腺富含紧密排列的首席细胞,而甲状腺具有许多松散的管腔,表明组织密度要低得多。在此过程中应记住两件重要的事情。
首先,老鼠的姿势。我们建议倾斜耳朵并向后仰,完全暴露颈部区域。其次,当我们注射IOPs时,我们应该使用细确保针,因为甲状腺表面充满了血管。
该过程也可以通过PG的自发荧光成像来进行,PG是非侵入性的,提供实时信息,并且不使用染料作为造影剂,但自发荧光信号较弱,成像效率也较差。其他研究人员可以使用这种简单有效的大鼠模型来开发和评估新的PG识别技术和产品,而不是使用更复杂和昂贵的大型动物,如狗和猪。