부갑상선은 매우 중요한 기능을 가진 작은 기관입니다. 우리의 프로토콜은 외과의가 갑상선암에 대한 갑상선 절제술 중에 이를 보호하는 데 도움이 될 수 있는 새로운 PG 식별 기술을 개발하는 데 사용될 수 있습니다. 이 모델의 가장 큰 장점은 IONP의 음성 영상을 통해 갑상선과 PG 사이의 명확한 차이를 관찰 할 수 있다는 것입니다.
또한, 비용 및 운영 어려움은 대형 동물 모델보다이 쥐 모델의 경우 상당히 낮습니다. 시작하려면 수술 중 동물의 체온을 유지하기 위해 수술대에 예열 된 가열 패드를 놓은 다음 마취 된 쥐를 수술대에 놓인 수술 용 드레이프로 옮깁니다. 고무 밴드를 사용하여 쥐의 팔다리를 수술대에 고정하고 쥐의 어깨 아래에 드레이프로 만든 원통형 베개를 놓아 머리를 뒤로 젖히고 목 부위를 완전히 노출 한 다음 목 부위, 턱밑 공간까지, xiphoid 과정까지, 그리고 양쪽에서 흉쇄 유돌근의 바깥쪽으로 제모 크림을 바르십시오.
3 분 후 머리카락과 탈모 크림을 티슈로 부드럽게 닦으십시오. 다음으로, iodophor 면봉을 사용하여 목 중앙과 주변 부위를 소독하십시오. 머리카락이 제거됩니다.
구멍을 소독 된 부위와 정렬하여 외과 용 드레이프로 동물을 덮으십시오. 메스를 사용하여 쥐의 목 앞쪽 정중선에 약 5 센티미터의 세로 절개를하십시오. 절개의 양쪽을 따라 피부를 들어 올리고 가위를 사용하여 선상 알바 자궁 경부를 따라 세로로 자릅니다.
겸자를 사용하여 스테로이드 갑상선과 흉골 갑상선 근육을 분리하십시오. 혈관 집게를 사용하여 목 앞에서 분리 된 근육을 고정하고 고정 된 조직을 바깥쪽으로 당깁니다. 바늘을 사용하여 봉합사를 고정 된 조직을 통과시킵니다.
매듭을 만들고 봉합사를 수술대의 수술 용 드레이프에 고정하십시오. 갑상선 연골은 방패 모양으로, 윤상 연골은 고리 모양을 기준으로 수술 부위의 상부 경계로 위치시킨 다음, 목 앞과 중앙의 관형 연골 고리 모양을 기준으로 기관을 수술 부위의 하부 경계로 찾습니다. 위쪽과 아래쪽 경계 사이의 기관 반대쪽에 있는 빨간 나비 모양의 샘인 갑상선을 찾습니다.
다음으로, 갑상선의 위쪽과 바깥쪽에 특정 경계가있는 주변 갑상선보다 붉은 색이지만 주변 갑상선보다 가벼운 방추형 모양의 두 개의 부갑상선을 찾습니다. 기관, 갑상선 및 후두가있는 부갑상선의 정면 사진을 찍습니다. 식도의 뒤쪽을 해부하고 견인기를 사용하여 부갑상선의 오른쪽을 노출시킵니다.
갑상선과 기관이있는 부갑상선의 오른쪽 사진을 찍고 유사하게 땀샘의 왼쪽을 노출시키고 캡처합니다. 인슐린 주사기를 사용하여 10 마이크로 리터의 흑색 산화철 나노 입자 현탁액을 갑상선 중앙에 국소 적으로 주입하고 주사 부위를 거즈로 5 초 동안 부드럽게 누른 다음 부갑상선을 부정적으로 염색하고 주변 갑상선과 구별하기 때문에 부갑상선이 아닌 갑상선 내에서 흑색 산화철 나노 입자의 빠른 확산을 관찰하십시오. 부정적으로 얼룩진 부갑상선의 앞면, 왼쪽 및 오른쪽 사진을 기관, 갑상선 및 후두와 함께 캡처합니다.
주사 후 조영제인 흑색 산화철 나노입자는 갑상선 내에서 쉽게 확산되어 검게 염색되지만 조직 밀도가 높기 때문에 부갑상선에 침투할 수 없습니다. 주사 된 갑상선 흑색 산화철 나노 입자의 조직 학적 분석에 따르면 부갑상선은 밀접하게 정렬 된 주요 세포로 풍부 한 반면 갑상선은 훨씬 낮은 조직 밀도를 나타내는 많은 느슨한 내강을 특징으로합니다. 이 절차에서 두 가지 중요한 사항을 기억해야합니다.
첫째, 쥐의 자세. 귀를 기울이고 뒤로 향하여 목 부위를 완전히 노출시키는 것이 좋습니다. 둘째, IONP를 주사할 때 갑상선 표면이 혈관으로 가득 차 있기 때문에 미세 보장 바늘을 사용해야 합니다.
이 절차는 비침습적이고 실시간 정보를 제공하며 염료를 조영제로 사용하지 않는 PG의 자가형광 이미징으로도 수행할 수 있지만 자가형광 신호가 약하고 이미징 효율도 좋지 않습니다. 다른 연구자들은 개와 돼지와 같은 더 복잡하고 값 비싼 대형 동물을 사용하는 대신이 간단하고 효과적인 쥐 모델을 사용하여 새로운 PG 식별 기술 및 제품을 개발하고 평가할 수 있습니다.
