血管内闭塞的小鼠卒中模型很好地转化了当前的血栓切除术和再灌注治疗,但是,它并没有转化有效的临床卒中单元常规。在本视频中,我们展示了我们经过验证的转化小鼠卒中单元概念和标准化神经学评估量表。我们协议的第一种方法是指鼠标笔触单元。
每天评估动物的临床状况,并通过对分数求和来计算其风险认证分数,如下所示。根据 RSS 和动物的中风后阶段调整支持的频率和强度。为了获得积极的营养支持,轻轻但牢固地抓住老鼠的脖子毛发。
用中指稳定它的脸颊,然后将中指滑向鼠标的鼻子,抵住它的脸颊并保持位置。将注射器的尖端放在其牙齿之间,朝向其脸颊的内侧。每次给予大约 40 或 50 微升凝胶食物。
轻轻地将鼠标放回笼子,并在 1 到 2 分钟后重复喂食。接下来,演示实验卒中量表的焦点成分。从前肢麻痹的测试 1 开始。
轻轻地将鼠标从尾巴底部抬起并检查前肢。前肢对称向前伸展和活动度为零。对侧肢体轻度屈曲和运动减少得 1 分。
对侧肢体轻度屈曲得 2 分。对侧肢体与躯干的粘附性得 3 分,肢体瘫痪且肢体或身体运动得 4 分。现在评估后肢麻痹。
按照测试 1 继续握住鼠标的尾部底座。检查后肢,后肢的对称伸展和运动得分为零。后肢不对称性得分为 1 分,对侧后肢的运动明显减少和位置不对称。
继续握住鼠标的尾部基部以评估其躯干对称性。两侧对称躯干屈曲正常且躯干与纵轴不持续屈曲超过 30 度,得分为零。对于明显的躯干屈曲与纵轴成 30 度以上且以对侧优势,得 1 分。
现在测试盘旋行为。将鼠标轻轻放在平坦的表面上,让它自由移动至少一分钟。观察其移动模式。
当鼠标快速线性移动时,得分为零。倾向于转向一侧但不在紧密的圈子中得 1 分。对于一侧的闭合非常量圆,得 2 分。
向一侧持续闭合的圆圈得 3 分,旋转、摇摆或根本没有移动得 4 分。现在测试身体对称性。从测试 4 继续,让鼠标在平面上自由移动。
观察它的机头到尾轴。正常姿势、从长凳上抬高躯干和笔直的尾巴得零分。当身体略微向一侧弯曲且尾巴向远端弯曲时,轻微不对称得 1 分。
当身体向对侧倾斜或弯曲且尾巴近端弯曲时,中度不对称得分为 2。当身体弯曲、一侧躺在长凳上并且尾巴明显弯曲时,明显的不对称性得 3 分。当身体弯曲并且一侧不断躺在长凳上时,极端不对称得 4 分。
现在对于测试 6,从测试 5 继续并观察其步态。检查步态运动缺陷。当四肢灵活、对称和快速时,正常步态得零分。
僵硬、不灵活和缓慢的步态而没有跛行得 1 分。2 分,以不对称的动作清晰地跛行。轻轻推搡后颤抖、漂移或跌倒得 3 分。
无自发行走得 4 分。现在测试强制绕圈。握住鼠标的尾巴根部,将其从表面稍微抬起,使其用前肢行走。
观察它的移动。正常线性运动的得分为零。1 分表示倾向于转向一侧。
当鼠标在完全闭合的圆圈处向一侧旋转时,得 2 分。当它旋转并且移动缓慢时得 3 分。当鼠标不前进并且树干的前部位于长凳上时,得 4 分。
下面我们介绍如何执行终端安全评估测试。如视频所示,将鼠标放在手掌上,然后轻轻地前后摆动。请注意鼠标如何保持其直立位置并平衡横向力,其身体不接触手掌或手指。
该测试的不同分数的镜头没有帮助,因为它的评分在很大程度上依赖于检测手能感觉到的鼠标快速而微妙的动作,而视觉提示不足以进行评分。为方便起见,我们以文本形式描述每个分数。现在评估前肢放置。
从鼠标的背部或尾部底部握住鼠标,并将其对准光束作为要到达的目标。观察对称伸出。然后,一旦它抓住光束,轻轻将其拉开并观察前肢是否对称释放。
对称伸出和释放得分为零。任何不对称性得 1 分。现在测试前肢的感觉运动缺陷。
如图所示,握住鼠标的背部,然后用细尖连续刺激前爪。正常提示抓取动作得分为零。对侧前爪的抓握缺失或明显延迟得 1 分。
接下来,测试其光束行走。将鼠标放在横梁上,使其鼻子-尾轴与横梁平行,并使其在横梁上保持平衡或行走。观察平衡、肢体麻痹和跌倒。
始终将手放在动物下方,以防动物掉落。当鼠标以稳定的姿势保持平衡并走向光束的一侧时,得分为零。当它抓住横梁的侧面并且不在上面行走时,得 1 分。
请注意,它可能需要一些时间才能在横梁上保持平衡。当一条肢体从横梁上掉下来时得 2 分。当两条肢体从横梁上掉下来时得 3 分。
当鼠标试图在横梁上保持平衡但在 40 秒后脱落时,得 4 分。请注意,在此测试中,应观察鼠标长达 60 秒。当跌倒发生在 20 到 40 秒之间时,得 5 分。
当它没有尝试平衡或挂在横梁上时,得 6 分。评估胡须感觉。将鼠标放在开放的工作台上,用细长的棉签成功刺激它的胡须。
从盲角来,观察它的转弯响应。双侧刺激时正常快速转动得分为零。对侧反应较慢得 1 分。
不存在对侧反应得 2 分。不存在对侧病变和较慢的同侧反应得 3 分。双侧缺失反应得分为 4。
测试攀爬能力。将鼠标以 45 度角放在橡胶涂层表面的中心,并在它尝试攀爬时观察其响应。当鼠标快速爬到表面顶部时,得分为零。
当它因劳损而攀爬且出现肢体无力时,得 1 分。当它保持在斜坡上并且没有滑倒或爬升时,得 2 分。尽管努力防止跌倒,但它从斜坡上滑下来时得 3 分。
当它滑动时得 4 分,没有努力防止跌落。小鼠卒中单元方案可重复地支持小鼠在丝状大脑中动脉闭塞后的存活,维持 80% 的存活率局灶性 ESS 擅长检测神经功能缺损、捕获恢复和在卒中后长达 6 个月内保持敏感性。作为对局灶性 ESS 的补充,您可以使用梯级测试来检测和量化前肢和后肢无力,最长可达 6 个月。