혈관내 폐색을 이용한 마우스 뇌졸중 모델은 현재의 혈전절제술 및 재관류 치료를 잘 번역하지만, 효과적인 임상 뇌졸중 단위 루틴을 번역하지는 않습니다. 이 비디오에서는 입증된 병진 마우스 스트로크 단위 개념과 표준화된 신경학적 평가 척도를 보여줍니다. 프로토콜의 첫 번째 방법은 마우스 스트로크 단위를 나타냅니다.
동물의 임상 상태를 매일 평가하고 여기에 표시된 대로 점수를 합산하여 위험 인증 점수를 계산합니다. RSS 및 동물의 뇌졸중 후 단계에 따라 지원 빈도와 강도를 조정합니다. 적극적인 영양 공급을 위해 쥐의 목덜미부터 부드럽지만 단단하게 잡고 잡으십시오.
가운데 손가락으로 뺨을 안정시키고 가운데 손가락을 쥐의 코 쪽으로 뺨에 대고 위치를 유지합니다. 주사기 끝을 치아 사이에 놓고 뺨 안쪽으로 향하게 합니다. 매번 약 40 또는 50 마이크로리터의 젤 식품을 주십시오.
마우스를 케이지에 부드럽게 다시 넣고 1-2분 후에 다시 먹이를 줍니다. 다음으로, Experimental Stroke Scale의 초점 구성 요소를 보여줍니다. 앞다리 마비에 대한 첫 번째 검사부터 시작합니다.
쥐의 꼬리 부분에서 부드럽게 들어 올리고 앞다리를 검사합니다. 앞다리의 대칭적 전방 확장 및 이동성에 대해 0점을 얻습니다. 경미한 굴곡과 반대측 사지의 움직임 감소에 대해 1점을 얻습니다.
반대쪽 사지의 경미한 굴곡에 대해 2점을 얻습니다. 반대쪽 사지가 몸통에 부착되면 3점, 팔다리나 몸이 움직이지 않는 흉막질에 대해 4점을 받습니다. 이제 뒷다리 마비를 평가하십시오.
테스트 1에 따라 마우스의 꼬리 베이스를 계속 잡고 있습니다. 뒷다리를 검사하고 뒷다리의 대칭 확장 및 움직임에 대해 0점을 얻습니다. 뒷다리 비대칭에 대해 1점을 획득했으며, 움직임이 현저히 감소하고 반대 병변 뒷다리의 위치가 비대칭인 경우 1점을 받았습니다.
쥐의 꼬리 부분을 계속 잡고 몸통 대칭을 평가합니다. 양쪽에 대한 정상적인 대칭 몸통 굴곡에 대해 0점을 받고 수직 축에 대해 30도 이상의 지속적인 몸통 굴곡이 없는 경우 점수가 높습니다. 수직 축에 대해 30도 이상의 뚜렷한 몸통 굴곡에 대해 1점을 획득하고 반대 병변이 우세합니다.
이제 선회 동작을 테스트합니다. 마우스를 평평한 표면에 부드럽게 놓고 최소 1분 동안 자유롭게 움직이도록 두십시오. 그것의 움직임 패턴을 관찰하십시오.
마우스가 빠르고 선형으로 움직일 때 0점을 얻습니다. 한쪽으로 돌아서는 경향에 대해 1점을 얻지만 가까운 서클에서는 그렇지 않습니다. 한쪽으로 닫힌 불변의 원에 대해 2점을 얻습니다.
한쪽으로 지속적으로 가까운 원을 그리면 3점을 얻고 회전하거나 흔들리거나 전혀 움직이지 않으면 4점을 얻습니다. 이제 신체 대칭을 테스트합니다. 테스트 4에서 계속 진행하고 마우스가 평평한 표면에서 자유롭게 움직이도록 합니다.
꼬리 축에서 코까지 관찰하십시오. 정상적인 자세, 벤치에서 올라간 몸통, 곧은 꼬리의 경우 0점을 얻습니다. 몸이 약간 한쪽으로 구부러지고 꼬리가 말단으로 구부러진 경우 약간의 비대칭에 대해 1점을 얻습니다.
몸이 반대쪽으로 기울어지거나 구부러지고 꼬리가 근위부로 구부러진 경우 중간 정도의 비대칭에 대해 2점을 얻습니다. 몸이 구부러져 있고, 한쪽이 벤치에 놓여 있고, 꼬리가 명확하게 구부러져 있을 때 눈에 띄는 비대칭에 대해 3점을 얻습니다. 그리고 몸이 구부러지고 한쪽이 계속 벤치에 누워 있을 때 극단적인 비대칭에 대해 4점을 얻습니다.
이제 테스트 6에 대해 테스트 5를 계속하고 걸음걸이를 관찰하십시오. 보행 운동 결손이 있는지 확인하십시오. 팔다리가 유연하고 대칭적이며 빠를 때 정상적인 걸음걸이에 대해 0점을 얻습니다.
절뚝거리지 않고 뻣뻣하고 유연하지 않으며 느린 걸음걸이에 대해 1점을 얻습니다. 비대칭 움직임으로 명확한 절뚝거림을 위해 2점을 획득하십시오. 부드럽게 밀 때 떨거나, 표류하거나, 넘어질 때 3점을 얻습니다.
자발적인 산책이 없는 경우 4점을 얻습니다. 이제 강제 순환을 테스트하십시오. 쥐의 꼬리 밑부분을 잡고 앞다리로 걸을 수 있도록 표면에서 약간 들어 올립니다.
그것의 움직임을 관찰하십시오. 일반 선형 이동에 대해 0점을 얻습니다. 한쪽으로 쏠리는 경향에 대해 1점을 얻습니다.
마우스가 완전히 닫힌 원에서 한쪽으로 원을 그리면 2점을 얻습니다. 피벗하고 움직임이 느릴 때 3점을 얻습니다. 그리고 마우스가 전진하지 않고 트렁크의 앞부분이 벤치에 있을 때 4점을 얻습니다.
여기에서는 자세 테스트를 실행하는 방법을 설명합니다. 비디오와 같이 마우스를 손바닥에 놓고 앞뒤로 부드럽게 흔듭니다. 마우스가 수직 위치를 유지하고 횡력에 대해 균형을 이루는 방법과 몸이 손바닥이나 손가락에 닿지 않는 방법에 유의하십시오.
해당 테스트의 다른 점수에 대한 영상은 점수가 손으로 느껴지는 마우스의 빠르고 미묘한 움직임을 감지하는 데 크게 의존하고 시각적 단서가 점수에 충분하지 않기 때문에 도움이 되지 않습니다. 귀하의 편의를 위해 각 점수를 텍스트 형태로 설명합니다. 이제 앞다리 배치를 평가하십시오.
등 또는 꼬리 베이스에서 마우스를 잡고 도달할 대상으로 빔 쪽으로 향하게 합니다. 대칭적인 손을 내뻗는지 관찰하십시오. 그런 다음 빔을 잡으면 부드럽게 당겨 빼내고 앞다리가 대칭적으로 풀리는지 관찰합니다.
대칭적인 손 뻗기 및 해제에 대해 0점을 얻습니다. 모든 비대칭에 대해 1점을 얻습니다. 이제 앞다리의 감각 운동 결손을 검사하십시오.
시연된 대로 마우스의 등을 잡고 가는 팁으로 앞발을 연속적으로 자극합니다. 정상적인 프롬프트 잡기 동작에 대해 0점을 얻습니다. 반대쪽 앞발을 움켜쥐지 않거나 명확하게 지연된 경우 1점을 얻습니다.
다음으로, 빔 보행을 테스트합니다. 노즈-테일 축이 평행하게 빔에 마우스를 놓고 빔 위에서 균형을 잡거나 걸을 수 있도록 합니다. 균형, 사지 마비 및 낙상을 관찰하십시오.
동물이 떨어질 경우를 대비하여 항상 동물 아래에 손을 두십시오. 마우스가 안정된 자세로 균형을 잡고 빔의 한쪽으로 걸어갈 때 0점을 얻습니다. 빔의 측면을 잡고 걷지 않을 때 1점을 얻습니다.
빔에서 균형을 잡는 데 약간의 시간이 필요할 수 있습니다. 한쪽 팔다리가 빔에서 떨어질 때 2점을 얻습니다. 두 개의 팔다리가 빔에서 떨어질 때 3점을 얻습니다.
마우스가 빔에서 균형을 잡으려고 시도하지만 40초 후에 떨어질 때 4점을 얻습니다. 이 테스트에서는 최대 60초 동안 마우스를 관찰해야 합니다. 20초에서 40초 사이에 넘어질 때 5점을 얻습니다.
그리고 균형을 잡거나 빔에 매달리려고 시도하지 않을 때 6점을 얻습니다. 수염 감각을 평가합니다. 열린 벤치탑에 마우스를 놓고 얇고 긴 팁의 면봉으로 수염을 성공적으로 자극합니다.
맹목적인 각도에서 선회 반응을 관찰하십시오. 양측 자극에 대한 정상적인 빠른 회전에 대해 0점을 얻습니다. 더 느린 반대 반응에 대해 1점을 얻습니다.
반대 반응이 없는 경우 2점을 얻습니다. 반대 병변이 없고 느린 ipsilesional 반응에 대해 3점을 얻습니다. 그리고 양측 부재 응답에 대해 4점을 얻습니다.
등반 능력을 테스트합니다. 마우스를 45도 각도로 고무로 코팅된 표면의 중앙에 놓고 마우스가 올라가려고 할 때 반응을 관찰합니다. 마우스가 표면 위로 빠르게 올라갈 때 0점을 얻습니다.
긴장으로 오르막길을 오르고 팔다리에 힘이 빠질 때 1점을 얻으십시오. 경사면을 유지하고 미끄러지거나 오르지 않을 때 2점을 얻습니다. 넘어지지 않으려는 노력에도 불구하고 슬로프에서 미끄러질 때 3점을 얻습니다.
그리고 넘어지는 것을 막으려는 노력 없이 미끄러질 때 4점을 얻습니다. 마우스 스트로크 유닛 프로토콜은 사상체 중뇌동맥 폐색 후 마우스의 생존을 재현성 있게 지원하여 80%의 생존율을 유지했습니다. 국소 ESS는 신경학적 결함을 감지하고, 회복을 포착하고, 뇌졸중 후 최대 6개월 동안 민감도를 유지하는 데 탁월합니다. 국소 ESS를 보완하는 래더 가로대 테스트를 사용하여 최대 6개월 동안 앞다리 및 뒷다리 약점을 감지하고 정량화할 수 있습니다.
