我们试图提供猪急性肺栓塞的真实动物模型。该模型为研究肺栓塞的病理生理学创造了机会,也为评估新的治疗方法创造了机会。此外,该模型非常适合医护人员进行介入手术的实践培训。
近年来,急性肺栓塞领域发生了根本性的变化。新型药理学,尤其是介入疗法正在开发中,需要在现实的体内环境中进行临床前测试和开发。以前的体内模型使用人造材料,如胶水或塑料珠,来诱导肺栓塞。
在这个模型中,我们使用猪自己的血液来制造自体栓子,因此其大小、形状和质地与患者体内的栓子相似。该模型在以前的病理生理学和干预研究中得到了很好的表征。评估包括侵入性血流动力学网片、各种成像方式、组织学和生物化学。
由于猪的解剖结构与成年人相似,栓子和血流动力学表型与急性肺栓塞患者相似,因此该模型非常适合研究药物和介入治疗。首先,打开心肺氧合系统的包装并找到非肝素涂层的聚氯乙烯或 PVC 管。将其中 7 根管子切成约 30 厘米长的块,并用大止血钳关闭每根 PVC 管的一端。
获得麻醉的动物,建立超声引导下的血管内通路,并用生理盐水注入静脉鞘。对于凝块形成,首先,在其中一个静脉鞘上暂停等渗盐水输注,并从鞘中抽取总共 180 毫升的血液。将抽取的血液分成六根 PVC 管,并用另一把止血钳关闭每根管的顶部。
然后,在室温下垂直悬挂试管至少三个小时。接下来,通过护套冲洗盐水并重新开始盐水输注。要插入 26F 护套,请暂停连接到右颈外静脉护套的输液泵。
将一根超长的超硬导丝穿过护套。在透视引导下,将导线沿尾部穿过上中央静脉、上腔静脉、右心房,进入下腔静脉。然后,慢慢提取鞘,同时通过透视观察导丝保持在下腔静脉中。
使用无菌餐巾纸,压缩入口点,同时缩回护套。使用 Seldinger 技术将护套换成 16 French 扩张器。遇到阻力时,如有必要,延长皮肤切口,在透视引导下将鞘推进到静脉循环中。
再次使用 Seldinger 技术将 16 French 扩张器换成 26 French 鞘。慢慢地将鞘推进穿过大静脉,直到不透射线的尖端到达上腔静脉。小心地将扩张器和导丝从清管器中缩出,确保护套保持在原位。
抽血以确认护套位置,并用 60 毫升生理盐水冲洗,以确保护套完全冲洗。然后,在护套的外端和无菌窗帘下放置一叠无菌餐巾纸,使其高于心脏水平。重新连接输液泵并恢复盐水输注。
为了组装栓子输送装置,请在无菌条件下打开心肺氧合系统的其余部分。从自动输血装置中,找到连接到胎心切开容器底部的 10 厘米长的硅胶管和连接到硅胶管的 3 x 8 到 1 x 4 英寸的连接器。然后,将硅胶管切成两块大小相等的块,暂时将没有连接器的一半放在一边。
找到快速素线后,将其从鲁尔锁端切下约 20 厘米,并将开口端连接到连接器片的 1 x 4 英寸端。然后,将一个 3 x 8 英寸的片连接到一个 1 到 2 英寸的连接件上,用硅胶管的开口端完成 A 部分。找到任何 3 x 8 英寸的连接器,并将其连接到带有硅胶管开口端的 1 x 2 英寸连接器上。
为了评估凝块,取回一根含有完全形成的栓子的 PVC 管,轻轻地将栓子放在手术餐巾上,丢弃上清液。为了诱发急性肺栓塞,将一袋 1, 000 毫升的等渗盐水放入加压输液袋中。插入输液器,将压力袋充气至至少 200 毫米汞柱,但不要超过推荐压力。
然后,将栓子输送装置的 A 部分连接到三通旋塞阀的侧端口,然后将最后一根 PVC 管连接到部分 A 的开口端,将一个栓子放入管中并用生理盐水填充系统。将 B 部分连接到 PVC 管的另一端后,将栓子装置插入 26 French 护套中,打开加压盐水流约 5 秒钟以注入栓子。最后,诱导栓子,直到平均肺动脉压从基线增加一倍或直到所有 6 个栓子都被诱导,并监测猪以确保其保持稳定 30 分钟。
肺部 CT 扫描显示基线时无肺栓塞迹象,但诱导后可见多个栓子,肺梗阻百分比从 0 增加到 57.1%尸检显示肺动脉中有大的自体栓子。