11.24 : Affinitätschromatographie

Die Affinitätschromatographie ist eine leistungsstarke Technik, die häufig zum Trennen und Reinigen spezifischer Biomoleküle aus komplexen Gemischen eingesetzt wird. Sie nutzt die hochselektive Bindung zwischen einem Analyten und seinem Gegenstück, wie z. B. Antikörper-Antigen-Interaktionen. Das Gegenstück wird an der stationären Phase immobilisiert und bildet eine Affinitätssäule. Die stationäre Phase besteht typischerweise aus einem festen Träger, wie z. B. Agarose oder porösen Glasperlen, die den Affinitätsliganden immobilisieren. Die mobile Phase dient einem doppelten Zweck – sie unterstützt eine starke Bindung zwischen dem Analyten und dem Liganden und schwächt anschließend diese Interaktion, um den Analyten zu eluieren. Wenn das Gemisch mit dem gewünschten Analyt durch die Säule geleitet wird, bindet nur der Analyt, während andere Substanzen ausgewaschen werden. Der gebundene Analyt kann dann durch Veränderung der Bedingungen wie pH-Wert oder Ionenstärke, die seine Bindung schwächen, eluiert werden.

Diese Methode ist in der Biochemie besonders wertvoll, da sie spezifisch ist und bei der Isolierung von Proteinen, Enzymen, Substraten, Antikörpern, Antigenen, Rezeptoren und Hormonen eingesetzt werden kann. Die Affinitätschromatographie kann auch zur Isolierung einzelner optischer Isomere von Arzneimitteln eingesetzt werden, die unterschiedliche therapeutische Wirkungen aufweisen können. Bei diesem Verfahren werden monoklonale Antikörper verwendet, die für jedes Stereoisomer spezifisch sind.

Der Hauptvorteil der Affinitätschromatographie liegt in ihrer außergewöhnlichen Spezifität, die sie ideal für die schnelle Isolierung von Biomolekülen bei präparativen Arbeiten macht.