Nehmen Sie zunächst 70 bis 80 % konfluente Hep-3B-Zellen. Entfernen Sie 250 Mikroliter Medium aus jeder der Vertiefungen und fügen Sie 50 Mikroliter Medium mit der entsprechenden Behandlung oder dem entsprechenden Vehikel hinzu. Geben Sie 50 Mikroliter Medium in jede Vertiefung, die das Färbereagenz enthält, und inkubieren Sie die Zellen mit dem Farbstoff.
Nachdem Sie das Medium entfernt und die Zellen mit vorgewärmtem PBS gewaschen haben, fixieren Sie die Zellen mit 200 Mikrolitern Fixierlösung für 15 Minuten bei Raumtemperatur. Anschließend die Fixierlösung dekantieren und kurz mit 200 Mikrolitern PBS waschen. Zum Schluss fügen Sie 200 Mikroliter PBS hinzu.
Halten Sie die Zellen abgedeckt und vor Licht bei vier Grad Celsius geschützt und fotografieren Sie sie innerhalb von 24 Stunden.
