Detección de mitofagia en Caenorhabditis elegans y células de mamíferos utilizando colorantes específicos de orgánulos

La degradación de las mitocondrias dañadas por mitofagia es esencial para la función de la red mitocondrial. Desafortunadamente, este proceso disminuye con la edad. Desarrollamos y utilizamos fármacos que activan la mitofagia, promoviendo así un envejecimiento saludable para comprender la función de la mitofagia en el envejecimiento y las enfermedades relacionadas con la edad, incluido el Alzheimer.

Uno de los mayores desafíos es medir el proceso de mitofagia sin afectarlo. Estudios recientes han demostrado que la expresión de GFP en las mitocondrias de las células musculares induce estrés que es MT UPR. Por lo tanto, el uso de colorantes en animales o células no transgénicas es esencial y complementa las tecnologías genéticas.

Nuestro protocolo tiene tres ventajas principales. En primer lugar, no hay necesidad de generar animales transgénicos o células que expresen biosensores de mitofagia. En segundo lugar, no hay necesidad de infraestructura costosa y experiencia, como en el caso de la microscopía electrónica.

Y tercero, el cóctel de colorante orgánulo está disponible comercialmente y el protocolo es simple y rápido. El nuevo compuesto activador de la mitofagia VL-850 induce una mitofagia robusta, y de esta manera protege del estrés oxidativo y promueve la vida útil. Ahora la gran pregunta es determinar el mecanismo de acción subyacente.

Exploramos el mecanismo en múltiples niveles, desde el celular hasta el organismo utilizando C. elegans y células de mamíferos.