Beginnen Sie mit der Herstellung von Aliquoten syngener KPC-Tumorzellen in der erforderlichen Konzentration. Bewahren Sie diese Zellsuspension in einer Insulinspritze auf Eis auf. Als nächstes wird eine anästhesierte Maus auf eine sterile OP-Haube übertragen und in einer partiellen rechten lateralen Dekubitusposition positioniert.
Befestigen Sie die Gliedmaßen mit Klebeband. Sterilisieren Sie den Bauch der Maus mit einem Antiseptikum. Verwenden Sie eine Pinzette und eine Castroviejo-Schere, um einen 10 bis 15 Millimeter langen linken Hautschnitt unterhalb der Rippen zu machen.
Kontrollieren Sie die Hämostase bei Bedarf mit Wattestäbchen. Verwenden Sie einen Kauterstift, um die Gefäße zu verätzen. Als nächstes teilst du den darunter liegenden Muskel, um in das Bauchfell einzutreten.
Externalisieren Sie die Bauchspeicheldrüse und die Milz mit sterilen Wattestäbchen, um Gewebeschäden zu vermeiden. Spreizen Sie die Bauchspeicheldrüse, um ein Falten zu verhindern. Identifizieren Sie die Injektionsstelle des Tumors im Körper oder am Schwanz der Bauchspeicheldrüse.
Nach vorsichtiger Positionierung der Bauchspeicheldrüse halten Sie das Gewebe mit einer Pinzette fest und führen die Spitze der Insulinspritze mit der abgeschrägten Seite nach oben etwa vier bis fünf Millimeter ein. Injizieren Sie dann langsam die Tumorzelllösung. Eine erfolgreiche Injektion zeigt sich an der Bildung einer kleinen Blase.
Beenden Sie den Vorgang, indem Sie die Bauchspeicheldrüse vorsichtig in den Bauch zurückführen und darauf achten, die Blase nicht zu stören. Nachdem Sie die Einschnittsstelle geschlossen haben, legen Sie die Maus wieder in einen sauberen Käfig, der unter eine Heizlampe gestellt wird. Verabreichen Sie Antibiotika im Trinkwasser, um Infektionen zu verhindern.
Lassen Sie den Tumor 10 bis 14 Tage lang wachsen, bis er durch die Bauchdecke tastbar ist.