Zu Beginn legen Sie das vier bis sechs Tage alte anästhesierte Ferkel in die dorsale Liegeposition. Nach der Durchführung einer orotrachealen Intubation mit einem Schlauch mit Manschette auskultieren Sie die Lungenbasen, um die geeignete Platzierung des Endotrachealtubus zu bestätigen. Richten Sie eine mechanische Beatmung ein und überwachen Sie kontinuierlich die Narkosetiefe während der Operation durch Herzfrequenz, Blutdruck und Sauerstoffsättigung.
Passen Sie die Beatmungs- und Sedierungsparameter nach Bedarf an. Führen Sie dann einen 3-French-Katheter in die Oberschenkelarterie ein, gefolgt von einem 4-French-Katheter in die Vene. Initiieren Sie als Nächstes den eingerichteten CPB-Kreislauf (CPB), indem Sie den CPB-Schlauch kürzen und dabei genügend Abstand zwischen dem Tier und der Maschine einhalten.
Erstellen Sie eine Schlauchbrücke, um den Ausfluss des Membranoxygenators und den Pumpenzufluss zu verbinden. Sobald alle Verbindungspunkte versiegelt sind, spülen Sie den Kreislauf mit 300 Mikrolitern Heparin-Kochsalzlösung und 300 Millilitern frischem Spenderschweineblut, gefolgt von Natriumbicarbonat, Heparin und Calciumgluconat. Sobald der CPB-Kreislauf fertig ist, legen Sie die linke Vena jugularis interna frei und führen Sie den Nadelkatheter hinein.
Legen Sie in ähnlicher Weise die rechte Halsschlagader frei, um die Kanülierung vorzubereiten. Sobald ein Blutblitz sichtbar ist, führen Sie vorsichtig einen Führungsdraht in das Gefäß ein. Fädeln Sie einen Dilatator über den Draht und in das Gefäß.
Entfernen Sie dann den Dilatator. Fädeln Sie eine 8er Venenkanüle etwa vier Zentimeter langsam in das Gefäß ein und entfernen Sie den Draht, um sicherzustellen, dass die Kanüle an Ort und Stelle bleibt. Platzieren Sie dann eine 6 französische pädiatrische arterielle Kanüle in die rechte Halsschlagader, wie zuvor mit Dilatation demonstriert.
Zum Schluss verabreichen Sie einen intravenösen Heparinbolus durch die neu platzierte arterielle Kanüle. Nachdem Sie den Zugang erreicht haben, verwenden Sie 3-0 resorbierbare Nähte, um beide Kanülen am Tier zu befestigen, und Klebeband, um eine versehentliche Entfernung zu verhindern. Schließen Sie die Kanülen an den CPB-Kreislauf an und stellen Sie sicher, dass Heparin-Kochsalzlösung zu den Verbindungspunkten hinzugefügt wird, um Luft im Kreislauf zu verhindern.
Stellen Sie den Anfangsdurchfluss auf 80 bis 85 Milliliter pro Kilogramm und Minute ein. Um einen Herzstillstand herbeizuführen, verabreichen Sie neun Milliäquivalente Kaliumchlorid. Sobald das Herz angehalten ist, isolieren Sie das Tier aus dem Kreislauf.
Halten Sie dann den Durchfluss des CPB-Kreislaufs so aufrecht, dass er bei 1.500 U/min zirkuliert. Nachdem Sie geeignete Bedingungen für einen Herzstillstand erreicht haben, beginnen Sie mit der extrakorporalen Herz-Lungen-Wiederbelebung, indem Sie das Ferkel wieder an den CPB-Kreislauf anschließen. Verabreichen Sie drei Milliliter Calciumgluconat und sechs Milliliter Natriumbicarbonat über den peripheren arteriellen Zugang und fügen Sie bei Bedarf Dosen hinzu.
Die Gefäßkanülierung und die CPB mit Herzstillstand erreichten in den Experimenten eine Erfolgsquote von 92 %. MRTs zeigten deutliche Anzeichen einer frühen Hirnschädigung bei CPB bei Tieren mit Herzstillstand im Vergleich zur Kontrollgruppe. Die Bildgebungsmodalität des akuten Diffusionstensors identifizierte die Anzeichen eines Infarkts besser als andere konventionelle MRT-Sequenzen.
