The authors would like to thank Dr George Balanos for his assistance in the flow-mediated dilatation technique.

HINWEIS: Das Protokoll folgt Richtlinien von Human Research Ethics Committee Dudley Gruppe NHS Foundation Trust. Führen alle beschriebenen Techniken in einem temperaturgeregelten Labor (21-22 ° C), mit einer stabilen Beleuchtung und Abwesenheit von Rauschen. Fragen Sie Personen, die sich um Einschätzungen von Essen, Trinken, Rauchen und Bewegung 12 Stunden vor dem Test zu unterlassen. Zurückhalten, vasoaktive Medikamente für mindestens 12 Stunden, wenn angemessen. 1. Laser-Doppler-Imaging mit Iontophorese <ol><li> Schalten Sie Laser Doppler Imager (LDI) und lassen Sie den Scanner automatisch nach ca. 30 min zu stabilisieren. Starten Sie den LDI-Software und klicken Sie auf &quot;Measurement&quot; (Startbildschirm der Software wird dann ausgewiesen werden). Auf dem Startbildschirm, wählen Sie &#39;Ionto Protocol &quot;in der Taskleiste am oberen Rand des Fensters. </li><li> Geben Sie manuell das Protokoll (der in unserem Labor verwendete Protokoll beinhaltet insgesamt 13 sDosen, mit elektrischem Strom zur iontophoretischen Verabreichung von Medikamenten vom Scan 2, um bei einer Spannung von 30 uA scannen 11). Set Scan 1 als Baseline werden ohne elektrischen Strom, und scannen 12 und 13 als Verwertung Scans auch ohne elektrischen Strom. Klicken Sie auf OK, um die Einstellungen zu bestätigen und zum Home-Bildschirm. </li><li> Fragen Sie Teilnehmer in einer halbliegenden Stuhl mit ihren Unterarm ruhen 90 Grad auf einem bequemen, festen Kissen entspannen, und legen Sie eine schwarze Unterlage unter den Unterarm. HINWEIS: Die Matte hilft, Artefakt Messungen Hintergrundflächen des umgebenden Gewebes erzeugt begrenzen. Es ist wichtig, dass die Teilnehmer der Arm fest an dem Kissen angeschnallt, so daß es keine Bewegung gibt und zugehörige Artefakte. </li><li> Schließen Sie die Kabel-Stecker am anderen Ende jedes Plexiglaskammer mit der Iontophorese-Controller. Schließen Sie die Kammer, die eine 2,5-ml-Dosis von 1% Acetylcholin (ACh) zu dem Anodenanschluss der Iontophorese-Controller, und schließen Sie die zweite Kammereine 2,5 ml-Dosis von 1% Natrium-Nitroprussid (SNP) an die kathodenseitige Anschluss. Das Vermischen der beiden Wirkstoffe in der Kammer mit 0,5% Kochsalzlösung. Verbinden Sie die beiden Kammern auf der volaren Aspekt des Teilnehmers rechten Unterarm mit doppelseitigen Klebepads. </li><li> Umfassen die Kammern um 32 mm Deckgläsern um eine Leckage von Fluid zu verhindern. </li><li> Vor dem Starten des Scan, öffnen Sie das Fenster &quot;Scanner-Setup&quot; auf der oberen linken Ecke des Home-Bildschirm entfernt. Wählen Sie die &quot;Video und Entfernung&quot; und wählen Sie die Registerkarte &quot;Auto Abstand&quot; Funktion, um den Abstand des Scannerkopfes vom Teilnehmer Unterarm messen. <ol><li> Nach Abschluss der automatischen Abstandsmessung, wählen Sie die Registerkarte &quot;Image Scan&quot; und bestimmen Sie den Bereich, der durch Klicken auf die Taste &#39;Mark&#39; in der rechten unteren Ecke des Fensters eingescannt werden soll. Falls erforderlich, ändern Sie die Größe der Region von Interesse durch die manuelle Eingabe der Größe des Scanbereichs in die &quot;Scanbereich &amp;# 8217; Abschnitt in der Nähe des oberen Rand des Fensters. Sicherzustellen, dass die Region von Interesse enthält, den Durchmesser von jedem der Iontophorese Kammern und ist groß genug, um die Variabilität der Hautdurchblutung zu begrenzen. </li></ol></li><li> Nach Abschluss der Beurteilung, speichern Sie die Datei. Öffnen Sie die Datei mit LDI Bildanalyse-Software zur Messung der Durchblutung führen. <ol><li> Klicken Sie auf &quot;Bilddurchsicht&quot; auf der Haupt-Software-Fenster, und öffnen Sie die Bilddatei, die analysiert werden soll. </li><li> Verwenden Sie die Software, um eine Region von Interesse rund um den Außendurchmessern jeder Kammer markieren. Stellen Sie die Region von Interesse, so dass es auf dem Gebiet, in dem die Kammern anwesend waren richtig passt. Klicken Sie dann auf das Symbol &quot;Statistik&quot; und eine Spalte mit den mittleren Perfusion Einheiten für jede Kammer wird angezeigt. Beachten Sie die Grundlinie Perfusionseinheit sowie die höchste Perfusionseinheit von jedem der letzten 12 Scans für jede Kammer. HINWEIS: Diese Analysemethode istspezifisch für unser Labor; jedoch können auch andere Methoden verwendet werden, um Daten von dem Scan erhaltenen LDI exprimieren. Eine umfassende Übersicht finden Sie in Richtlinien von Roustit und Cracowski 12 beziehen. </li></ol></li><li> Um prozentuale Veränderung der Durchblutung in Reaktion auf ACh und SNP berechnen, subtrahieren Grundliniendurchblutung von der Spitze Perfusion, geteilt durch Basisdurchblutung und dann mit 100 multiplizieren. HINWEIS: In unserem Labor haben Veränderungen der Durchblutung im Vergleich zum Ausgangs gute intra-observer Variationskoeffizient für ACh (7%) und SNP (6%) gezeigt. </li></ol> 2. Durchfluss vermittelten Dilatation und Glyceroltrinitrat-vermittelten Dilatation <ol><li> Schalten Sie den Doppler-Ultraschallgerät und PC im Netzwerk, die Gefäßbildanalyse-Software (VIA). HINWEIS: Der VIA-Software erfasst ein Live-Bild (mit 25 Bildern pro Sekunde) und gibt Auskunft über den Gefäßdurchmesser als auch die Qualität der Gefäßgrenzen durch die Ultraschallgerät erkannt. Otihre Software-Pakete zur Verfügung, die zusätzliche Funktionen und Einstellungen enthalten können. Es ist ratsam, Bedienungsanleitungen für spezifische Software konsultieren. </li><li> Fragen Sie Teilnehmer in einer halbliegenden Sessel entspannen und setzen ihr Arm auf einem bequemen Kissen, um ihre Seite, sondern in Höhe des Herzens. Legen Sie eine Blutdruckmanschette um den Teilnehmer Handgelenk. HINWEIS: Der Patient sollte aufgefordert, den Arm so ruhig wie möglich zu halten, um Bewegungsartefakte während der Messung zu vermeiden. </li><li> Sichern Sie die Linearschallkopf von der Ultraschall-Maschine in einen stereotaktischen Klemme, und ziehen Sie die Klammer mit den Flügelmuttern, so dass der Ultraschallwandler in einer festen Position bleibt. HINWEIS: Die Klemme wird sichergestellt, dass der Ultraschallwandler stabil bleiben, wenn das Blutgefäß befindet. </li><li> Auf dem Ultraschallgerät, blättern Sie in das &quot;Menü&quot; und stellen Sie die Scanfrequenz bei 5 MHz und optimieren die Tiefe (die empfohlene Tiefeneinstellung ist3,5 cm) und die Verstärkungseinstellungen an der Ultraschallgerät. Anpassen der Verstärkungseinstellungen, um sicherzustellen, dass es symmetrisch Helligkeit für die nahen und fernen Wand des Gefäßes. </li><li> Mit dem Linearschallkopf, suchen Sie die Arteria brachialis in der Regel 2 bis 10 cm über der Ellenbeuge in Längsscanebene zu finden ist. Nehmen Sie die Einstellungen, um die Bildqualität in dieser Phase zu klären. Um zur Ermittlung der Arterie, schalten Sie den Farb-Doppler zu helfen zeigen pulsierenden arteriellen Durchblutung und sie von kontinuierlichen venösen Blutfluss. Sehen Sie sich die Arteria brachialis horizontal über den Bildschirm; es sollte als zwei feste parallele Leitungen, durch einen klaren Bereich in getrennt zwischen den Linien, die das Lumen des Gefäßes darstellt erscheinen. </li><li> Damit der VIA-Software automatisch zu protokollieren Gefäßdurchmesser, mit dem Cursor, um einen vorbestimmten Bereich von Interesse erkennen und verfolgen Sie die Vorder- und Hinterwand der Arterie zu markieren. HINWEIS: Die Größe der Region von Interesse sein kannerhöht oder verringert wird mit Hilfe der &#39;x&#39; und &#39;y&#39; Tasten am Haupt Software Bildschirms. </li><li> Klicken Sie auf &quot;Start&quot; auf der VIA-Software und Bild die Arterie für 2 min. Danach klicken Sie auf &#39;Pumpen&#39; auf der VIA-Software und pumpen Sie die Blutdruckmanschette um das Handgelenk gelegt, um Druck suprasystolischem (in der Regel über 220 mmHg) für 5 min gleichzeitig. HINWEIS: Der Zweck der Manschette ist, um den Blutfluss in der Hand zu verschließen. </li><li> Nach 5 Minuten wurde die Luft aus dem Blutdruckmanschette an reaktiven Hyperämie, die in einer gesunden Gefäß, sind vermittelte Vasodilatation stimulieren induzieren. HINWEIS: Peak-Erweiterung bis zu 180 sec folgenden Manschettenentleerung auftreten, so empfiehlt sich die Aufnahme fortzusetzen Gefäßquerschnitte für 3 Minuten nach der Manschette Release ist. </li><li> Nach 10 Minuten Ruhezeit erneut suchen Sie die Oberarmarterie unter Verwendung des linearen Array-Schallkopf und nehmen einen Durchmesser Lesung 2 min Grundlinie auf die gleiche Weisewie in Schritt 2.7. </li><li> Dann fragen Sie die Teilnehmer, um eine 500 ug sublingual Glyceryl-(GTN) Tablette unter die Zunge legen und weiterhin die Oberarmarterie Durchmesser für weitere 5 min messen. Nach Ablauf dieser Frist, fragen Sie die Teilnehmer, die GTN Tablette zu entfernen und Überwachung der Teilnehmer sicherstellen, dass sie keine nachteiligen Auswirkungen auf das Medikament zu erleben. </li><li> Führen Sie alle Analyse von Daten offline. Fünfundzwanzig Datenpunkte für jede Sekunde der Beurteilung vorhanden; kollabieren diese Daten in einer Sekunde Epochen in Microsoft Excel. Exportieren der Daten in eine digitale Signalanalyse-Paket und das Filter mit einem 3 sec Gleitmittelungsfilters. </li><li> Stellen Sie die Basisdurchmesser von 120 Sekunden der Daten vor der Manschette-Inflation. Sichtprüfung der Basislinienbereich und verstehen sich inklusive Artefakte. Der Mittelwert der verbleibenden Basislinienbereiche, um die Basisliniendurchmesser herzustellen. </li><li> Für die flussvermittelte Dilatation (FMD) Analyse, die Software automatisch scannen die Post cuff-Deflation Region für Spitzen Dilatation und verwenden Sie den Cursor auf diese Spitze zur Sichtkontrolle zu markieren. Wenn der Spitzen wurde falsch identifiziert, verwenden Sie den Cursor auf eine begrenzten Bereich, in dem die Spitze könnte dann identifiziert werden, auszuwählen. Notieren Sie sich den Spitzenwert als Spitzendurchmesser. </li><li> Für die GTN-Daten, einen Akt gleichen Verfahren wie bei der MKS verwendet, mit Ausnahme der Suche nach Spitzen Erweiterung in der Region nach dem 5 Minuten der Verabreichung des Arzneimittels. </li><li> Zur Berechnung FMD% und GTN%, subtrahieren Basisdurchmesser von der Spitzendurchmesser, geteilt durch Basisdurchmesser und dann mit 100 multipliziert. HINWEIS: In unserem Labor ist die intra-observer Variationskoeffizienten von 11% für die Maul- und Klauenseuche, und 12% für GTN. </li></ol> 3. Intima-Media-Dicke <ol><li> Fragen Sie Teilnehmer, um bequem auf einem Bett liegen, und ein Kissen unter den Kopf, um Unterstützung für den Hals zu bieten. </li><li> Schließen Sie das Elektrokardiogramm (EKG) führt zu der Doppler-Ultraschall und befestigen Sie sie auf die patient Gliedmaßen. Nur eine grundlegende EKG-Kurve erforderlich ist, so stellen Sie die entsprechenden Kabel an den linken und rechten Arme, und auf der linken Knöchel. </li><li> Bereiten Sie das Ultraschallgerät indem Sie durch die &quot;Menü&quot; und die Einstellung der Scanfrequenz bei 10 MHz und Optimierung Tiefe (die empfohlene Tiefeneinstellung ist 3-4 cm) und Verstärkungseinstellungen. Anpassen der Verstärkungseinstellungen, um sicherzustellen, dass es symmetrisch Helligkeit für die nahen und fernen Wand des Gefäßes. </li><li> Fragen Sie Teilnehmer, den Kopf leicht nach links kippen, und mit Hilfe des Linearschallkopf, scannen Sie die rechte Halsschlagader entlang aller seiner Teile (gemeinsame, innere und äußere Halsschlagader) mit dem Längsscanebene, um das Vorhandensein von Plaques zu identifizieren. Bilder, die keine Anzeichen von Plaque Anzeige zu speichern. Um zur Ermittlung der Arterie, suchen Sie nach einem Verzweigungspunkt in dem Gefäß, da dies zeigt die A. carotis communis gabelnden in der internen und externen Halsschlagadern. </li><li> Zur Messung of Intima-Media-Dicke (cIMT), zu erreichen mindestens 3 Bilder auf einen Abschnitt der A. carotis communis, die frei von Plaque ist, und ist 1 cm proximal des Bulbus. Erreichen alle Bilder mit der Spitze der R-Welle des EKG als dies entspricht der ventrikulären Diastole und der Punkt, an dem das Schiff unter der geringsten Menge an Scherspannung. </li><li> Wiederholen Sie die Schritte 3.4 und 3.5 in der linken Halsschlagader. Bitten Sie den Teilnehmer, den Kopf leicht nach rechts für diese Messung zu kippen. </li><li> Um zur Verwirklichung klare Bilder der nahen und fernen Wand zu unterstützen, sorgfältig während der Beurteilung manipulieren die Ultraschallsonde, um sicherzustellen, das Gefäß senkrecht zum Ultraschallstrahl. Erreichen dies durch subtile Änderung der Neigung und Drehung des Wandlers zusammen mit kleineren Anpassungen an den Druck, der von proximal nach distal Winkel (heel-toe-Bewegung) der Sonde aufgetragen. </li><li> Führen Sie die Analyse von Bildern offline mit Artery-Mess-Software (AMS), um die Gefäß boun erkennendäre nach den Linien Pignoli. Laden Sie das Bild zu analysieren, und dann mit dem Cursor, erstellen Sie eine Region von Interesse in einem Abschnitt des Schiffes, die frei von Plaque ist. Klicken Sie auf &quot;erkennen&quot; auf der Software und notieren Sie die auf dem Bildschirm für cIMT und Lumendurchmesser angezeigten Werte. HINWEIS: genaue Messwerte kann nur von der gegenüberliegenden Wand erhalten werden, so ignorieren Lesungen aus der nahe Wand. </li><li> Nehmen drei Messungen für jede Seite, und dann den Mittelwert bilden, um den mittleren cIMT für den rechten und linken Halsschlagadern getrennt zu geben. Weitere Durchschnitt der CIMT von beiden Seiten, um die Gesamt cIMT geben. HINWEIS: Die intra-observer Variationskoeffizient für diese Technik in unserem Labor beträgt 9%. </li><li> Messung durchführen jeder Plaque mit der gleichen Software durch manuelle Markieren Sie die Plakette mit dem Cursor. Klicken Sie auf &quot;klassifizieren&quot; auf AMS, um die Echogenität des Plaque und Besoldungsgruppe berechnet automatisch entsprechend seiner Anfälligkeit für Bruch. Klickenim Fenster &quot;Plaque Eigenschaften&quot;, um diese Informationen zu sehen. </li></ol>

The authors declare that they have no competing financial interests.

Die vorliegende Manuskript Details der Methodologie aus mehreren getrennten Beurteilung der Gefäßfunktion und die Morphologie der in der peripheren Gefäßen durchgeführt werden kann. Jede Beurteilung informiert über die verschiedenen Stadien der Atherosklerose, und helfen, den Kreisprofil verschiedener Gefäßterritorien zu charakterisieren. Wir haben bereits berichtet, dass mikrovaskuläre endotheliale Funktion ist von großer Gefäße Endothelfunktion unabhängig in einer Population von Patienten mit rheumatoider Arthritis ein erhöhtes Risiko für CVD-39. Darüber hinaus waren die Beurteilungen der Gefäßfunktion und Morphologie auch unabhängig voneinander in der gleichen Gruppe von Patienten und bei Patienten mit CVD 40,41. Diese Ergebnisse können durch die Heterogenität der Struktur und Funktion von Endothelzellen in verschiedenen Gefäßgebieten 38, wie auch eine mögliche Zeitverzögerung für die Progression von funktionellen Veränderungen morphologischen erklärtAnomalien in dem Behälter. Eine Studie von Hashimoto und Kollegen 42 ergab, dass mehrere Teilnehmer mit Arteriosklerose hatte MKS Werte als normal cIMT Werte verringert. Diese Ergebnisse legen nahe, dass die Prüfung der subklinischen Atherosklerose mit einer Vielzahl von Methoden ist wichtig, um die globalen Auswirkungen der CVD entziffern. Die Bedeutung der Mikrogefäßsystems in Gesundheit und Krankheit gewinnt immer mehr Aufmerksamkeit in der medizinischen Literatur. Die Mikrogefäße bilden eine viel größere Oberfläche als große Schiffe so dass sie bedeutende Ziele für Schäden, die durch schädliche Reize 43. Es wurde vermutet, dass die Mikrogefäße könnte die primäre Quelle von Entzündungsmediatoren, die das Endothel der größeren Gefäßen, die zu Bildung von Läsionen 43 einzudringen. Bei Typ-II-Diabetikern, die mikrovaskuläre Krankheit geht häufig große Gefäßkrankheit 44 und in anderen Populationen mit erhöhtem Risiko für CVD wie rheumatoide Arthritis, Interventionen, die das CVD-Risiko zu verringern verbessern mikrovaskuläre, aber nicht großen Behälter, Endothelfunktion 45,46. Zusammengenommen deuten diese Ergebnisse, dass die Prüfung der mikrovaskulären Funktion kann in das Verständnis der komplexen Mechanismen, die Arteriosklerose initiieren helfen. In der vorliegenden Arbeit wurde Beurteilung der mikrovaskulären endothelialen Funktion erfolgt mit LDI mit Iontophorese von vasoaktiven Substanzen. Mehrere andere Einschätzungen können verwendet werden, um mikrovaskuläre Funktion einschließlich nailfold Kapillaroskopie und Venenverschlussplethysmographie bewerten. Jedoch stellt die früheren Bewertungsinformation nur mikrovaskulärer Morphologie, während die letztere zeitintensiv und in einigen Protokollen invasive durch Verabreichung intra brachialis vasoaktive Mittel 1. Im Gegensatz dazu bietet LDI eine einfache, zeitsparende Ansatz zur mikrovaskulären Durchblutung der Hautblutgefäße als Reaktion auf vasoaktive Mittel zu messen, die verabreicht werden nicht INVAShungsweise. Die Messung der Durchblutung der Haut hat eine breite Akzeptanz in der Literatur durch seine einfache Zugänglichkeit und starke Korrelation mit etablierten CVD 12 gewonnen. Ferner liegt der Vorteil der LDI über andere Dopplertechniken wie Laser-Doppler-Flussmessung ist, dass sie gleichzeitig scannen mehreren Punkten in einem bestimmten Bereich und kann daher entfallen zellulären Bewegungsartefakte und räumliche Unterschiede der Hautdurchblutung, von denen beide die Wirkung Perfusion des Schiffes 47,48. Trotz der offensichtlichen Vorteile der Iontophorese ist es wichtig anzumerken, dass der Strom induzierte Vasodilatation (CIV) von Iontophorese kann die Wirkung der vasoaktiven Mittel insbesondere an der Kathode zu verwechseln. Die Auswahl des Trägers für den Wirkstofftransport könnte dabei helfen, diesen Effekt zu reduzieren, das mit 0,5% Natriumchlorid bei der Beschränkung CIV 18 (wie in dem aktuellen Protokoll verwendet). Darüber hinaus verwenden einen größeren Durchmesser Kammern und eine geringe elektrische AktuellMieten (wie im aktuellen Protokoll verwendet) alle dazu beitragen, CIV 18 zu reduzieren. Die Verwendung eines Steuer Website wurde auch empfohlen 12. Biologische und Verhaltensfaktoren kann auch Auswirkungen auf die Zuverlässigkeit und Reproduzierbarkeit des Verfahrens. Beispielsweise zirkadiane Variation und Rauchen wurde gezeigt, daß mikrovaskuläre endotheliale Funktion 49,50 beeinflussen. Strenge Aufnahmebedingungen müssen, um genaue Ergebnisse zu erhalten halten werden und hat Richtlinien sollten bei der Gestaltung Protokolle 12 folgen. Die Messung der MKS und GTN-vermittelten Dilatation informiert über endotheliale Dysfunktion in der großen Blutgefäße, und ist weit verbreitet in nicht-invasiven Gefäßforschung. Die MKS-Technik liefert Ersatzinformation auf die NO Bioverfügbarkeit und ist ein nützlicher prognostischer Marker kardialer Ereignisse bei verschiedenen klinischen Populationen 7-9. In der vorliegenden Arbeit legte die Protokoll-Konten für viele der Faktoren,Für ausreichende Stimulation von NO-vermittelte Vasodilatation 25 notwendig. Zum Beispiel wurde die Okklusionsmanschette distal zum Ultraschallsonde gelegt und um das Handgelenk 27, die Dauer der Ischämie wurde 5 min 26 sowie ausreichend Zeit durfte die &quot;wahren&quot; Spitzendurchmesser aufnehmen folgenden reaktiven Hyperämie 28. Leider hat das Protokoll nicht enthalten Charakterisierung des Scherspannungsprofil wie die automatische Kantenerkennung Software nicht gleichzeitige Aufnahme von Gefäßdurchmesser und Pulswellengeschwindigkeit Signals ermöglichen. Die Berechnung der Scherbeanspruchung ist wesentlich für eine genaue Messung der FMD 26 und empfahlen, daß, soweit möglich, Gefäßforschungsgruppen benutzen Software, die solche Messungen durchgeführt werden können. Beurteilungen der FMD und GTN-vermittelte Dilatation sind auch anfällig für Umwelt und biologische Veränderungen 24, wie kleine Änderungen in der Gefäßdurchmesserentlocken großen MKS / GTN Antworten. Beispielsweise umfassen typische FMD Werte für gesunde Teilnehmer reichen von 5-10% 51, die zu einer 0,25 entspricht - 0.5mm Änderung arteriellen Durchmesser einer Arterie mit einem Durchmesser von 5 mm. Angesichts dieser kleine Änderungen an der Arteriendurchmesser muss sorgfältig auf technische und biologische Faktoren, die die Messung beeinflussen kann bezahlt werden. In der Tat kann die MKS durch eine Vielzahl von biologischen und Verhaltensfaktoren wie sympathische Aktivierung 52, Schlafentzug 53, 54 Koffeinkonsum, Rauchen 55 beeinflusst werden, antioxidative Therapie 56 und die Tageszeit 57. Dementsprechend ist es wichtig, diese Faktoren, die durch Verwendung von Information aus etablierten Richtlinien 24,25 steuern. Bewertung fortgeschrittener aber subklinischen Atherosklerose wurde mit cIMT getan. Die Technik wurde in mehreren klinischen Populationen genutzt worden und bietet allen Einzelheiten auf die arterielle structure gegenüber anspruchsvolleren Verfahren wie Kernspintomographie 34. Wie bei den anderen Kreislauf-Techniken, die Messung der cIMT erfordert eine sorgfältige Prüfung der technischen Faktoren, welche die Messung beeinträchtigen können. Im Allgemeinen sollten cIMT an Orten aufbewahren, Plaque durchgeführt werden, in der hinteren Wand des Halsschlagader. Ähnlich wie bei der MKS, Messung cIMT erfolgt mit hochauflösenden Sonographie und so ist sehr benutzerabhängig. Berichtet, Variationskoeffizient (CofV) Bereich von 2,4 bis 18,3% 58, während für die Maul- und Klauenseuche ist 1-84% 59. Selbst wenn jedoch beide Techniken durch kompetente Ultraschallspezialisten mit externen Faktoren gut kontrollierten durchgeführt werden, besteht ein hoher CofV 58,60,61. Ein Grund dafür könnte sein, dass die Analyse der Gefäßgrenzen werden mit manuellen Methoden 60,61 durchgeführt. Eine solche Analyse kann die Zuverlässigkeit als Bildartefakten wie falsche Grenzen, Lärm von der ultraso reduzierenund Signal und Verzerrung der Gefäße Interpretation des Bildes 22 zu beeinflussen. Jüngste Entwicklungen in der kontinuierlichen automatischen Kantenerkennungssoftware haben die Erkennung von Gefäßwand Grenzen 21,22 stark verbessert. In der vorliegenden Studie wurde die VIA-Software verwendet, um die Oberarmarterie Durchmesser messen, während AMS wurde verwendet, um cIMT erkennen. Die Verwendung dieser Software reduziert Operator abhängig, jedoch in dem Fall von AMS, ein gewisses Maß an Bedien noch in Situationen zur Verfügung, wo die Bildqualität schlechter 62 sein. Laboratorien, die automatische Kantenerkennung Software verwenden in der Regel dazu neigen, niedrige CofV 58,63,64 haben, so sollte es das Ziel aller Gefäßforschungslabors, um automatisierte Messung der Gefäßgrenzen, um die Genauigkeit der Ergebnisse sicherzustellen, übernehmen können. Es ist auch ratsam, Ergebnisse der Reproduzierbarkeit Studien für spezifische Protokolle Bericht bei der Veröffentlichung von Studienergebnissen. <p class = &quot;jove_content&quot;&gt; Obwohl Beurteilungen der Gefäßfunktion werden routinemäßig in der klinischen Forschung, ist eine Einschränkung der Techniken, die Normwerte für LDI mit Iontophorese und FMD nicht existieren. Es ist daher wichtig, dass gesunde Alter und Geschlecht passenden Kontrollgruppen untersucht, um Ergebnisse mit der Testgruppe zu vergleichen. Obwohl diese Techniken in Verbindung mit einer schlechten Prognose in einer Vielzahl von Populationen mit Nachweis der CVD 6-9, gibt es immer noch ein Mangel an Studien, die den Zusammenhang zwischen schlechter Endothelfunktion und negativen kardiovaskulären Auswirkungen wie Herzinfarkt und Schlaganfall untersucht haben. Weitere prospektive Studien sind erforderlich, um diese Bedenken auszuräumen. Eine weitere Einschränkung ist die Verwendung von menschlichen Operatoren, um die Beurteilungen durchführen und die Analyse durchzuführen. Dies stellt eine potentielle Quelle der Befangenheit; dies kann jedoch durch Blendung der Fahrer den Ergebnissen oder zu gewährleisten, daß der Leser sich von dem Betreiber begrenzt werden. Esist auch wichtig, um sicherzustellen, dass der Leser nach einem standardisierten Protokoll für die Datenanalyse, so dass alle Daten konsistent analysiert. Zusammenfassend stellt die vorliegende Manuskript detaillierte Informationen zu den methodischen Schritte notwendig, um Bewertungen von Mikrogefäß und großes Gefäß Endothelfunktion sowie vaskuläre Morphologie des peripheren Blutkreislauf erfolgreich durchzuführen. Wenn sie zusammen verwendet, die Einschätzungen stellen globale Informationen über die verschiedenen Stadien der Atherosklerose. Weitere prospektive Studien, die das Potenzial diagnostische Rolle dieser Techniken sind gerechtfertigt.

Das Endothel ist die innerste Auskleidung des Gefäßsystems und bei der Aufrechterhaltung der vaskulären Homöostase über die Regulierung einer Vielzahl von vasoaktiven Prozessen beteiligt. Störung auf diese Verfahren kann das Schiff zu Arteriosklerose begünstigen und das Risiko für Herz-Kreislauf-Erkrankungen (CVD) 1 zu erhöhen. Periphere Endothelfunktion ist ein guter Indikator der frühen Abnormalitäten in der Gefäßwand 2. Darüber hinaus Maßnahmen der peripheren Endothelfunktion wurde gezeigt, dass koronaren Endothelfunktion 3-5 reflektieren, und als solche sind als gute Prädiktoren für kardiovaskuläre Erkrankungen 6-9 betrachtet. Dies ist vielleicht nicht verwunderlich, da die Atherosklerose ist nun allgemein sehr beliebt, um eine systemische Erkrankung 10 sein. Die Bewertung der peripheren Endothelfunktion der Regel quantifizieren die gefäßerweiternde Reaktion des Schiffes auf einen spezifischen Stimulus, mit einer Dämpfung des säumigen Antwort Hinweis auf EndothelzellenDysfunktion 11 und kann in verschiedenen Gefäßbetten gemessen werden. Die Bewertung der fortschrittlichen Strukturveränderungen im Behälter kann durch Ultraschalluntersuchung der Intima-Media-Dicke charakterisiert werden. In der Mikrozirkulation, können Laser-Doppler-Flussmessung (LDF) und Laser-Doppler-Bildgebung (LDI) mit Iontophorese von gefäßerweiternden Agonisten nützliche Informationen über die mikrovaskuläre Perfusion 12 liefern. Beide Techniken messen die Doppler-Verschiebung von sich bewegenden roten Blutkörperchen die durch Streulicht. Perfusion wird als Blutfluss statt Blutfluss (ml / min) dargestellt ist, mit Blutflusses reflektiert durchschnittlichen roten Blutzellgeschwindigkeit und Konzentration. Die Messung der Blutfluss linear mit der tatsächlichen Blutfluss 13 verbunden. Die Beurteilung der LDI bietet erhebliche Vorteile gegenüber LDF, denn im Gegensatz zu LDF, LDI kann über ein riesiges Gebiet zu scannen was einem Anteil von Heterogenität in der Durchblutung der Haut und die Erhöhung der Reproduzierbarkeit der Technik12. Der Reiz für die Erhöhung des Blutflusses während der LDI durch Iontophorese Vasodilator Agonisten Acetylcholin (ACh) und Natriumnitroprussid (SNP), die Endothel-abhängige und Endothel-unabhängige Funktion zu beurteilen bzw. in die Haut mit Hilfe eines schwachen elektrischen Strom 14 vorgesehen. Sobald durch die Haut bindet ACh Zell Muscarinrezeptoren Lösen der Vasodilatator Stickstoffmonoxid (NO) Endothelzellen. Die Verwendung von SNP aktiviert direkt glatten Muskelzellrezeptoren für maximale Vasodilatation des Gefäßes und Prüfung von glatten Muskelzellen Integrität 15 ermöglichen. Es besteht eine gewisse Unsicherheit darüber, ob ACh-vermittelten Dilatation beinhaltet NO überhaupt, wie ACh können nicht NO Wege wie Cyclooxygenase-vermittelte Signalwege 12 zu stimulieren. Dennoch haben wir bereits berichtet, dass SNP ACh und Antworten sind in Patientengruppen mit erhöhtem Risiko für CVD 16 beeinträchtigt und dass Übung Interventionen bekannt, KEINE b verbessernioactivity auch verbessern ACh-vermittelte Blutfluss mit LDI 17. Das Fahrzeug für den Transport der Wirkstoffe in die Haut Mikrogefäße enthalten oft Natriumchlorid oder VE-Wasser 18,19. Mikrovaskuläre endotheliale Funktion kann über verschiedene Ansätze, mit kutanen Gefäß Leitfähigkeit quantifiziert werden - ein Produkt des Flusses geteilt durch arteriellen Druck, in Studien eingesetzt, wenn der Blutdruck kann sich über ändern Sie die Studiendauer (dh während des Trainings oder antihypertensive Behandlung) 12. Eine andere häufig verwendete Quantifizierung ist es, die Fläche unter der Kurve für den Blutfluss berechnen oder drücken die prozentuale Erhöhung der Fluss von der Grundlinie. Es ist wichtig zu beachten, dass es keine festgelegten Richtlinien für die Präsentation von Daten, aber Ermittler sollten einen Ansatz, der eine gute Reproduzierbarkeit zeigt zu nutzen. In der großen Gefäße, sind flussvermittelte Dilatation (FMD) und Glyceryl-Trinitrat vermittelten Dilatation (ATA) zu beurteilen, durchgeführts Endothel-abhängige und Endothel-unabhängige Funktion bzw. 20. FMD wird typischerweise in der Oberarmarterie, wo eine Manschette verwendet wird, um den arteriellen Blutstrom für 5 min durchgeführt zu verschließen; Freigabe der Manschette bewirkt eine plötzliche Erhöhung der Durchblutung (reaktive Hyperämie) durch die Brachialarterie was schubspannungsabhängige Dilatation des Gefäßes. Die Baseline-und Post-Manschette Release Durchmesser werden durch Ultraschall-Bildgebung des Schiffes mit anschließender Beurteilung der Gefäßdurchmesser quantifiziert geführt manuell 20 oder mit automatisierten Kantenerkennungssoftware 21,22. Der Einsatz von GTN hilft zu bestimmen, ob Abnormalitäten in Vasodilatation auf einen Verlust an Muskelzellintegrität glatte oder beeinträchtigter Freisetzung von NO aus Endothelzellen 23 sind. Maul- und Klauenseuche und GTN werden als die prozentuale Erhöhung der Post-Stimulus-Gefäßdurchmesser relativ zur Grundlinie Durchmesser ausgedrückt. Die richtige Einschätzung der MKS erfordert eine Reihe vonwichtige Überlegungen im Studienprotokoll 24,25. Die Dauer der Okklusion Manschette sorgfältig zeitlich abgestimmt werden; 5 min von Manschettenverschluss reicht für NO-vermittelten Dilatation Weile Manschette Okklusion führt zu nicht-NO-vermittelten Dilatation 26. Ähnlich Platzierung der Okklusionsmanschette um das Handgelenk und distal von der Ultraschallsonde überwiegend ruft NO-vermittelte Dilatation, während Manschette bei am Oberarm und proximal zur Sonde nur teilweise stimuliert NO 27. Es ist auch wichtig, um Spitzen Dilatation folgenden Manschettenentleerung über einen längeren Zeitraum, da die Messung der Spitzendurchmesser innerhalb der ersten 60 Sekunden nach Manschettenentleerung um 25 MKS unterschätzen messen - 40% 28. Tatsächlich ist ein Zeitraum von 180 sec Wahrscheinlichkeit der Erfassung wahren Spitzendurchmesser ausreichend zu sein, wobei die meisten Spitzenwerte innerhalb der ersten 120 s 28 auftritt. Die Anregung für MKS beinhaltens die Produktion von Scherspannung, die spezifischen endothelialen Rezeptoren aktiviert, um die NO 29 freizugeben. Jedoch kann Schubspannung auch aktivieren, mehrere andere vasoaktiven Faktoren (von denen einige Vasokonstriktion verursachen) 30, so dass es unerlässlich, dass die hervorgerufenen Scherbeanspruchung Reiz spiegelt Vasodilatation von NO Pfade 26. Es ist auch wichtig, um die Scherbeanspruchung Stimulus während FMD ausmachen, mit der Berechnung der Schergeschwindigkeit (Geschwindigkeit / Durchmesser) als geeignetes Maß für die Scherbeanspruchung dienen, aber nicht notwendigerweise Reflexionsspitzenstrom 31. Neueste physiologischen Empfehlungen legen nahe, dass die Schubspannung Profil sollte immer gekennzeichnet werden, wenn Ultraschallsysteme ermöglichen die gleichzeitige Messung der Pulswellengeschwindigkeit und aktive B-Bild im Duplex-Modus 25. Beurteilung der Halsschlagadern mit B-Mode-Ultraschall kann Informationen über die Intima-Media-Dicke (cIMT) und wurde zum ersten Mal described 1986 von Pignoli und Kollegen 32. Beurteilung cIMT reflektiert Proliferation von glatten Muskelzellen in die Intima des Gefßes und ist ein nützlicher Indikator für klinische Ereignisse in eine Arteriosklerose 33. Carotis Ultraschall oft vorher arteriellen Struktur besser als ähnliche Verfahren (wie der Magnetresonanztomographie oder radiographischen Beurteilung) 34. Außerdem cIMT Mitarbeiter mit einer Reihe von klassischen CVD-Risikofaktoren wie Alter, Bluthochdruck, Fettstoffwechselstörungen und 35. Änderungen an den Wänden der Arteria carotis werden üblicherweise durch eine Reduktion in NO Bioverfügbarkeit, die Entzündung in dem Behälter 36 fördert initiiert. Die A. carotis communis, Arteria carotis interna und Karotisbifurkation Punkte können verwendet werden, um festzustellen, cIMT, da jede Website kann in ähnlicher Weise vorherzusagen, kardiovaskuläre Ereignisse 37. In dem vorliegenden Manuskript, bieten wir detaillierte Methodik zur Bewertung der microvascular Endothelfunktion (LDI mit Iontophorese), großes Gefäß Endothelfunktion (MKS und GTN) und vaskuläre Morphologie (cIMT). Atherosklerose ist ein mehrstufiges Verfahren, das mit einer endothelialen Dysfunktion beginnt und endet mit der Brenn atherosklerotischen Läsionen in den großen Arterien. Die Begründung für die Wahl der oben genannten Einschätzungen ist, dass sie die verschiedenen Stadien der Atherosklerose zu reflektieren und dabei helfen, die Heterogenität des Gefäßsystems 38 zu berücksichtigen. Weiterhin haben wir früher gezeigt haben, daß in einer Population von Patienten mit einem erhöhten Risiko für CVD war mikrovaskulären endothelialen Funktion von großen Gefäß Endothelfunktion 39 unabhängig und funktionellen Bewertungen waren strukturelle Beurteilung der Vaskulatur 40 unabhängig. Daher kann die Gesamtbeurteilung des Gefäßsystems zu helfen, die verschiedenen Stadien der Atherosklerose zu entziffern.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="771">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Name of Reagent/ Equipment</td>
			<td style="width:269px;">Company</td>
			<td style="width:119px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:167px;">Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Laser Doppler Imager</td>
			<td style="width:269px;">Moor Instruments, Devon, UK</td>
			<td style="width:119px;">moorLDI2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Iontophoresis Controller</td>
			<td style="width:269px;">Moor Instruments, Devon, UK</td>
			<td style="width:119px;">MIC2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Miochol-E 20mg</td>
			<td style="width:269px;">Novartis UK</td>
			<td style="width:119px;">Prescribed by physician</td>
			<td>Acetylcholine for endothelium-dependent function</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Nitroprussiat Fides 50mg</td>
			<td style="width:269px;">Rottapharm Spain</td>
			<td style="width:119px;">Prescribed by physician</td>
			<td>Sodium nitroprusside for endothelium-independent function</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Doppler Ultrasound</td>
			<td style="width:269px;">Siemens PLC, Camberley UK</td>
			<td style="width:119px;">Accuson Antares</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Glyceryl Trinitrate 500 mcg</td>
			<td style="width:269px;">Alpharma, Barnstaple, UK</td>
			<td style="width:119px;">Prescribed by physician</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a methodological approach to non-invasive assessments of vascular function and morphology

The endothelium is the innermost lining of the vasculature and is involved in the maintenance of vascular homeostasis. Damage to the endothelium may predispose the vessel to atherosclerosis and increase the risk for cardiovascular disease. Assessments of peripheral endothelial function are good indicators of early abnormalities in the vascular wall and correlate well with assessments of coronary endothelial function. The present manuscript details the important methodological steps necessary for the assessment of microvascular endothelial function using laser Doppler imaging with iontophoresis, large vessel endothelial function using flow-mediated dilatation, and carotid atherosclerosis using carotid artery ultrasound. A discussion on the methodological considerations for each of the techniques is also presented, and recommendations are made for future research.

Laser-Doppler-Imaging mit Iontophorese Die mittleren Blutflusseinheiten nach den Laser-Doppler-Imaging-Scans von einem gesunden mittleren Alters weiblichen frei von CVD sind in Abbildung 1 dargestellt. Es gab eine deutliche Zunahme der mittleren Blutfluss sowohl für ACh und SNP. Ausgangsblutfluss betrug 48 Perfusion Einheiten für ACh und 67 Perfusion Einheiten für SNP. Spitzenblutfluss in Reaktion auf ACh war 455 Perfusion Einheiten und für SNP 446 Perfusion Einheiten. Dies ergab eine Zunahme 831% und 566% in Perfusion (Vergleich zum Ausgangswert) für Acetylcholin und SNP auf. Die Werte, die vorgesehen sind, sind hoch abhängig von der zur Behandlung von Hautblutflusses zusammen mit Umweltfaktoren zu untersuchen Ausrüstung. Flussvermittelte Dilatation und Glyceroltrinitrat-vermittelten Dilatation Abbildung 2 zeigt die Grundlinie und der Spitzendurchmesser für Maul- und Klauenseuche und GTN Einschätzungen von einem gesunden jungen männlichen frei von CVD. DieBasisdurchmesser der Oberarmarterie war 3,0 mm für die Maul- und Klauenseuche und GTN Einschätzungen. Der Spitzendurchmesser in der FMD Test betrug 3,3 mm, während für die GTN Beurteilung war 3,9 mm, was einer Steigerung von 10 bis 30% des Blutflusses entspricht jeweils, bezogen auf die Grundlinie. Intima-Media-Dicke Abbildung 3 zeigt die linke Halsschlagader eines gesunden Menschen. Berechnung der cIMT Werte erfolgt mit automatisierten Kantenerkennungssoftware. Der CIMT in der gegenüberliegenden Wand war 0.83mm und der Lumendurchmesser des Schiffes war 7.71mm. Die Ergebnisse für die rechte Halsschlagader in der gleichen Person waren 0,87 mm für cIMT und 7.80mm der Lumendurchmesser. Beim Mitteln das Lesen beider Seiten cIMT war 0,85 mm, und Lumendurchmesser 7.76mm. <img alt="Figur 1" src="/files/ftp_upload/52339/52339fig1highres.jpg" /> Fig. 1 Changes Blutfluss in Reaktion auf Laser-Doppler-Bildgebung mit Iontophorese. Nach Abschluss der Grundlinie zu scannen, um Ausgangsblutfluss zu messen, 10 Scans (Scan 1 bis 10) mit Iontophorese von Acetylcholin und SNP mit einer 30 &amp; mgr; a elektrischen Strom durchgeführt. Nach Iontophorese wurden 2 Recovery-Scans durchgeführt. ACh = Acetylcholin; SNP = Natriumnitroprussid. <img alt="Abbildung 2" src="/files/ftp_upload/52339/52339fig2highres.jpg" /> Abbildung 2. Durchfluss-vermittelte und Glyceroltrinitrat-vermittelten Dilatation. Die Grafik zeigt die Basisdurchmesser und einen deutlichen Anstieg der Spitzendurchmesser nach der Anwendung der flussvermittelte und Glyceroltrinitrat-vermittelten Dilatation Reize. FMD = flussvermittelte Dilatation; GTN = Glyceroltrinitrat-vermittelten Dilatation. <img alt="Figur 3" src="/files/ftp_upload/52339/52339fig3highres.jpg" /><br/&gt; Abbildung 3. Ultraschalluntersuchung der Halsschlagader. Eine Ultraschalluntersuchung der linken Halsschlagader mit einem Bereich von Interesse gezeigt platziert 1cm aus der Halsschlagkolben (Verzweigungspunkt). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/52339/52339fig3large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieses Bild anzuzeigen .</a>

Watch this Scientific Journal Video about A Methodological Approach to Non-invasive Assessments of Vascular Function and Morphology at JoVE.com

A Methodological Approach to Non-invasive Assessments of Vascular Function and Morphology

The present article describes the methodological considerations for several non-invasive assessments of vascular function and morphology that are commonly used in medical research to assess different stages of atherosclerosis.

Einen methodischen Ansatz, um Nicht-invasive Assessments der Gefäßfunktion und Morphologie

The endothelium is the innermost lining of the vasculature and is involved in the maintenance of vascular homeostasis.  Damage to the endothelium may ...

a-methodological-approach-to-non-invasive-assessments-vascular

Research

JoVE Journal

Medicine

16.2K Aufrufe.  Bangor University. The present article describes the methodological considerations for several non-invasive assessments of vascular function and morphology that are commonly used in medical research to assess different stages of atherosclerosis.

Serie: A Methodological Approach to Non-invasive Assessments of Vascular Function and Morphology

Vascular Occlusion Training for Inclusion Body Myositis: A Novel Therapeutic Approach

Inclusion body myositis (IBM) is a rare idiopathic inflammatory myopathy. It is known to produces remarkable muscle weakness and to greatly compromise function and quality of life. Moreover, clinical practice suggests that, unlike other inflammatory myopathies, the majority of IBM patients are not responsive to treatment with immunosuppressive or immunomodulatory drugs to counteract disease progression1. Additionally, conventional resistance training programs have been proven ineffective in restoring muscle function and muscle mass in these patients2,3. Nevertheless, we have recently observed that restricting muscle blood flow using tourniquet cuffs in association with moderate intensity resistance training in an IBM patient produced a significant gain in muscle mass and function, along with substantial benefits in quality of life4. Thus, a new non-pharmacological approach for IBM patients has been proposed. Herein, we describe the details of a proposed protocol for vascular occlusion associated with a resistance training program for this population.

The present article presents the details pertaining to the application of resistance training associated to vascular occlusion in IBM patients.

Gefäßverschluss Training für Inclusion Body Myositis: einen neuen therapeutischen Ansatz

Inclusion body myositis (IBM) is a rare idiopathic inflammatory myopathy. It is known to produces remarkable muscle weakness and to greatly compromise ...

Forschung

Medizin

Dual-mode Imaging of Cutaneous Tissue Oxygenation and Vascular Function

Accurate assessment of cutaneous tissue oxygenation and vascular function is important for appropriate detection, staging, and treatment of many health disorders such as chronic wounds. We report the development of a dual-mode imaging system for non-invasive and non-contact imaging of cutaneous tissue oxygenation and vascular function. The imaging system integrated an infrared camera, a CCD camera, a liquid crystal tunable filter and a high intensity fiber light source. A Labview interface was programmed for equipment control, synchronization, image acquisition, processing, and visualization. Multispectral images captured by the CCD camera were used to reconstruct the tissue oxygenation map. Dynamic thermographic images captured by the infrared camera were used to reconstruct the vascular function map. Cutaneous tissue oxygenation and vascular function images were co-registered through fiduciary markers. The performance characteristics of the dual-mode image system were tested in humans.

A dual-mode imaging system was developed for non-contact assessment of cutaneous tissue oxygenation and vascular function.

Dual-Mode-Imaging von Hautgewebe Oxygenation und Gefäßfunktion

Accurate assessment of cutaneous tissue oxygenation and vascular function is important for appropriate detection, staging, and treatment of many health ...

Corneal Confocal Microscopy: A Novel Non-invasive Technique to Quantify Small Fibre Pathology in Peripheral Neuropathies

The accurate quantification of peripheral neuropathy is important to define at risk patients, anticipate deterioration, and assess new therapies. Conventional methods assess neurological deficits and electrophysiology and quantitative sensory testing quantifies functional alterations to detect neuropathy. However, the earliest damage appears to be to the small fibres and yet these tests primarily assess large fibre dysfunction and have a limited ability to demonstrate regeneration and repair. The only techniques which allow a direct examination of unmyelinated nerve fibre damage and repair are sural nerve biopsy with electron microscopy and skin-punch biopsy. However, both are invasive procedures and require lengthy laboratory procedures and considerable expertise. Corneal Confocal microscopy is a non-invasive clinical technique which provides in-vivo imaging of corneal nerve fibres. We have demonstrated early nerve damage, which precedes loss of intraepidermal nerve fibres in skin biopsies together with stratification of neuropathic severity and repair following pancreas transplantation in diabetic patients. We have also demonstrated nerve damage in idiopathic small fibre neuropathy and Fabry's disease.

Corneal Confocal microscopy is a non-invasive clinical technique which may be used to quantify C fibre damage to diagnose and stratify patients with increasing neuropathic severity.

Corneal konfokale Mikroskopie: A Novel Non-invasive Technik zu Small Fibre Pathologie in peripheren Neuropathien Quantify

The accurate quantification of peripheral neuropathy is important to define at risk patients, anticipate deterioration, and assess new therapies. ...

An in vivo Rodent Model of Contraction-induced Injury and Non-invasive Monitoring of Recovery

Muscle strains are one of the most common complaints treated by physicians. A muscle injury is typically diagnosed from the patient history and physical exam alone, however the clinical presentation can vary greatly depending on the extent of injury, the patient's pain tolerance, etc. In patients with muscle injury or muscle disease, assessment of muscle damage is typically limited to clinical signs, such as tenderness, strength, range of motion, and more recently, imaging studies. Biological markers, such as serum creatine kinase levels, are typically elevated with muscle injury, but their levels do not always correlate with the loss of force production. This is even true of histological findings from animals, which provide a "direct measure" of damage, but do not account for all the loss of function. Some have argued that the most comprehensive measure of the overall health of the muscle in contractile force. Because muscle injury is a random event that occurs under a variety of biomechanical conditions, it is difficult to study. Here, we describe an in vivo animal model to measure torque and to produce a reliable muscle injury. We also describe our model for measurement of force from an isolated muscle in situ. Furthermore, we describe our small animal MRI procedure.

An in vivo Rodent Model of Contraction-induced Injury and Non-invasive Monitoring of Recovery

An in vivo animal model of injury is described. The method takes advantage of the subcutaneous position of the fibular nerve. Velocity, timing of muscle activation, and arc of motion are all pre-determined and synchronized using commercial software. Post injury changes are monitored in vivo using MR imaging/spectroscopy.

Ein In vivo Nager-Modell der Kontraktion-induzierte Verletzung und nicht-invasive Überwachung von Recovery

Muscle strains are one of the most  common complaints treated by physicians. A muscle injury is typically diagnosed from the patient history and  physical ...

Non-invasive Optical Measurement of Cerebral Metabolism and Hemodynamics in Infants

Perinatal brain injury remains a significant cause of infant mortality and morbidity, but there is not yet an effective bedside tool that can accurately screen for brain injury, monitor injury evolution, or assess response to therapy. The energy used by neurons is derived largely from tissue oxidative metabolism, and neural hyperactivity and cell death are reflected by corresponding changes in cerebral oxygen metabolism (CMRO2). Thus, measures of CMRO2 are reflective of neuronal viability and provide critical diagnostic information, making CMRO2 an ideal target for bedside measurement of brain health.
Brain-imaging techniques such as positron emission tomography (PET) and single-photon emission computed tomography (SPECT) yield measures of cerebral glucose and oxygen metabolism, but these techniques require the administration of radionucleotides, so they are used in only the most acute cases.
Continuous-wave near-infrared spectroscopy (CWNIRS) provides non-invasive and non-ionizing radiation measures of hemoglobin oxygen saturation (SO2) as a surrogate for cerebral oxygen consumption. However, SO2 is less than ideal as a surrogate for cerebral oxygen metabolism as it is influenced by both oxygen delivery and consumption. Furthermore, measurements of SO2 are not sensitive enough to detect brain injury hours after the insult 1,2, because oxygen consumption and delivery reach equilibrium after acute transients 3. We investigated the possibility of using more sophisticated NIRS optical methods to quantify cerebral oxygen metabolism at the bedside in healthy and brain-injured newborns. More specifically, we combined the frequency-domain NIRS (FDNIRS) measure of SO2 with the diffuse correlation spectroscopy (DCS) measure of blood flow index (CBFi) to yield an index of CMRO2 (CMRO2i) 4,5.
With the combined FDNIRS/DCS system we are able to quantify cerebral metabolism and hemodynamics. This represents an improvement over CWNIRS for detecting brain health, brain development, and response to therapy in neonates. Moreover, this method adheres to all neonatal intensive care unit (NICU) policies on infection control and institutional policies on laser safety. Future work will seek to integrate the two instruments to reduce acquisition time at the bedside and to implement real-time feedback on data quality to reduce the rate of data rejection.

We combined frequency-domain near-infrared spectroscopy measures of cerebral hemoglobin oxygenation with diffuse correlation spectroscopy measures of cerebral blood flow index to estimate an index of oxygen metabolism. We tested the utility of this measure as a bedside screening tool to evaluate the health and development of the newborn brain.

Non-invasive optische Messung des zerebralen Metabolismus und Hämodynamik bei Säuglingen

Perinatal brain injury remains a significant cause of infant mortality  and morbidity, but there is not yet an effective bedside tool that can  accurately ...

Non-invasive Assessment of Microvascular and Endothelial Function

The authors have utilized capillaroscopy and forearm blood flow techniques to investigate the role of microvascular dysfunction in pathogenesis of cardiovascular disease. Capillaroscopy is a non-invasive, relatively inexpensive methodology for directly visualizing the microcirculation. Percent capillary recruitment is assessed by dividing the increase in capillary density induced by postocclusive reactive hyperemia (postocclusive reactive hyperemia capillary density minus baseline capillary density), by the maximal capillary density (observed during passive venous occlusion). Percent perfused capillaries represents the proportion of all capillaries present that are perfused (functionally active), and is calculated by dividing postocclusive reactive hyperemia capillary density by the maximal capillary density. Both percent capillary recruitment and percent perfused capillaries reflect the number of functional capillaries. The forearm blood flow (FBF) technique provides accepted non-invasive measures of endothelial function: The ratio FBFmax/FBFbase is computed as an estimate of vasodilation, by dividing the mean of the four FBFmax values by the mean of the four FBFbase values. Forearm vascular resistance at maximal vasodilation (FVRmax) is calculated as the mean arterial pressure (MAP) divided by FBFmax. Both the capillaroscopy and forearm techniques are readily acceptable to patients and can be learned quickly.
The microvascular and endothelial function measures obtained using the methodologies described in this paper may have future utility in clinical patient cardiovascular risk-reduction strategies. As we have published reports demonstrating that microvascular and endothelial dysfunction are found in initial stages of hypertension including prehypertension, microvascular and endothelial function measures may eventually aid in early identification, risk-stratification and prevention of end-stage vascular pathology, with its potentially fatal consequences.

Capillaroscopy is a non-invasive, relatively inexpensive methodology for directly visualizing the microcirculation. The forearm blood flow technique provides accepted non-invasive measures of endothelial function.

Non-invasive Beurteilung der mikrovaskulären und Endothelfunktion

The authors have utilized capillaroscopy and forearm blood flow techniques to investigate the role of microvascular dysfunction in pathogenesis of ...

Murine Model for Non-invasive Imaging to Detect and Monitor Ovarian Cancer Recurrence

Epithelial ovarian cancer is the most lethal gynecologic malignancy in the United States. Although patients initially respond to the current standard of care consisting of surgical debulking and combination chemotherapy consisting of platinum and taxane compounds, almost 90% of patients recur within a few years. In these patients the development of chemoresistant disease limits the efficacy of currently available chemotherapy agents and therefore contributes to the high mortality. To discover novel therapy options that can target recurrent disease, appropriate animal models that closely mimic the clinical profile of patients with recurrent ovarian cancer are required. The challenge in monitoring intra-peritoneal (i.p.) disease limits the use of i.p. models and thus most xenografts are established subcutaneously. We have developed a sensitive optical imaging platform that allows the detection and anatomical location of i.p. tumor mass. The platform includes the use of optical reporters that extend from the visible light range to near infrared, which in combination with 2-dimensional X-ray co-registration can provide anatomical location of molecular signals. Detection is significantly improved by the use of a rotation system that drives the animal to multiple angular positions for 360 degree imaging, allowing the identification of tumors that are not visible in single orientation. This platform provides a unique model to non-invasively monitor tumor growth and evaluate the efficacy of new therapies for the prevention or treatment of recurrent ovarian cancer.

We describe a non-invasive animal imaging platform that allows the detection, quantification, and monitoring of ovarian cancer growth and recurrence. This intra-peritoneal xenograft model mimics the clinical profile of patients with ovarian cancer.

Mausmodell für nicht-invasive Bildgebungs zu erfassen und zu überwachen Eierstockkrebs Rezidiv

Epithelial ovarian cancer is the most lethal gynecologic malignancy in the United States. Although patients initially respond to the current standard of ...

Non-invasive Assessments of Subjective and Objective Recovery Characteristics Following an Exhaustive Jump Protocol

Fast recovery after strenuous exercise is important in sports and is often studied via cryotherapy applications. Cryotherapy has a significant vasoconstrictive effect, which seems to be the leading factor in its effectiveness. The resulting enhanced recovery can be measured by using both objective and subjective parameters. Two commonly measured subjective characteristics of recovery are delayed-onset muscle soreness (DOMS) and ratings of perceived exertion (RPE). Two important objective recovery characteristics are countermovement jump (CMJ) performance and peak power output (PPO). Here, we provide a detailed protocol to induce muscular exhaustion of the frontal thighs with a self-paced, 3 x 30 countermovement jump protocol (30-s rest between each set). This randomized controlled trial protocol explains how to perform local cryotherapy cuff application (+ 8 &#176;C for 20 min) and thermoneutral cuff application (+ 32 &#176;C for 20 min) on both thighs as two possible post-exercise recovery modalities. Finally, we provide a non-invasive protocol to measure the effects of these two recovery modalities on subjective (i.e., DOMS of both frontal thighs and RPE) and objective recovery (i.e., CMJ and PPO) characteristics 24, 48, and 72 h post-application. The advantage of this method is that it provides a tool for researchers or coaches to induce muscular exhaustion, without using any expensive devices; to implement local cooling strategies; and to measure both subjective and objective recovery, without using invasive methods. Limitations of this protocol are that the 30 s rest period between sets is very short, and the cardiovascular demand is very high. Future studies may find the assessment of maximum voluntary contractions to be a more sensitive assessment of muscular exhaustion compared to CMJs.

This protocol describes the procedure for non-invasive recovery assessments during a 72 h recovery period. This protocol induces muscular exhaustion of the frontal thighs using countermovement jumps and uses either local cold-cuff or thermoneutral-cuff application as a recovery modality.

Nicht-invasive Assessments von subjektiven und objektiven Erholungsmerkmalen nach einem erschöpfenden Sprungprotokoll

Fast recovery after strenuous exercise is important in sports and is often studied via cryotherapy applications. Cryotherapy has a significant ...

Cardiopulmonary Bypass in a Mouse Model: A Novel Approach

As prolonged cardiopulmonary bypass becomes more essential during cardiac interventions, an increasing clinical demand arises for procedure optimization and for minimizing organ damage resulting from prolonged extracorporal circulation. The goal of this paper was to demonstrate a fully functional and clinically relevant model of cardiopulmonary bypass in a mouse. We report on the device design, perfusion circuit optimization, and microsurgical techniques. This model is an acute model, which is not compatible with survival due to the need for multiple blood drawings. Because of the range of tools available for mice (e.g., markers, knockouts, etc.), this model will facilitate investigation into the molecular mechanisms of organ damage and the effect of cardiopulmonary bypass in relation to other comorbidities.

This paper describes how to perform cardiopulmonary bypass in mice. This novel model will facilitate the investigation of the molecular mechanisms involved in organ damage.

Kardiopulmonalen Bypass in einem Mausmodell: ein neuer Ansatz

As prolonged cardiopulmonary bypass becomes more essential during cardiac interventions, an increasing clinical demand arises for procedure optimization ...

Non-invasive Assessment of Dorsiflexor Muscle Function in Mice

Assessment of skeletal muscle contractile function is an important measurement for both clinical and research purposes. Numerous conditions can negatively affect skeletal muscle. This can result in a loss of muscle mass (atrophy) and/or loss of muscle quality (reduced force per unit of muscle mass), both of which are prevalent in chronic disease, muscle-specific disease, immobilization, and aging (sarcopenia). Skeletal muscle function in animals can be evaluated by a range of different tests. All tests have limitations related to the physiological testing environment, and the selection of a specific test often depends on the nature of the experiments. Here, we describe an in vivo, non-invasive technique involving a helpful and easy assessment of force frequency-curve (FFC) in mice that can be performed on the same animal over time. This permits monitoring of disease progression and/or efficacy&#160;of a potential therapeutic treatment.

Measurement of rodent skeletal muscle contractile function is a useful tool that can be used to track disease progression as well as efficacy of therapeutic intervention. We describe here the non-invasive, in vivo assessment of the dorsiflexor muscles that can be repeated over time in the same mouse.

Nicht-invasive Beurteilung des releveurs Muskelfunktion bei Mäusen

Assessment of skeletal muscle contractile function is an important measurement for both clinical and research purposes. Numerous conditions can negatively ...