The authors would like to thank Drs. Stephen Wilson and Lisa Wilsbacher for helpful discussions. This work was supported in part by NIH HL054737.

HINWEIS: Verfahren mit Zebrafisch wurden von UCSF Institutional Animal Care und Verwenden Committee genehmigt. 1. Herstellung der Werkzeuge <ol><li> Legen Minutien Stift in ein Stifthalter und klemmen Sie den Stift. </li><li> Mit feiner Spitze Pinzette vorsichtig biegen Sie die Spitze des Stiftes, um einen leichten Haken erstellen. </li><li> Für Bearbeitung und Stabilisierung des Embryos während Verletzungen, biegen Sie das Ende einer 28 Gauge ½ Zoll-Nadel auf einer Insulinspritze mit Spitzzange montiert. </li></ol> 2. Herstellung von Zebrafischembryonen für Verletzungen <ol><li> Richten Sie Zebrafisch Brutpaare und sammeln Eier im Eier Wasser (60ug / ml Aquarium Salze), wie zuvor 22 gezeigt. </li><li> Fügen 0,003% N-Phenylthioharnstoff (PTU) mit dem Ei Wasser, wenn die Embryonen etwa 8 Stunden nach der Befruchtung (HPF) zu Melanisierung verhindern. </li><li> Dechorionate 2 Tage nach der Befruchtung (dpf) Embryonen vor dem Experiment mit feiner Spitze Pinzette. <br/&gt; Hinweis: Die Embryonen können jederzeit verletzt, nachdem Kreislauf beginnt werden. Die hier präsentierten Daten sind für 2 dpf Embryonen, aber die Technik ist erfolgreich in Embryonen bis 5 dpf aufgebracht. </li><li> Anesthetize die Embryonen mit 0,02% gepuffert 3-Aminobenzoesäure (Tricaine) ca. 10 min vor Manipulationen. </li></ol> 3. Mechanische Vessel Verletzung von Embryonen <ol><li> Übertragen narkotisierten Embryonen auf eine Depression gleiten auf einem Seziertisch Stereomikroskop mit einer Transferpipette. </li><li> Mit dem kurzen flachen Seite der Spritzennadel, um den Embryo mit der dominanten Hand zu manipulieren, positionieren Sie den Embryo auf die Seite mit der Bauchseite abgewandten Nadel. </li><li> Positionieren Sie die Minutien Stift mit der Spitze zeigte direkt auf der Bauchseite des Fisches hinter dem urogenitalen Öffnung. Positionieren Sie den Pin Minutien in einem leichten Winkel, so dass die gebogene Spitze ist in der Lage, durch die Periderm direkt in die Schwanzvene (Abbildung 1 &lt;bohren/ Strong&gt;). </li><li> Mit der Spritzennadel, um den Embryo zu manipulieren, durchbohren die Schwanzvene mit der Minutien Stift durch Antippen des Embryos in den Stift, um etwas haken Sie den Stift in die Vene. </li><li> Mit der Spritzennadel, ziehen Sie den Embryo von der Minutien Stift einen kleinen Riss im Behälter zu schaffen. ANMERKUNG: Eine erfolgreiche Verletzung führt zur sofortigen Blutungen aus der Vene führen. </li></ol> 4. Analyse der Blutstillung <ol><li> Wählen Sie nur Embryonen mit sichtbar zirkulierenden Blutzellen für dieses Verfahren. </li><li> Bereiten Sie den Timer, sobald die Minutien Stift aus dem Behälter gezogen beginnen. </li><li> Den Timer zu starten, sobald der Blutverlust aus der Wunde sichtbar gemacht werden. Wenn Blutverlust aus der Wunde nicht mehr, stoppen Sie die Zeit und notieren Gesamtzeit als Blutungszeit. Wenn die Koagulation inhibiert wird, nimmt die Zeit auf, um, wenn es nicht mehr sichtbar zirkulierenden Blutzellen. </li></ol> 5. Analyse der Wundheilung <ol><li> Über post-Verletzungen Tiere auf dem Glasboden Bildgebung Gerichte für die Mikroskopie. </li><li> Entfernen Sie die Mehrheit der Eier Wasser. </li><li> Decken Sie die Embryonen in 0,3 bis 1,2% niedrig schmelzender Agarose in Ei Wasser gelöst, um zwischen 42 und 45 ° C erwärmt und mit 0,02% Tricaine ergänzt. </li><li> Position Embryonen auf ihren Seiten mit einer Pinzette. </li><li> Nachdem die Agarose kühlt, füllen Sie die Schale mit 0,02% Tricaine in Ei Wasser. </li><li> Erwerben Sie Bilder mit Hellfeld, Epifluoreszenz oder konfokalen Mikroskopie. </li><li> Entfernen Embryo aus der Agarose mit einer Pinzette und Transfer zurück zum Ei Wasser. </li></ol>

<ol>
	<li>Gore, A. V., Monzo, K., Cha, Y. R., Pan, W., Weinstein, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vascular+development+in+the+zebrafish.">Vascular development in the zebrafish.</a> Cold Spring Harb Perspect Med. 2 (5), a006684 (2012).</li><li>Boatman, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assaying+hematopoiesis+using+zebrafish.">Assaying hematopoiesis using zebrafish.</a> Blood Cells Mol Dis. 51 (4), 271-276 (2013).</li><li>Ellett, F., Lieschke, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zebrafish+as+a+model+for+vertebrate+hematopoiesis.">Zebrafish as a model for vertebrate hematopoiesis.</a> Curr Opin Pharmacol. 10 (5), 563-570 (2010).</li><li>Liu, J., Stainier, D. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zebrafish+in+the+study+of+early+cardiac+development.">Zebrafish in the study of early cardiac development.</a> Circ Res. 110 (6), 870-874 (2012).</li><li>Traver, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+zebrafish+as+a+model+organism+to+study+development+of+the+immune+system.">The zebrafish as a model organism to study development of the immune system.</a> Adv Immunol. 81, 253-330 (2003).</li><li>Lieschke, G. J., Trede, N. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fish+immunology.">Fish immunology.</a> Curr Biol. 19 (16), R678-R682 (2009).</li><li>Lesley, R., Ramakrishnan, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insights+into+early+mycobacterial+pathogenesis+from+the+zebrafish.">Insights into early mycobacterial pathogenesis from the zebrafish.</a> Curr Opin Microbiol. 11 (3), 277-283 (2008).</li><li>Oehlers, S. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+chemical+enterocolitis+model+in+zebrafish+larvae+that+is+dependent+on+microbiota+and+responsive+to+pharmacological+agents.">A chemical enterocolitis model in zebrafish larvae that is dependent on microbiota and responsive to pharmacological agents.</a> Dev Dyn. 240 (1), 288-298 (2011).</li><li>Gemberling, M., Bailey, T. J., Hyde, D. R., Poss, K. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+zebrafish+as+a+model+for+complex+tissue+regeneration.">The zebrafish as a model for complex tissue regeneration.</a> Trends Genet. 29 (11), 611-620 (2013).</li><li>LeBert, D. C., Huttenlocher, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inflammation+and+wound+repair.">Inflammation and wound repair.</a> Semin Immunol. , (2014).</li><li>Henry, K. M., Loynes, C. A., Whyte, M. K., Renshaw, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zebrafish+as+a+model+for+the+study+of+neutrophil+biology.">Zebrafish as a model for the study of neutrophil biology.</a> J Leukoc Biol. 94 (4), 633-642 (2013).</li><li>Niethammer, P., Grabher, C., Look, A. T., Mitchison, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+tissue-scale+gradient+of+hydrogen+peroxide+mediates+rapid+wound+detection+in+zebrafish.">A tissue-scale gradient of hydrogen peroxide mediates rapid wound detection in zebrafish.</a> Nature. 459 (7249), 996-999 (2009).</li><li>Rosenberg, A. F., Wolman, M. A., Franzini-Armstrong, C., Granato, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+nerve-macrophage+interactions+following+peripheral+nerve+injury.">In vivo nerve-macrophage interactions following peripheral nerve injury.</a> J Neurosci. 32 (11), 3898-3909 (2012).</li><li>Otten, C., Abdelilah-Seyfried, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laser-inflicted+injury+of+zebrafish+embryonic+skeletal+muscle.">Laser-inflicted injury of zebrafish embryonic skeletal muscle.</a> J Vis Exp. (71), e4351 (2013).</li><li>Matrone, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laser-targeted+ablation+of+the+zebrafish+embryonic+ventricle:+a+novel+model+of+cardiac+injury+and+repair.">Laser-targeted ablation of the zebrafish embryonic ventricle: a novel model of cardiac injury and repair.</a> Int J Cardiol. 168 (4), 3913-3919 (2013).</li><li>Jagadeeswaran, P., Carrillo, M., Radhakrishnan, U. P., Rajpurohit, S. K., Kim, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laser-induced+thrombosis+in+zebrafish.">Laser-induced thrombosis in zebrafish.</a> Methods Cell Biol. 101, 197-203 (2011).</li><li>Vo, A. H., Swaroop, A., Liu, Y., Norris, Z. G., Shavit, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Loss+of+fibrinogen+in+zebrafish+results+in+symptoms+consistent+with+human+hypofibrinogenemia.">Loss of fibrinogen in zebrafish results in symptoms consistent with human hypofibrinogenemia.</a> PLoS One. 8 (9), e74682 (2013).</li><li>Liu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeted+mutagenesis+of+zebrafish+antithrombin+III+triggers+disseminated+intravascular+coagulation+and+thrombosis,+revealing+insight+into+function.">Targeted mutagenesis of zebrafish antithrombin III triggers disseminated intravascular coagulation and thrombosis, revealing insight into function.</a> Blood. , (2014).</li><li>Jagadeeswaran, P., Liu, Y. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+hemophilia+model+in+zebrafish:+analysis+of+hemostasis.">A hemophilia model in zebrafish: analysis of hemostasis.</a> Blood Cells Mol Dis. 23 (1), 52-57 (1997).</li><li>Jagadeeswaran, P., Gregory, M., Day, K., Cykowski, M., Thattaliyath, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zebrafish:+a+genetic+model+for+hemostasis+and+thrombosis.">Zebrafish: a genetic model for hemostasis and thrombosis.</a> J Thromb Haemost. 3 (1), 46-53 (2005).</li><li>Lin, H. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+thrombocyte+development+in+CD41-GFP+transgenic+zebrafish.">Analysis of thrombocyte development in CD41-GFP transgenic zebrafish.</a> Blood. 106 (12), 3803-3810 (2005).</li><li>Rosen, J. N., Sweeney, M. F., Mably, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microinjection+of+zebrafish+embryos+to+analyze+gene+function.">Microinjection of zebrafish embryos to analyze gene function.</a> J Vis Exp. (25), (2009).</li><li>Benard, E. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Infection+of+zebrafish+embryos+with+intracellular+bacterial+pathogens.">Infection of zebrafish embryos with intracellular bacterial pathogens.</a> J Vis Exp. (61), (2012).</li><li>Jagadeeswaran, P., Sheehan, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+blood+coagulation+in+the+zebrafish.">Analysis of blood coagulation in the zebrafish.</a> Blood Cells Mol Dis. 25 (3-4), 3-4 (1999).</li><li>Jin, S. W., Beis, D., Mitchell, T., Chen, J. N., Stainier, D. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cellular+and+molecular+analyses+of+vascular+tube+and+lumen+formation+in+zebrafish.">Cellular and molecular analyses of vascular tube and lumen formation in zebrafish.</a> Development. 132 (23), 5199-5209 (2005).</li><li>Traver, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transplantation+and+in+vivo+imaging+of+multilineage+engraftment+in+zebrafish+bloodless+mutants.">Transplantation and in vivo imaging of multilineage engraftment in zebrafish bloodless mutants.</a> Nat Immunol. 4 (12), 1238-1246 (2003).</li><li>Lawson, N. D., Weinstein, B. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+imaging+of+embryonic+vascular+development+using+transgenic+zebrafish.">In vivo imaging of embryonic vascular development using transgenic zebrafish.</a> Dev Biol. 248 (2), 307-318 (2002).</li><li>Renshaw, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+transgenic+zebrafish+model+of+neutrophilic+inflammation.">A transgenic zebrafish model of neutrophilic inflammation.</a> Blood. 108 (13), 3976-3978 (2006).</li><li>Hall, C., Flores, M. V., Storm, T., Crosier, K., Crosier, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+zebrafish+lysozyme+C+promoter+drives+myeloid-specific+expression+in+transgenic+fish.">The zebrafish lysozyme C promoter drives myeloid-specific expression in transgenic fish.</a> BMC Dev Biol. 7, 48 (2007).</li><li>Ellett, F., Pase, L., Hayman, J. W., Andrianopoulos, A., Lieschke, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=mpeg1+promoter+transgenes+direct+macrophage-lineage+expression+in+zebrafish.">mpeg1 promoter transgenes direct macrophage-lineage expression in zebrafish.</a> Blood. 117 (4), e49-e56 (2011).</li><li>Gray, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simultaneous+intravital+imaging+of+macrophage+and+neutrophil+behaviour+during+inflammation+using+a+novel+transgenic+zebrafish.">Simultaneous intravital imaging of macrophage and neutrophil behaviour during inflammation using a novel transgenic zebrafish.</a> Thromb Haemost. 105 (5), 811-819 (2011).</li><li>Bellido-Martin, L., Chen, V., Jasuja, R., Furie, B., Furie, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+fibrin+formation+and+platelet+and+endothelial+cell+activation+in+vivo.">Imaging fibrin formation and platelet and endothelial cell activation in vivo.</a> Thromb Haemost. 105 (5), 776-782 (2011).</li><li>Bielczyk-Maczynska, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+loss+of+function+screen+of+identified+genome-wide+association+study+Loci+reveals+new+genes+controlling+hematopoiesis.">A loss of function screen of identified genome-wide association study Loci reveals new genes controlling hematopoiesis.</a> PLoS Genet. 10 (7), e1004450 (2014).</li></ol>

The authors declare that they have no competing financial interests.

Zebrafische wurden erfolgreich als ein Modell für die verschiedenen Arten von Wunden einschließlich Laserbeschädigung 13-15, Laser-induzierte Thrombose 16 und epithelialen Verwundung 10 verwendet. Wir berichten über ein Verfahren zur mechanischen Verwundung, die einfach auszuführen ist und erzeugt einen kontrollierten Verletzungen in einem in vivo-Modell, das sehr gut für Echtzeit-Mikroskopie ist. Schädigung führt zu einem schnellen und messbaren hämostatische ...

Zebrafish have been used extensively to study a variety of topics in vascular biology, including vascular development, angiogenesis, and hematopoietic development and pathology1-3. Embryos develop a functional circulation as well as leukocytes and other components of the innate immune system by 1 day post fertilization (dpf) 1,4,5. The conservation of the inflammatory and leukocyte response to injury has made the zebrafish embryo an informative model for such diverse inflammatory processes as tuberculous infection, enterocolitis, and tissue regeneration6-9. Zebrafish embryos have been used to study injury-related inflammation particularly in the context of epithelial wounding and the neutrophil response10,11. Injury to the embryo results in a highly conserved cellular response from cells at the injury site and the innate immune cells recruited to respond to the injury and regulate its resolution11,12. Other injury models have used focused laser pulses to spatially localize injury to specific cell types including neurons, muscle cells, and cardiomyocytes13-15. 
Zebrafish embryos have been used as a model to study hemostasis and thrombosis in conditions of pharmacological and genetic manipulation, using both mechanical and laser-induced thrombus formation16-19. Components of the coagulation cascade appear to be well-conserved and transgenics have allowed for detailed studies of thrombocyte and fibrin deposition at the site of coagulation17,20,21. The procedure presented in this paper complements these methods by providing a system for studying mechanical vessel injury resulting in vessel breach, thrombus formation and resolution, and vessel repair.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="867">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:248px;">Name of Material/ Equipment</td>
			<td style="width:159px;">Company</td>
			<td style="width:159px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:303px;">Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:248px;">Minutia Pins</td>
			<td style="width:159px;">Fine Science Tools</td>
			<td>26002-10</td>
			<td>Tip diameter 0.0125 mm, rod diameter 0.1 mm</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:248px;">Pin Holder</td>
			<td style="width:159px;">Fine Science Tools</td>
			<td>26016-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Dumont #5 Fine Tip Forceps</td>
			<td style="width:159px;">Fine Science Tools</td>
			<td>11254-20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:248px;">Glass Depression Slide</td>
			<td>Aquatic Eco-Systems</td>
			<td style="width:159px;">M30</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Low Melting Agarose</td>
			<td>Lonza&#160;</td>
			<td style="width:159px;">50081</td>
			<td>Preheated to 42 &#186; C</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">N-Phenylthiourea (PTU)</td>
			<td style="width:159px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:159px;">P7629</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:248px;">3-aminobenzoic acid (Tricaine)</td>
			<td style="width:159px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:159px;">E10521</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:248px;">Hirudin</td>
			<td style="width:159px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:159px;">H7016</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Glass bottom imaging dishes</td>
			<td style="width:159px;">Mattek</td>
			<td>P35G-1.5-14-C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Dissecting microscope</td>
			<td style="width:159px;">Olympus</td>
			<td style="width:159px;">SZH10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:248px;">Fluorescence microscope</td>
			<td style="width:159px;">Zeiss</td>
			<td>Axio Observer</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:248px;">Aquarium salts</td>
			<td style="width:159px;">Instant Ocean</td>
			<td style="width:159px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:248px;">Insulin syringe with 28G1/2 needle</td>
			<td style="width:159px;">Becton Dickinson&#160;</td>
			<td style="width:159px;">329461</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

mechanical vessel injury in zebrafish embryos

Zebrafish (Danio rerio) embryos have proven to be a powerful model for studying a variety of developmental and disease processes. External development and optical transparency make these embryos especially amenable to microscopy, and numerous transgenic lines that label specific cell types with fluorescent proteins are available, making the zebrafish embryo an ideal system for visualizing the interaction of vascular, hematopoietic, and other cell types during injury and repair in vivo. Forward and reverse genetics in zebrafish are well developed, and pharmacological manipulation is possible. We describe a mechanical vascular injury model using micromanipulation techniques that exploits several of these features to study responses to vascular injury including hemostasis and blood vessel repair. Using a combination of video and timelapse microscopy, we demonstrate that this method of vascular injury results in measurable and reproducible responses during hemostasis and wound repair. This method provides a system for studying vascular injury and repair in detail in a whole animal model.

Mechanische Gefäßverletzung wurde am 2. dpf Embryonen (- C 2A) durchgeführt. Schädigung führt zu einer schnellen und zuverlässigen Koagulation Reaktion wie durch die Zeit zur Beendigung der Blutung (2D) gemessen. Um zu bestimmen, ob oder ob nicht Unterschiede in der Gerinnungsreaktion gemessen werden konnte, das Antikoagulans Hirudin wurde den Embryonen durch Injektion in die Kanal Cuviers unmittelbar vor der Verletzung (5-10 nl von 1 Einheit pro ul Hirudin gelöst in Wasser) vera...

Watch this Scientific Journal Video about Mechanical Vessel Injury in Zebrafish Embryos at JoVE.com

Mechanical Vessel Injury in Zebrafish Embryos

This article describes a method for creating a mechanical vessel injury in zebrafish embryos. This injury model provides a platform for studying hemostasis, injury-related inflammation, and wound healing in an organism ideally suited for real-time microscopy.

Mechanische Gefäßverletzung in Zebrafischembryonen

Zebrafish (Danio rerio) embryos have proven to be a powerful model for studying a variety of developmental and disease processes.  External development ...

mechanical-vessel-injury-in-zebrafish-embryos

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

7.2K Aufrufe.  University of California. This article describes a method for creating a mechanical vessel injury in zebrafish embryos. This injury model provides a platform for studying hemostasis, injury-related inflammation, and wound healing in an organism ideally suited for real-time microscopy. 