This study was supported by the American Heart Association (IRG 14330015, PRE 16850005, PRE 20380386, EIA 0740129N), and the National Institutes of Health (RR 2865AR; P20 RR 016477).

Alle nachfolgend beschriebenen Verfahren wurden überprüft und von der Institutional Animal Care und Verwenden Committee an der West Virginia University Health Sciences Center genehmigt. 1. Auswahl der Tiermodell HINWEIS: Die am häufigsten verwendeten Arten in der UCMS Modell gehören Sprague Dawley und Wistar-Ratten und die BALB / cJ Maus; anderen murinen Modelle haben eine begrenzte Wirksamkeit gezeigt (DBA / 2, C57BL / 6). Allerdings sollten sich sorgfältig überlegen, die besondere Maus oder Ratte Stamm der Wahl gegeben werden, wie die genetischen Hintergrund und die Anfälligkeit für Umwelt-Stressoren stark variieren zwischen den Arten und haben gezeigt, dass kritische Faktoren, die die Ergebnisse der Studie 11,14,15 sein, 19. <ol><li> Verwenden Tieren des betreffenden Alter wie dieses Protokoll dauert lea (zB wenn der gewünschte Endpunkt ist, um in einer 17 Wochen alten Ratten bewertet werden, werden die Ratten müssen die UCMS Protokoll bei ~ 9 Wochen alt zu starten)st 7-9 Wochen vollständig zu induzieren depressive Symptome. </li><li> Einzelhaustieren unterzogen UCMS in IACUC zugelassenen Käfigen und Einrichtungen, mit Essen und Standardfutter ad libitum (wenn nicht anders von spezifischen Protokolls erforderlich). </li><li> Seien Sie besonders vorsichtig, um sicherzustellen, Kontrollen werden in einem ruhigen Raum mit minimaler Aktivität untergebracht, um Auswirkungen von möglichen unbekannten Umwelt-Stressoren reduzieren. </li></ol> 2. Unvorhersehbare Chronische leichter Stress Protocol HINWEIS: Tiere unterziehen UCMS werden täglich zu einem Reinraum für UCMS Manipulationen verwendet transportiert (&gt; 5 Tage pro Woche). Tiere werden auf 1 oder 2 der unter jedem Tag aufgelistet Stressoren ausgesetzt. Stressoren auf einem randomisierten Zeitplan durchgeführt wird, und jede Spannung für mindestens 3-4 Stunden verabreicht wurde (siehe Tabelle 1). <ol><li> Das Bettzeug zu dämpfen durch Gießen 10-20 Unze. von sauberem Wasser in jedes Standard-Käfig. Einstellen der Wassermenge entsprechend der Größe desKäfig, um die Bettwäsche komplett zu dämpfen, aber nicht Bündelung von Wasser führen. Wohnen die Tiere in feuchten Käfig für 3-4 Std. </li><li> Decken und Kissen entfernen von jedem Käfig für 3-4 Stunden, nach denen Tiere in einen anderen überführt Stressor einen leeren Käfig (flache Wanne, Käfig Tilt) erfordern oder in einen sauberen Käfig mit frischer Bettwäsche gestellt. </li><li> Tilt Käfigen auf ca. 45 (ohne Bettzeug) für 3-4 h °. Käfige können mit einem stabilen Objekt, das an Ort und Stelle bleiben, wie das Tier bewegt sich in den Käfig wird gekippt werden. </li><li> Alter normalen 12 h / 12 h Hell / Dunkel-Zyklen in die Folgen von 30 Minuten Perioden Dauer von 8 Stunden. Nach kehren Tiere in den normalen Zyklus. </li><li> Übertragen jedes Tier von seinem Heimkäfig derjenigen der Käfig aus einem benachbarten Tier, das für 3 Stunden entfernt wurde. </li><li> Alle Betten Entfernen von jedem Käfig und Wasser bis zu einer Tiefe von ~ 0,25 Zoll für Mäuse oder ~ 0,5 Zoll für Ratten ca. 4 Std. Verwenden Sie Wasser, das wärmer als RT (~ 30 ° C), um HYPOTHERM minimierenia Potenzial. Kurz trockenen Tieren mit einem weichen Handtuch am Ende der Wasserexposition vor der Platzierung in saubere Käfige. </li><li> Expose Tiere Raub riecht / klingt durch Zugabe von zufällig verteilten Musterhaarbüscheln oder Urin (10-20 ml) aus dem natürlichen Raubtier-Arten in den Käfig für 3-4 Std. Alternativ spielen Knurren oder räuberischen Geräusche aus natürlichen Feind Arten in unmittelbarer Nähe zu Käfigen für 3 Stunden. </li><li> Am Ende eines jeden täglichen Stress Periode, legen alle Tiere in saubere Käfige und bringt sie zu dem Gehäuse Möglichkeiten. </li></ol> 3. Tier Monitoring / Grooming Stände <ol><li> Untersuchen Sie jedes Tier täglich für die Entwicklung von Wunden oder Wunden, die tierärztliche Behandlung erfordern. Tiere, die milde Verletzungen können in der UCMS Protokoll über die Genehmigung des Tierarztes weiter zu entwickeln. <ol><li> Zwei Ermittler bei der Bewertung Fell Pflege geschult kontrollieren jedes Tier und weisen eine wöchentliche Mantel Punktzahl auf einer Skala von 0-1. Diese Punktzahl ist abzuschreckenabgebaut durch die Zuordnung einzelner Noten (0- sauber, 1-dirty) zu jedem der 8 Körper Regionen- Kopf, Hals, Rücken-Mantel, ventralen Fell, Schwanz, Vorderbeine, Hinterbeine und Genitalbereich. Die gleichen Ermittler sind, diese Aufgabe in der gesamten UCMS-Protokoll durchführen, um die Konsistenz bei der Zuordnung Mantel Noten zu halten. </li><li> Jedes Tier, das eine scharfe Verringerung des Körpergewichts (dh&gt; 15%) erlebt sollte dem Veterinärpersonal gemeldet werden und müssen aus dem Protokoll entfernt werden. </li></ol></li></ol> 4. Behavioral Testing und Zielparameter HINWEIS: Mehrere Bewertungsmethoden verwendet werden, um Verhaltensänderungen von der UCMS Protokoll bei Nagetieren zu quantifizieren. <ol><li> Kumulative Coat Grooming Score. <ol><li> Wie oben beschrieben, wird eine wöchentliche Fell Pflege Punktzahl für jedes Tier zugeordnet. </li></ol></li><li> Saccharose Splash Test: <ol><li> Legen Sie das Tier in einem sauberen Käfig mit einem Wattebausch oder Tuch, um zu verhindern, Bettwäsche ausgekleidetaus, um sein Fell haften. Sprühen Sie eine 10% Saccharose-Lösung auf den Kopf und Rückenbeschichtung von jedem Tier und notieren Gesamtputzverhalten für 5 min. </li><li> Grooming-Aktivität (definiert als die Reinigung des Fells durch Lecken oder Kratzen) durch Latenz (Wartezeit zwischen der ersten Spritz und Initiierung von Grooming) und Frequenz (Anzahl der Male Grooming einen bestimmten Körperteil) gemessen. </li></ol></li><li> Saccharose Vorlieben Test: <ol><li> Gewöhnen Tieren zu trinken 1% Saccharose-Lösung (w / v) 72 Stunden vor dem Test und geben Sie dann die Exposition gegenüber zwei Flaschen (1% Saccharose-Lösung gegenüber Leitungswasser in verschiedenen Flaschen). Nach Gewöhnung, bieten Tieren ad libitum Zugang zu Saccharose-Lösung und Leitungswasser für 3 Stunden. Nach 3 Stunden Aufzeichnung der Verbrauchsmengen der Saccharose-Lösung und Leitungswasser und berechnen Saccharose bevorzugt als: [(Saccharose Verbrauch) / (Wasserverbrauch + Saccharose Verbrauch)] × 100. </li></ol></li><li> Schwanz Suspensionstest (Mäuse Only): <ol><li> Suverbringen Mäuse beim Schwanz von einem stabilen Stab (20 cm vom Boden) mit Klebeband (2 cm von der Spitze der Rute). Nehmen Immobilitätszeit über 5 min. Mäuse werden als immobile nur, wenn sie passiv und vollständig regungslos hängen. </li></ol></li><li> Forced Swim Test: <ol><li> Ort Tieren in einem Behälter (~ 15-20 cm Durchmesser für Mäuse; ~ 55-60 cm Durchmesser für Ratten) mit Wasser bei einer Temperatur von 26 ± 0,5 ° C gefüllt. Notieren Sie sich die Latenzzeit auf den ersten Kampf der Mobilität und der Zeit, während der 5-Minuten-Testphase verbracht unbeweglich. Am Ende eines Tests, legen Sie das nasse Tier in einem Haltekäfig auf einem Heizkissen (30-35 ° C) mit normalen Betten durch ein saugfähiges Papiertuch abgedeckt, bis trocken. </li></ol></li><li> Elevated Plus Maze: <ol><li> Lassen Sie jedes Tier, um das Labyrinth frei für 5 min zu erkunden. Rekord-Einträge in jedem Arm, und die Gesamtzeit in jedem Arm verbracht, nach apriorischen Kriterien 20. </li></ol></li><li> Locomotor Aktivität: <ol><li> Nehmen Aktivitätsniveaus, definiert als Gesamtbewegung, kunstbewegungen, Aufzucht Bewegungen und Nichterwerbstätigkeit, sowohl akute (30 min) und / oder chronischen (12 hr) Zeiträume. Tun Sie dies mit Hilfe der eigenen Käfig oder eine neue Umgebung, in Abhängigkeit von der individuellen Umwelt (obwohl Konsistenz beibehalten werden sollte) in Echtzeit von einem Beobachter oder post-hoc durch die Wiedergabe und Analyse von Kamera-Aufnahmen. </li></ol></li></ol> 5. Erweiterung / Variation UCMS Protocol <ol><li> Verwalten geeignete therapeutische Mittel oder Herausforderungen, um ihre Fähigkeit, entweder stumpf die Entwicklung UCMS induzierten Ergebnisse (wenn frühzeitig initiiert) oder Schwere der fest UCMS induzierten Ergebnisse umkehren (wenn spät eingeleitet) zu studieren. Dies ist abhängig von der einzelnen Labor oder Protokoll 11. </li></ol> 6. Endergebnis Assessments <ol><li> Nach dem Abschluss der UCMS Protokolle und Verhaltenstests, nutzen Tieren in den Folge experFormen in einer Weise, die die spezifischen Hypothesen, Ziele oder Ziele der einzelnen Labor anspricht. HINWEIS: Als Beispiele können diese kardiovaskulärer, entzündlicher oder endokrine Reaktionen, die chronischem Stress umfassen. Alternativ können therapeutische Eingriffe an diesem Punkt eingeführt werden, um ihre Wirksamkeit und mechanistischen Grundlagen zu bewerten. </li></ol>

<ol>
	<li>Lett, H. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Depression+as+a+risk+factor+for+coronary+artery+disease:+evidence,+mechanisms,+and+treatment.">Depression as a risk factor for coronary artery disease: evidence, mechanisms, and treatment.</a> Psychosom Med. 66 (3), 305-315 (2004).</li><li>Plante, G. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Depression+and+cardiovascular+disease:+a+reciprocal+relationship.">Depression and cardiovascular disease: a reciprocal relationship.</a> Metabolism. 54, 45-48 (2005).</li><li>Pizzi, C., Manzoli, L., Mancini, S., Bedetti, G., Fontana, F., Costa, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Autonomic+nervous+system,+inflammation+and+preclinical+carotid+atherosclerosis+in+depressed+subjects+with+coronary+risk+factors.">Autonomic nervous system, inflammation and preclinical carotid atherosclerosis in depressed subjects with coronary risk factors.</a> Atherosclerosis. 212 (1), 292-298 (2010).</li><li>Barden, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Implication+of+the+hypothalamic-pituitary-adrenal+axis+in+the+physiopathology+of+depression.">Implication of the hypothalamic-pituitary-adrenal axis in the physiopathology of depression.</a> J Psychiatry Neurosci. 29 (3), 185-193 (2004).</li><li>Bowman, R. E., Beck, K. D., Luine, V. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+stress+effects+on+memory:+sex+differences+in+performance+and+monoaminergic+activity.">Chronic stress effects on memory: sex differences in performance and monoaminergic activity.</a> Horm Behav. 43, 48-59 (2003).</li><li>Baune, B. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+relationship+between+subtypes+of+depression+and+cardiovascular+disease:+a+systematic+review+of+biological+models.">The relationship between subtypes of depression and cardiovascular disease: a systematic review of biological models.</a> Transl Psychiatry. 2, e92 (2012).</li><li>O'Leary, O. F., Cryan, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Towards+translational+rodent+models+of+depression.">Towards translational rodent models of depression.</a> Cell Tissue Res. 354 (1), 141-153 (2013).</li><li>Mineur, Y. S., Belzung, C., Crusio, W. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+unpredictable+chronic+mild+stress+on+anxiety+and+depression-like+behavior+in+mice.">Effects of unpredictable chronic mild stress on anxiety and depression-like behavior in mice.</a> Behav Brain Res. 175 (1), 43-50 (2006).</li><li>Yalcin, I., Belzung, I., Surget, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+strain+differences+in+the+unpredictable+chronic+mild+stress:+a+four-antidepressant+survey.">Mouse strain differences in the unpredictable chronic mild stress: a four-antidepressant survey.</a> Behav Brain Res. 193 (1), 140-143 (2008).</li><li>d'Audiffret, A. C., Frisbee, S. J., Stapleton, P. A., Goodwill, A. G., Isingrini, E., Frisbee, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Depressive+behavior+and+vascular+dysfunction:+a+link+between+clinical+depression+and+vascular+disease.">Depressive behavior and vascular dysfunction: a link between clinical depression and vascular disease.</a> J Appl Physiol. 108 (5), 1041-1051 (2010).</li><li>Stanley, S. C., Brooks, S. D., Butcher, J. T., d'Audiffret, A. C., Frisbee, S. J., Frisbee, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protective+effect+of+sex+on+chronic+stress-+and+depressive+behavior-induced+vascular+dysfunction+in+BALB/cJ+mice.">Protective effect of sex on chronic stress- and depressive behavior-induced vascular dysfunction in BALB/cJ mice.</a> J Appl Physiol. 117 (9), 959-970 (2014).</li><li>Ibarguen-Vargas, Y., Surget, A., Touma, C., Palme, R., Belzung, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multifaceted+strain-specific+effects+in+a+mouse+model+of+depression+and+of+antidepressant+reversal.">Multifaceted strain-specific effects in a mouse model of depression and of antidepressant reversal.</a> Psychoneuroendocrinology. 33 (10), 1357-1368 (2008).</li><li>Dalla, C., Pitychoutis, P. M., Kokras, N., Papadopoulou-Daifoti, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sex+differences+in+animal+models+of+depression+and+antidepressant+response.">Sex differences in animal models of depression and antidepressant response.</a> Basic Clin Pharmacol Toxicol. 106 (3), 226-233 (2010).</li><li>Mutlu, O., Gumuslu, E., Ulak, G., Celikyurt, I. K., Kokturk, S., K&#305;r, H. M., Akar, F., Erden, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+fluoxetine,+tianeptine+and+olanzapine+on+unpredictable+chronic+mild+stress-induced+depression-like+behavior+in+mice.">Effects of fluoxetine, tianeptine and olanzapine on unpredictable chronic mild stress-induced depression-like behavior in mice.</a> Life Sci. 91 (25-26), 1252-1262 (2012).</li><li>Gumuslu, E., Mutlu, O., Sunnetci, D., Ulak, G., Celikyurt, I. K., Cine, N., Akar, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effects+of+tianeptine,+olanzapine+and+fluoxetine+on+the+cognitive+behaviors+of+unpredictable+chronic+mild+stress-exposed+mice.">The effects of tianeptine, olanzapine and fluoxetine on the cognitive behaviors of unpredictable chronic mild stress-exposed mice.</a> Drug Res (Stuttg). 63 (10), 532-539 (2013).</li><li>Isingrini, E., Belzung, C., Freslon, J. L., Machet, M. C., Camus, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluoxetine+effect+on+aortic+nitric+oxide-dependent+vasorelaxation+in+the+unpredictable+chronic+mild+stress+model+of+depression+in+mice.">Fluoxetine effect on aortic nitric oxide-dependent vasorelaxation in the unpredictable chronic mild stress model of depression in mice.</a> Psychosom Med. 74 (1), 63-72 (2012).</li><li>Ripoll, N., David, D. J., Dailly, E., Hasco&#235;t, M., Bourin, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antidepressant-like+effects+in+various+mice+strains+in+the+tail+suspension+test.">Antidepressant-like effects in various mice strains in the tail suspension test.</a> Behav Brain Res. 143, 193-200 (2003).</li><li>Komada, M., Takao, K., Miyakawa, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Elevated+plus+maze+for+mice.">Elevated plus maze for mice.</a> J Vis Exp. (22), 1088 (2008).</li><li>Golbidi, S., Frisbee, J. C., Laher, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+stress+impacts+the+cardiovascular+system:+animal+models+and+clinical+outcomes.">Chronic stress impacts the cardiovascular system: animal models and clinical outcomes.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. , (2015).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

Extensive clinical and epidemiological evidence has indicated that chronic stress is one of the most potent precipitating factors for depression. Repeated exposure to stressors may potentiate individual vulnerability to depression and other neuropsychiatric disorders as a consequence of the psychological and physical demands within the body that accumulate over time. The use of validated preclinical animal models offers a valuable translational tool for studying depression and comorbid diseases. Firstly, an ideal animal ...

Depressive psychischen Erkrankungen ist eine komplexe neurologische Erkrankung, die derzeit als eine führende Ursache von Behinderungen und Krankheitslast weltweit anerkannt wird. Die NIMH berichtet, dass etwa 12% der Amerikaner leiden an einer klinischen Depression, mit doppelt so viele Frauen im Vergleich zu Männern 1 betroffen. Allein in den USA, Konten Depressionen für Milliarden von Dollar direkten Gesundheitskosten und schätzungsweise 193 Mrd. $ mehr bei den indirekten Kosten (abgesenkt Ertrags- und Produktivitätsverluste) 2. Symptome der Depression sind Anhedonie, Gewichtsveränderungen und Schlafzyklen, verminderte körperliche Aktivität und Körperpflege, Gefühle der Hoffnungslosigkeit oder Schuld und / oder wiederkehrende Gedanken an Tod oder Selbstmord. Während des letzten Jahrzehnts, epidemiologischen und klinischen Studien haben gezeigt, dass eine Depression ist ein unabhängiger Risikofaktor für kardiovaskuläre Erkrankungen (CVD) Morbidität und Mortalität 3 und prädiktiv ist schwereren Prognose von kardiovaskulären Erkrankungen, einschließlich atherosclerosis, Hypertonie, Myokardinfarkt und koronare Herzkrankheit, unabhängig von der Vorgeschichte offene CVD 4. Trotz der steigenden Prävalenz und die öffentliche Gesundheit Auswirkungen von Depression wird der Ätiologie und verwandte Pathophysiologie dieser Erkrankung schlecht verstanden und die Heterogenität der Erkrankung infolge verschiedener Faktoren (zB genetischen, biologischen und Umweltkomponenten) wurde die klinische Diagnose schwierig gemacht definieren. Daten zeigen, dass unlösbare psychischer Stress ist ein wichtiger Faktor für die Entwicklung von depressiven Erkrankungen und kann auch ein starker pathogener Faktor verbindet Depressionen und CVD, zum Teil auf Störungen und Fehlregulation der Hypothalamus-Hypophysen-Nebennieren-Achse (HPA) 5,6 sein. Dysfunktion der HPA-Achse ist ein wichtiger Mechanismus, der an die in der Depression beobachtet verhaltensmäßigen und physiologischen Veränderungen und die Entwicklung mehrerer CVD Risikofaktoren in Verbindung gebracht wurde, einschließlichDyslipidämien, Fettleibigkeit und Diabetes. 7 Mehreren Tiermodellen der Depression in Versuch, den Mechanismus der veränderten HPA-Achse Aktivitätscharakteristik der klinischen Depression replizieren entwickelt worden; solche Modelle bieten eine validierte Verfahren zur Untersuchung der Verhaltens, neurologischen und physiologischen Veränderungen mit chronischem und akutem Stress bei Tieren. Die Gültigkeit der einem Tiermodell der Krankheit wird auf der Relevanz der Ätiologie und das Fortschreiten der Design-Modell und seine Fähigkeit, anatomischen, neurophysiologische rekapitulieren, und in der menschlichen Krankheit beobachteten Verhaltens Merkmalen. Darüber hinaus sollte der präklinischen antwortet Behandlungen (wie SSRIs) ähnliche Ergebnisse wie die in klinischen Situationen beobachtet ergeben. Mehrere Tiermodelle von Stress-induzierten Depressionen sind derzeit in der Forschung verwendet werden, wie zum Beispiel erlernte Hilflosigkeit, frühes Leben Stress und soziale Niederlage Stress. Jedoch hat jedes dieser Modelle inhärente Nachteiledass ihre translationalen Effektivität 8 zu verringern. In den letzten Jahrzehnten hat sich das Unvorhersehbare Chronische Geringe Belastung (UCMS) Protokoll als eine der translational relevanten Modellen zur Untersuchung der Pathophysiologie der Depression bei Nagern 9 entstanden. Dieses Modell basiert auf dem Grundgedanken, die chronische Exposition gegenüber Stressoren stört Stress-Antwort-Systemen und führt letztendlich zur Entwicklung von depressiven Störungen basiert. Während des UCMS Protokoll werden die Tiere in eine randomisierte Reihe von milden ökologischen und sozialen Stressoren täglich ausgesetzt. Ein entscheidender Faktor, der die Relevanz dieses Modells für die menschliche Situationen erhöht liegt in dem hohen Grad an Unvorhersehbarkeit und Unkontrollierbarkeit der Stressoren sowie den Zeitpunkt, zu dem sie eingeführt werden. Darüber hinaus verwendet der UCMS Protokoll nur milden Stressoren, anstatt sich auf frühen Leben oder aggressive physikalische Reize. Über einen Zeitraum von UCMS Exposition entwickeln depressive Verhaltensweisen und sind vergleichbar mit Clinschen Symptomen, einschließlich verringerte Reaktionsfähigkeit auf Belohnungen (Anhedonie), Veränderungen in der körperlichen Aktivität und Ermittlungsverhalten (Hilflosigkeit und Verzweiflung), Verschlechterung der Mantel Staat und verändert sexuellen Aktivität 10. Fast alle nachweisbaren Symptome der Depression wurden unter Verwendung dieses Modells gemeldet, und Studien haben gezeigt, dass diese Verhaltensweisen bestehen bleiben für mehrere Wochen nach dem Ende der Stress. Darüber hinaus können diese UCMS induzierten depressive Verhalten allmählich durch chronische verehrt werden, aber nicht akuter Behandlung mit bestimmten Antidepressiva, was ähnliche neurologische Wirkungen der therapeutischen Verbesserung, die genau widerspiegelt die klinische Wirkung und variable Wirksamkeit dieser Mittel bei Menschen 11,14- 18. Hier berichten wir über eine detaillierte Beschreibung der UCMS Protokoll und typische Verhaltens und Gefäß Ergebnisse bei Mäusen.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Temporary animal cages with lids</td>
			<td>n/a</td>
			<td>n/a&#160;</td>
			<td>Provided by your animal care facility</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rodent bedding</td>
			<td>n/a</td>
			<td>n/a&#160;</td>
			<td>Provided by your animal care facility</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Predator fur or urine</td>
			<td>n/a</td>
			<td>n/a&#160;</td>
			<td>Provided by your animal care facility</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rodent cage drinking bottles</td>
			<td>n/a</td>
			<td>n/a&#160;</td>
			<td>Provided by your animal care facility</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1000 ml graduated cylinder</td>
			<td>variable</td>
			<td>variable</td>
			<td>This is optional.&#160; Any container from which a known quantiity of water can be poured will be appropriate</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wooden blocks cut from 2x4</td>
			<td>variable</td>
			<td>variable</td>
			<td>8 inch sections are cut to facilitate cage tilt procedures</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Soft paper towels</td>
			<td>n/a</td>
			<td>n/a&#160;</td>
			<td>Provided by your institution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small spray bottle&#160;</td>
			<td>Walmart</td>
			<td>n/a&#160;</td>
			<td>100-200 ml volume is sufficient, used for sucrose splash test</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medium (mice) or large (rats) plastic tubs for swim testing</td>
			<td>Walmart</td>
			<td>variable</td>
			<td>Should be of sufficient depth that the animals cannot touch bottom (e.g., 2 feet)</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

an unpredictable chronic mild stress protocol for instigating depressive symptoms, behavioral changes and negative health outcomes in rodents

Chronische, ungelöste Stress ist ein wichtiger Risikofaktor für die Entwicklung der klinischen Depression. Während viele präklinischen Modellen von Stress-induzierten Depressionen berichtet worden, (UCMS) Protokoll ist das unvorhersehbare chronische milde Stress eine etablierte translational relevante Modell zur Induktion von Verhaltensauffälligkeiten allgemein mit einer klinischen Depression verbunden sind, wie Anhedonie, veränderte Putzverhalten und erlernte Hilflosigkeit bei Nagern. Die UCMS Protokoll induziert auch physiologische (z .B., Hyperkortisolämie, Bluthochdruck) und neurologische (zB Anhedonie, erlernte Hilflosigkeit) Änderungen, die klinisch mit Depressionen assoziiert sind. Wichtiger ist, kann UCMS induzierten depressive Symptome durch chronische verbessert werden, aber nicht akuter Behandlung mit gemeinsamen SSRIs. Als solche bietet das UCMS Protokoll viele Vorteile gegenüber akuten Stress Protokolle oder Protokolle, die extremer Stressfaktoren zu nutzen. Unser Protokoll beinhaltet randomisierte, tägliche Exposition bis 7 verschiedene stressors: feuchte Bettzeug, Entfernung von Bettzeug, Käfig Neigung, Veränderung der Hell / Dunkel-Zyklen, soziale Spannungen, flache Wasserbad und Raubtier-Sounds / riecht. Durch Unterwerfen Nagetieren 3-4 Stunden täglich, um diesen milden Stressoren für 8 Wochen zeigen wir sowohl erhebliche Verhaltensänderungen und schlechter Gesundheit Ergebnisse auf die Herz-Kreislauf-System. Dieser Ansatz ermöglicht eine eingehende Befragung der neurologischen, Verhaltens-und physiologischen Veränderungen mit chronischen Stress-induzierten Depressionen sowie für die Erprobung neuer potentielle therapeutische Mittel oder Interventionsstrategien.

Ein Beispiel der Zeitplan für eine Woche nach dem UCMS Verfahren ist in Tabelle 1. Jede Woche gezeigt, wurden Stressoren randomisiert acclamation verhindern und Unvorhersehbarkeit der Stress Herausforderung jeden Tag zu gewährleisten. Maßnahmen der Depressive wie Behaviors Nach 8 Wochen UCMS gab es erhebliche Veränderungen an beiden verhaltensmäßigen und physiologischen Ergebnissen bei chronisch gestresst Nagern in Bezug au...

Watch this Scientific Journal Video about An Unpredictable Chronic Mild Stress Protocol for Instigating Depressive Symptoms, Behavioral Changes and Negative Health Outcomes in Rodents at JoVE.com

An Unpredictable Chronic Mild Stress Protocol for Instigating Depressive Symptoms, Behavioral Changes and Negative Health Outcomes in Rodents

The unpredictable chronic mild stress (UCMS) protocol is a validated method for studying behavioral and physiological changes associated with chronic stress and depressive symptoms. Eight weeks of imposition of the UCMS protocol induces behavioral changes and poor health outcomes in rodents of either gender.

Ein unberechenbarer Chronische leichter Stress Protokoll zur Anstiftung depressive Symptome, Verhaltensänderungen und negativen gesundheitlichen Folgen in Nagetiere

Chronic, unresolved stress is a major risk factor for the development of clinical depression. While many preclinical models of stress-induced depression ...

an-unpredictable-chronic-mild-stress-protocol-for-instigating

Research

JoVE Journal

Behavior

22.2K Aufrufe.  West Virginia University Health Sciences Center. The unpredictable chronic mild stress (UCMS) protocol is a validated method for studying behavioral and physiological changes associated with chronic stress and depressive symptoms. Eight weeks of imposition of the UCMS protocol induces behavioral changes and poor health outcomes in rodents of either gender.

Serie: An Unpredictable Chronic Mild Stress Protocol for Instigating Depressive Symptoms, Behavioral Changes and Negative Health Outcomes in Rodents

Using Chronic Social Stress to Model Postpartum Depression in Lactating Rodents

Exposure to chronic stress is a reliable predictor of depressive disorders, and social stress is a common ethologically relevant stressor in both animals and humans. However, many animal models of depression were developed in males and are not applicable or effective in studies of postpartum females. Recent studies have reported significant effects of chronic social stress during lactation, an ethologically relevant and effective stressor, on maternal behavior, growth, and behavioral neuroendocrinology. This manuscript will describe this chronic social stress paradigm using repeated exposure of a lactating dam to a novel male intruder, and the assessment of the behavioral, physiological, and neuroendocrine effects of this model. Chronic social stress (CSS) is a valuable model for studying the effects of stress on the behavior and physiology of the dam as well as her offspring and future generations. The exposure of pups to CSS can also be used as an early life stress that has long term effects on behavior, physiology, and neuroendocrinology.

This article describes the use of chronic resident intruder social stress as an ethologically relevant paradigm to model postpartum depression and anxiety in lactating rodents.

Mit Chronische Sozial Stress zu Modell postpartalen Depression in Lactating Nagetiere

Exposure to chronic stress is a reliable predictor of depressive disorders, and social stress is a common ethologically relevant stressor in both animals ...

Forschung

Verhalten

Nest Building as an Indicator of Health and Welfare in Laboratory Mice

The minimization and alleviation of suffering has moral and scientific implications. In order to mitigate this negative experience one must be able to identify when an animal is actually in distress. Pain, illness, or distress cannot be managed if unrecognized. Evaluation of pain or illness typically involves the measurement of physiologic and behavioral indicators which are either invasive or not suitable for large scale assessment. The observation of nesting behavior shows promise as the basis of a species appropriate cage-side assessment tool for recognizing distress in mice. Here we demonstrate the utility of nest building behavior in laboratory mice as an ethologically relevant indicator of welfare. The methods presented can be successfully used to identify thermal stressors, aggressive cages, sickness, and pain. Observation of nest building behavior in mouse colonies provides a refinement to health and well-being assessment on a day to day basis.

We demonstrate the utility of nest building behavior in laboratory mice as an indicator of welfare. Nest scoring is a sensitive technique that is altered by temperature, illness, and aggression. The time to integrate into nest test (TINT) is a simple cage-side assessment that can detect postoperative pain.

The minimization and alleviation of  suffering has moral and scientific implications. In order to mitigate this  negative experience one must be able to ...

The Forced Swim Test as a Model of Depressive-like Behavior

The goal of the present protocol is to describe the forced swim test (FST), which is one of the most commonly used assays for the study of depressive-like behavior in rodents. The FST is based on the assumption that when placing an animal in a container filled with water, it will first make efforts to escape but eventually will exhibit immobility that may be considered to reflect a measure of behavioral despair. This test has been extensively used because it involves the exposure of the animals to stress, which was shown to have a role in the tendency for major depression. Additionally, the FST has been shown to share some of the factors that are influenced or altered by depression in humans, including changes in food consumption, sleep abnormalities and drug-withdrawal-induced anhedonia. The main advantages of this procedure are that it is relatively easy to perform and that its results are easily and quickly analyzed. Moreover, its sensitivity to a broad range of antidepressant drugs that makes it a suitable screening test is one of the most important features leading to its high predictive validity. Despite its appeal, this model has a number of disadvantages. First, the issue of chronic augmentation is problematic in this test because in real life patients need to be treated for at least several weeks before they experience any relief from their symptoms. Last, due to the aversiveness of the FST, it is important to take into account possible influences it might have on brain structure/function if brain analyses are to be carried out following this procedure.

This protocol describes the forced swim test, which is used for the study of depressive-like behavior in rodents. This procedure involves placing an animal in a container filled with water that eventually will lead to the exhibition of immobility behavior, which is considered to reflect behavioral despair.

Forced Swim-Test als ein Modell der Depressive ähnliche Verhalten

The goal of the present protocol is to describe the forced swim test (FST), which is one of the most commonly used assays for the study of depressive-like ...

The Double-H Maze: A Robust Behavioral Test for Learning and Memory in Rodents

Spatial cognition research in rodents typically employs the use of maze tasks, whose attributes vary from one maze to the next. These tasks vary by their behavioral flexibility and required memory duration, the number of goals and pathways, and also the overall task complexity. A confounding feature in many of these tasks is the lack of control over the strategy employed by the rodents to reach the goal, e.g., allocentric (declarative-like) or egocentric (procedural) based strategies. The double-H maze is a novel water-escape memory task that addresses this issue, by allowing the experimenter to direct the type of strategy learned during the training period. The double-H maze is a transparent device, which consists of a central alleyway with three arms protruding on both sides, along with an escape platform submerged at the extremity of one of these arms.
Rats can be trained using an allocentric strategy by alternating the start position in the maze in an unpredictable manner (see protocol 1; &#167;4.7), thus requiring them to learn the location of the platform based on the available allothetic cues. Alternatively, an egocentric learning strategy (protocol 2; &#167;4.8) can be employed by releasing the rats from the same position during each trial, until they learn the procedural pattern required to reach the goal. This task has been proven to allow for the formation of stable memory traces.
Memory can be probed following the training period in a misleading probe trial, in which the starting position for the rats alternates. Following an egocentric learning paradigm, rats typically resort to an allocentric-based strategy, but only when their initial view on the extra-maze cues differs markedly from their original position. This task is ideally suited to explore the effects of drugs/perturbations on allocentric/egocentric memory performance, as well as the interactions between these two memory systems.

The goal of this protocol is to investigate spatial cognition in rodents. The double-H water maze is a novel test, which is particularly useful to elucidate the different components of learning, consolidation and memory, as well as the interplay of memory systems.

Die Doppel-H Maze: A Robust Verhaltenstest für Lernen und Gedächtnis in Nagetiere

Spatial cognition research in rodents typically employs the use of maze tasks, whose attributes vary from one maze to the next. These tasks vary by their ...

A Mouse Model of Subchronic and Mild Social Defeat Stress for Understanding Stress-induced Behavioral and Physiological Deficits

Stressful life events often increase the incidence of depression in humans. To study the mechanisms of depression, the development of animal models of depression is essential. Because there are several types of depression, various animal models are needed for a deeper understanding of the disorder. Previously, a mouse model of subchronic and mild social defeat stress (sCSDS) using a modified chronic social defeat stress (CSDS) paradigm was established. In the paradigm, to reduce physical injuries from aggressors, the duration of physical contact between the aggressor and a subordinate was reduced compared to in the original CSDS paradigm. sCSDS mice showed increased body weight gain, food intake, and water intake during the stress period, and their social behaviors were suppressed after the stress period. In terms of the face validity of the stress-induced overeating and overdrinking following the increased body weight gain, the sCSDS mice may show some features related to atypical depression in humans. Thus, a mouse model of sCSDS may be useful for studying the pathogenic mechanisms underlying depression. This protocol will help establish the sCSDS mouse model, especially for studying the mechanisms underlying stress-induced weight gain and polydipsia- and hyperphagia-like symptoms.

Here, methods for developing a mouse model of subchronic and mild social defeat stress are described and used to investigate the pathogenic features of depression including hyperphagia- and polydipsia-like symptoms following increased body weight.

Einem Mausmodell der Subchronische und Mild Social Niederlage Stress-for Understanding Stress-induzierten verhaltensmäßigen und physiologischen Defizite

Stressful life events often increase the incidence of depression in humans. To study the mechanisms of depression, the development of animal models of ...

Feeding Experimentation Device (FED): Construction and Validation of an Open-source Device for Measuring Food Intake in Rodents

Food intake measurements are essential for many research studies. Here, we provide a detailed description of a novel solution for measuring food intake in mice: the Feeding Experimentation Device (FED). FED is an open-source system that was designed to facilitate flexibility in food intake studies. Due to its compact and battery powered design, FED can be placed within standard home cages or other experimental equipment. Food intake measurements can also be synchronized with other equipment in real-time via FED's transistor-transistor logic (TTL) digital output, or in post-acquisition processing as FED timestamps every event with a real-time clock. When in use, a food pellet sits within FED's food well where it is monitored via an infrared beam. When the pellet is removed by the mouse, FED logs the timestamp onto its internal secure digital (SD) card and dispenses another pellet. FED can run for up to 5 days before it is necessary to charge the battery and refill the pellet hopper, minimizing human interference in data collection. Assembly of FED requires minimal engineering background, and off-the-shelf materials and electronics were prioritized in its construction. We also provide scripts for analysis of food intake and meal patterns. Finally, FED is open-source and all design and construction files are online, to facilitate modifications and improvements by other researchers.

Feeding Experimentation Device FED: Construction and Validation of an Open-source Device for Measuring Food Intake in Rodents

Feeding Experimentation Device (FED) is an open-source device for measuring food intake in mice. FED can also synchronize food intake measurements with other techniques via a real-time digital output. Here, we provide a step-by-step tutorial for the construction, validation, and usage of FED.

Feeding Experimentation Gerät (FED): Konstruktion und Validierung eines Open-Source-Vorrichtung zur Messung der Nahrungsaufnahme bei Nagetiere

Food intake measurements are essential for many research studies. Here, we provide a detailed description of a novel solution for measuring food intake in ...

An Automated T-maze Based Apparatus and Protocol for Analyzing Delay- and Effort-based Decision Making in  Free Moving Rodents

Many neurological and psychiatric patients demonstrate difficulties and/or deficits in decision making. Rodent models are helpful to produce a deeper understanding of the neurobiological causes underlying the decision-making problems. A cost-benefit based T-maze task is used for measuring decision making in which rodents choose between a high reward arm (HRA) and a low reward arm (LRA). There are two paradigms of the T-maze decision-making task, one in which the cost is a time delay and the other in which it is physical effort. Both paradigms require a tedious and labor-intensive management of experimental animals, multiple doors, pellet reward, and arm choice recordings. In the current work, we invented an apparatus based on traditional T-maze with full automation for pellet delivery, door management and choice recordings. This automated setup can be used for the evaluation of both delay- and effort-based decision making in rodents. With the protocol described here, our lab investigated the decision-making phenotypes of multiple genetically modified mice. In the representative data, we showed that the mice with ablated medial habenular showed aversions of both delay and effort and tended to choose the immediate and effortless reward. This protocol helps to decrease the variability caused by experimenter intervention and to enhance experiment efficiency. In addition, chronic silicon probe or microelectrode recording, fiber-optic imaging and/or manipulation of neural activity can be easily applied during the decision-making task using the setup described here.

This article introduces an automated T-maze apparatus that we invented, and a protocol based on this apparatus for analyzing delay-based decision making and effort-based decision making in free moving rodents.

Eine automatisierte T-maze basierte Apparat und Protokoll für die Analyse von Verzögerung und Aufwand-basierte Entscheidungsfindung bei frei beweglichen Nagetieren

Many neurological and psychiatric patients demonstrate difficulties and/or deficits in decision making. Rodent models are helpful to produce a deeper ...

The Unpredictable Chronic Mild Stress Protocol for Inducing Anhedonia in Mice

Depression is a highly prevalent and debilitating condition, only partially addressed by current pharmacotherapies. The lack of response to treatment by many patients prompts the need to develop new therapeutic alternatives and to better understand the etiology of the disorder. Pre-clinical models with translational merits are rudimentary for this task. Here we present a protocol for the unpredictable chronic mild stress (UCMS) method in mice. In this protocol, adolescent mice are chronically exposed to interchanging unpredictable mild stressors. Resembling the pathogenesis of depression in humans, stress exposure during the sensitive period of mice adolescence instigates a depressive-like phenotype evident in adulthood. UCMS can be used for screenings of antidepressants on the variety of depressive-like behaviors and neuromolecular indices. Among the more prominent tests to assess depressive-like behavior in rodents is the sucrose preference test (SPT), which reflects anhedonia (core symptom of depression). The SPT will also be presented in this protocol. The ability of UCMS to induce anhedonia, instigate long-term behavioral deficits and enable reversal of these deficits via chronic (but not acute) treatment with antidepressants strengthens the protocol&#39;s validity compared to other animal protocols for inducing depressive-like behaviors.

Here we present the unpredictable chronic mild stress protocol in mice. This protocol induces a long-term depressive-like phenotype and enables to assess the efficacy of putative antidepressants in reversing the behavioral and neuromolecular depressive-like deficits.

Das unvorhersehbare milde Dauerstress Protokoll zur Induktion Anhedonie bei Mäusen

Depression is a highly prevalent and debilitating condition, only partially addressed by current pharmacotherapies. The lack of response to treatment by ...

Stress-Enhanced Fear Learning, a Robust Rodent Model of Post-Traumatic Stress Disorder

Fear behaviors are important for survival, but disproportionately high levels of fear can increase the vulnerability for developing psychiatric disorders such as post-traumatic stress disorder (PTSD). To understand the biological mechanisms of fear dysregulation in PTSD, it is important to start with a valid animal model of the disorder. This protocol describes the methodology required to conduct stress-enhanced fear learning (SEFL) experiments, a preclinical model of PTSD, in both rats and mice. SEFL was developed to recapitulate critical aspects of PTSD, including long-term sensitization of fear learning caused by an acute stressor. SEFL uses aspects of Pavlovian fear conditioning but produces a distinct and robust sensitized fear response far greater than normal conditional fear responses. The trauma procedure involves placing a rodent in a conditioning chamber and administering 15 unsignaled shocks randomly distributed over 90 minutes (for rat experiments; for mouse experiments, 10 unsignaled shocks randomly distributed over 60 minutes are used). On day 2, rodents are placed in a novel conditioning context where they receive a single shock; then, on day 3 they are placed back in the same context as on day 2 and tested for changes in freezing levels. Rodents that previously received the trauma display enhanced levels of freezing on the test day compared to those that received no shocks on the first day. Thus, with this model, a single highly stressful experience (the trauma) produces extreme fear of the stimuli associated with the traumatic event.

Here we describe the detailed methodology required to conduct stress-enhanced fear learning (SEFL) experiments, a preclinical model of post-traumatic stress disorder, in both rats and mice. The model utilizes aspects of Pavlovian fear conditioning and freezing as an index of enhanced fear in rodents.

Stress verstärkt Angst lernen, ein stabiles Nagetier Modell der posttraumatischen Belastungsstörung

Fear behaviors are important for survival, but disproportionately high levels of fear can increase the vulnerability for developing psychiatric disorders ...

Novel Object Recognition and Object Location Behavioral Testing in Mice on a Budget

Ethologically relevant behavioral testing is a critical component of any study that uses mouse models to study the cognitive effects of various physiological or pathological changes. The object location task (OLT) and the novel object recognition task (NORT) are two effective behavioral tasks commonly used to reveal the function and relative health of specific brain regions involved in memory. While both of these tests exploit the inherent preference of mice for the novelty to reveal memory for previously encountered objects, the OLT primarily evaluates spatial learning, which relies heavily on hippocampal activity. The NORT, in contrast, evaluates non-spatial learning of object identity, which relies on multiple brain regions. Both tasks require an open-field-testing arena, objects with equivalent intrinsic value to mice, appropriate environmental cues, and video recording equipment and the software. Commercially available systems, while convenient, can be costly. This manuscript details a simple, cost-effective method for building the arenas and setting up the equipment necessary to perform the OLT and NORT. Furthermore, the manuscript describes an efficient testing protocol that incorporates both OLT and NORT and provides typical methods for data acquisition and analysis, as well as representative results. Successful completion of these tests can provide valuable insight into the memory function of various mouse model systems and appraise the underlying neural regions that support these functions.

Here we provide a protocol which includes comprehensive instructions for the economical establishment of murine object location and novel object recognition behavioral testing, including the design, cost, and construction of required equipment as well as execution of behavioral testing, data collection, and analysis.