Dieses Mausmodell kann helfen, Fragen im medizinischen Bereich der Wundchronik zu beantworten. Der große Vorteil dieses Modells ist, dass die chronischen Wunden bei Mäusen viele Aspekte der chronischen Wunden beim Menschen imitieren. Um zu beginnen, legen Sie die Maus auf eine saubere Oberfläche und halten Sie sie an Ort und Stelle, indem Sie die Basis ihres Schwanzes kneifen.
Dann bereiten Sie die Haarschneider vor und sind bereit, sie schnell wegzuziehen, wenn die Maus plötzliche Bewegungen macht. Rasieren Sie den ganzen Rücken vom Hals bis zum Schwanz einschließlich rund um den Schwanz. Führen Sie die Klinge leicht gegen die Richtung des Haarwachstums für den effizientesten Schnitt.
Drücken Sie die Clippers nicht tief in die Haut, da dies prellungen oder schneiden kann. Als nächstes bereiten Sie die Haut für eine Anwendung der Enthaarungslotion. Befeuchten Sie die Haut mit einem wassergetränkten Papiertuch, um chemische Verbrennungen zu verhindern.
Drücken Sie leicht mit genügend Druck, um die geschnittenen Haare auf die Haut zu befeuchten. Dann, während die Haut nass ist, reiben Sie eine kleine Puppe op der Enthaarungslotion in den rasierten Bereich für 15 bis 20 Sekunden. Nach dem Auftragen lassen Sie die Lotion 20 bis 45 Sekunden lang mit der Haut reagieren.
Vor dem Abspülen der Lotion, leicht wischen einige Lotion an verschiedenen Stellen, um die Reaktion zu überprüfen. Wenn die Haut rosa und haarlos ist, ist die Reaktion vollständig. Greifen Sie dann die Maus, um sie abzuwaschen.
Drücken Sie mit der nicht dominanten Hand mit dem Daumen die Basis ihres Schwanzes gegen die Handfläche und schließen Sie die anderen Finger. Dann mit der Nase der Maus auf und weg vom Wasser, lassen Sie Wasser über den Rücken des Tieres laufen. Dann schnell, aber sanft, reiben Sie die Rückseite der Maus mit der anderen Hand, um die Lotion wegzuwaschen.
Nach dem Entfernen der enthaarten Creme die Haut mit einem Papiertuch trocknen. Es ist wichtig, keine Lotion auf die Ohren, den Schwanz oder irgendwo in der Nähe des Gesichts aufzutragen. Wenn dies geschehen sollte, wischen Sie sofort die Lotion mit einem nassen Handtuch weg und laufen Sie dann Wasser über die Maus, um Schäden an diesen Bereichen zu verhindern.
Wenn dunkle Flecken nach der Verwendung der Creme bemerkt werden, wenden Sie die Creme erneut auf diese Bereiche an. Die dunklen Flecken der Haut wachsen Haare schneller während der Dauer des Experiments. Also schneiden Sie die Haare kurz alle drei bis fünf Tage, wenn nötig.
Ein oder zwei Pflaster, die sich nicht über der Wundstelle befinden, ist akzeptabel, aber wenn die Rückseite der Maus mehr dunkle Flecken hat, verwenden Sie sie nicht für das chronische Wundmodell. Nach dem Entfernen der Haare, hausieren Sie die Maus allein für mindestens einen Tag vor der Wundung, weil die Haut zu empfindlich von der Enthaarungslotion sein wird. 30 Minuten vor der Operation die Maus mit 120 Mikroliter Buprenorphin intraperitoneal in steriles PBS injizieren.
Alle Volumes in diesem Verfahren gehen von einer 60-Gramm-Maus aus. 20 Minuten vor der Operation die Maus mit 480 MikroliterAT ATZ intraperitoneal in steriles PBS injizieren. Teilen Sie das Volumen auf beiden Seiten des Bauches.
Nach der Verabreichung des ATZ, legen Sie die Maus in einem kleinen Kunststoffbehälter auf einem warmen Heizkissen, bis die Operation beginnt. Bedecken Sie den kleinen Behälter mit einem Papiertuch, um die Hitze einzudämmen. Die Maus sollte sich beruhigen, wenn sie sich erwärmt.
Nach Bestätigung eines anästhesierten Zustands, fahren Sie mit der Verwundung fort. Um den Wundvorgang zu beginnen, sprühen Sie ein Chemisches mit 70% Ethanol, um die Rückseite der Maus zu wischen, um die Wundstelle und die Hautoberfläche zu reinigen. Wischen Sie nicht übermäßig ab, oder es besteht die Gefahr, dass die auf der Haut vorhandenen Bakterien abgetötet werden.
Der Erfolg des chronischen Wundmodells beruht auf nicht-sterilen Bedingungen. Diese Mäuse sind nicht keimfrei und befinden sich in einem konventionellen Vivarium. Das bakterielle Mikrobiom, das sich auf der Haut befindet, ist entscheidend für die spätere Einleitung und Entwicklung chronischer Wunden bei der Behandlung mit Inhibitoren antioxidativer Enzyme.
Betrachten Sie nun, wo die Wunde. Im Idealfall verwenden Sie die dorsale Seite der Maus zentriert und weg von dunklen Flecken der Haut. Führen Sie nun die Verwundung sanieren, um in 30 bis 45 Sekunden zu kleiden.
Drücken Sie zunächst leicht einen sieben Millimeter großen Hautbiopsie-Punch auf die gewünschte Wundstelle und drehen Sie den Schlag gerade tief genug um, um einen Eindruck vom Schlag zu hinterlassen. Dann verbrauchen Sie die skizzierte Haut, indem Sie die Mitte des Stempels mit einer Pinzette hochziehen und den Umriss mit einer chirurgischen Schere entlang schneiden. Nach fertigstellung, bedecken Sie die Wunde fest mit einem halben Stück transparenten Filmverband.
Innerhalb von 10 Minuten nach der Verwundung, wenden Sie einen 60 Mikroliter Aliquot von MSA in sterilen PBS und legen Sie MSA topisch auf die Wunde. Später, sechs Stunden nach der Operation, verabreichen Sie eine weitere Tutvon Buprenorphin. Zusätzliche Dosen können bei Bedarf gegeben werden.
Chronische Wundinitiation findet in weniger als sechs Stunden statt und der Wundrand wird sichtbar von oxidativem Stress verändert. Eine chronische Wunde ist eine Wunde, die offen bleibt, im Vergleich zur ersten Wunde vergrößert und Biofilm enthält. Nach 20 Tagen ist die Wunde in voller Chronizität.
Biofilm bildende Bakterien, die die Wundstelle dominieren, sind Pseudomonas aeruginosa, Enterobacter cloacae, und verschiedene Staphylococcus und Corynebacterium Arten. Diese Bakterien sind auch in menschlichen chronischen Wunden gefunden. Nachdem Sie sich dieses Video angeschaut haben, sollten Sie ein gutes Verständnis dafür haben, wie man chronische Wunden bei Mäusen erzeugt.
Sobald Sie diese chronischen Wunden festgestellt haben, können Sie sie verwenden, um viele zelluläre molekulare Mechanismen zu untersuchen, die an der Initiierung der Wundchronik beteiligt sind.
