Normalerweise ist die Visualisierung der apikalen Vierkammeransicht nur bei 65 bis 70% der untersuchten Mäuse möglich. Der Hauptvorteil dieser Technik ist, dass die kombinierte Verwendung beider Kipppositionen diese Anforderung bei fast allen untersuchten Mäusen ermöglicht. Nachdem die Maus den entsprechenden Grad der Lichtsedierung erreicht hat, fixieren Sie die Maus auf einer beheizten Plattform und wenden Sie Elektrodengel auf die Extremitäten an, um die Herzfrequenz und Temperatur kontinuierlich zu überwachen.
Entfernen Sie das Brusthaar mit Enthaarungscreme und tragen Sie eine Schicht Ultraschall-Kupplungsgel auf die Spitze des Wandlers auf. Für eine apikale Vierkammeransicht mit der linken und kaudalen Plattformneigung, winkeln Sie die Plattform 10 bis 15 Grad nach links und 10 bis 15 Grad kaudal. Positionieren Sie den Messumformer über dem Scheitelpunkt innerhalb der Bildebene, 45 Grad zur koronalen Ebene mit der Mittelachse des Ultraschallstrahls kranially nach innen und nach links gerichtet.
Drücken Sie die B-Modus-Taste, um den B-Modus zu aktivieren, um die Bildgebung zu deaktivieren und das linke Ventricul, das linke Atrium, den rechten Ventrikel, den rechten Vorhof, die Mitralklappe und die Trikuspidalklappe am akustischen Fenster zu lokalisieren. Um sicherzustellen, dass Sie sich in der richtigen Position befinden, schieben Sie den Messumformer auf und ab entlang der Koronalebene. Manipulieren Sie die Imagine-Ebene in der koronalen Ebene und drehen Sie Die Uhr und gegen den Uhrzeigersinn um die Mittelachse, bis beide Ventrikel in ihrer längsten Dimension visualisiert sind und beide Vorhöfe sichtbar sind, um die Vierkammeransicht zu erhalten.
Drücken Sie cine store, um die Aufnahme zu speichern. Drücken Sie dann scan freeze, um das System anzuhalten. Um die transtricuspid Blutflussgeschwindigkeit zu messen, drücken Sie Scan Freeze, um das System zu aktivieren, und drücken Sie mehrmals Overlay, um das Probenvolumen für den Postwellenmodus zu aktivieren.
Mit der Vierkammer-Bildgebungsansicht positionieren Sie mit der Bahnkugel das Probenvolumen an der Öffnung der Trikuspidalventile und klicken Sie auf den Pulswellenmodus, um die Zuflussgeschwindigkeiten zu messen. Klicken Sie auf cine store, um die optimierte Aufzeichnung zu speichern, gefolgt von scan freeze, um das System anzuhalten. Um die trikuspide Ringebene systolische Exkursion zu messen, klicken Sie auf Einfrieren scannen, um das System zu aktivieren und in den B-Modus zu wechseln.
Einige Korrekturen des Bildes könnten notwendig sein, um die richtige Vier-Kammer-Ansicht wiederzuerlangen. Klicken Sie mehrmals auf Overlay, um das Probenvolumen des M-Modus zu aktivieren, und verwenden Sie den Trackball, um das Probenvolumen am seitlichen Teil des trikuspidalen Annulus auszurichten. Verwenden Sie den Trackball, um die Ränder des Probenvolumens zu ziehen, bis die gesamte Amplitude der Herzbewegung während des Herzzyklus abgedeckt ist.
Und aktivieren Sie den M-Modus. Die trikuspidalen Annulus-Bewegungen sollten als Welle angezeigt werden, klicken Sie dann auf Cine Store, um die Aufnahme zu speichern und das Einfrieren zu scannen, um das System zu anhalten. Zur Messung der Gewebedopplerparameter aktivieren Sie das System und den B-Modus.
Klicken Sie mehrmals auf Overlay, um das Probenvolumen für die Gewebedoppler-Bildgebung zu aktivieren, und verwenden Sie den Trackball, um das Probenvolumen mit dem seitlichen Teil des trikuspidalen Annulus auszurichten, so dass die rechte ventrikelfreie Wand einen Winkel mit der Trikuspidalklappe erzeugt. Ziehen Sie die Ränder der Probe, um das Probenvolumen so anzupassen, dass es die systolischen und diastolischen Extrempositionen des Annulus einschließt, und klicken Sie auf Gewebe, um den Gewebedoppler-Bildgebungsmodus zu aktivieren. Klicken Sie dann auf cine store, um die Aufzeichnung zu speichern und das Einfrieren zu scannen, um das System anzuhalten.
Das Kippen der Plattform nach links und rechts verbessert das akustische Fenster und liefert Bilder von vergleichbarer Qualität in gesunden und kranken Mausherzen im B-Modus. Nach Erhalt der richtigen Positionen liefern Messungen im M-Modus, Im Gewebedoppler-Bildgebungsmodus und im gepulsten Wellenmodus Bilder vergleichbarer Qualität mit ähnlichen diastolischen Parameterergebnissen, die entweder in der rechten Schädel- oder linken kaudalen Plattformposition in gesunden und kranken Herzen erzielt wurden. Darüber hinaus zeigt die Korrelationsanalyse eine gute Übereinstimmung zwischen den Werten, die aus diesen beiden erleichterten Positionen erzielt wurden.
Beim Versuch dieses Verfahrens ist es wichtig, sich daran zu erinnern, dass die Echokardiographie eine nicht-invasive Technik zur Beurteilung der Herzfunktion ist. Nach diesem Verfahren können Nach den physiologischen Messungen Gewebeproben entnommen werden, um zusätzliche Fragen über das morphologische Substrat oder molekulare Mechanismen der Herzfunktionsstörung zu beantworten. Diese Technik hat den Forschern auf dem Gebiet der pulmonalen Hypertonie den Weg geebnet, um die Mechanismen der rechten Ventrikelanpassung an die Drucküberlastung mit Mausmodellen der pulmonalen Hypertonie zu erforschen.
Um die produzierbaren Ergebnisse zwischen den Experimenten zu erhalten, kontrollieren Sie streng die physiologischen Parameter des Tieres wie Herzfrequenz und Körpertemperatur und halten Sie das Niveau der Anästhesie so oberflächlich wie möglich, um die Beeinflussung der Herzfunktion zu minimieren.
