Erkennung von 3-Nitrotyrosine in atmosphärischen Umgebungen über eine High-Performance Liquid Chromatography-elektrochemischen Detektor-System

Diese Methode kann helfen, Schlüsselfragen in der Umweltforschung über Nitrapyrin und 3-Nitrotyrosin zu beantworten. Der Hauptvorteil dieser Technik ist, dass es sich um eine einzigartige und hochempfindliche Methode zum Nachweis von 3-Nitrotyrosin auf Luftprobenfiltern handelt. Um scheineteilchen partikel- oder partikelmäßig mit einer Größe von weniger als sieben Mikrometern zu sammeln, wiegen Sie zunächst einen Bindemittel-3-Quarzfilter und sichern ihn an einem Luftprobennehmer mit hohem Volumen. Bedecken Sie den Filter mit einem Partikelgrößenwähler, um PM7 zu sammeln, oder lassen Sie den Filter unbedeckt, um die gesamten Schwebstoffpartikel zu sammeln. Führen Sie den Luftprobenehmer sieben Tage lang kontinuierlich mit 1000 Litern pro Minute aus. Laden Sie die Vorfilter in eine Größenklassifizierungseinheit und installieren Sie die Größenklassifizierungseinheit und einen Sicherungsfilter auf dem Luftsampler mit geringem Volumen. Führen Sie den Luftprobenehmer sieben Tage lang kontinuierlich mit 116 Würfen pro Minute aus, um PM2.5 auf dem Sicherungsfilter zu sammeln. Wenn die Probenahme abgeschlossen ist, wird das gesamte Durchflussvolumen erfasst. Wiegen Sie den Filter und berechnen Sie das Gewicht der gesammelten Partikel. Versiegeln Sie den Filter in einer Plastiktüte und lagern Sie ihn bei 30 Grad Celsius. Als nächstes 500 Mikroliter 6X unspezifischen Protease-Cocktail und Acetatpuffer vorbereiten und in eine Dalasismembran mit einem Molekulargewicht Cutoff von 5000 Daltonen legen. Tauchen Sie die gefüllte Membran in 1 L des Acetatpuffers ein und rühren Sie sie 24 bis 36 Stunden lang bei 4 Grad Celsius, indem Sie den Puffer alle 12 Stunden ersetzen, um indogenöses 3-Nitrotyrosin und Nitrit zu entfernen. Danach entfernen Sie einen Filter aus dem Gefrierschrank und lassen Sie ihn auf Raumtemperatur erwärmen, während noch in der Tasche versiegelt. Dann stanzen Bis zu fünf 6 Millimeter breite Kreise aus dem Partikelbedeckten Bereich des Filters und legen Sie die Kreise in einem 1,5 Milliliter Mikrozentrifugenrohr. Bereiten Sie 300 Mikroliter Acetatpuffer mit 50