Das übergeordnete Ziel dieser Methode ist die Visualisierung der linken vorderen absteigenden koronaren Herzkranzgefäßfunktion bei Ratten, die echokardiographien verwenden, um die koronare Strömungsreserve zu berechnen. Diese Methode bietet ein wichtiges Bewertungsinstrument für die Diagnose von mikrovaskulärer Dysfunktion in erkrankten Herzen und für die Bewertung für mögliche Behandlungen während der gesamten Studie. Obwohl sich gezeigt hat, dass die Reperfusionstherapie gefährdetes Myokard und die verbesserung der linksventrikulären Funktion rettet, können funktionelle Anomalien kleiner Herzkranzgefäße nach der Rekanalisierung der Herzkranzgefäße auftreten.
Diese Methode kann Einblick in die koronare Mikrozirkulation von Ratten sowie in andere Modelle, einschließlich Myokardinfarkt, und Druckvolumenüberlastung der linken Herzkammer geben. Vor der Pre-Ischämie-Reperfusionschirurgie Ultraschall-Bildgebung, bestätigen sie einen Mangel an Reaktion auf Zehenkneifung in einer anästhesierten Fischer 344 Ratte. Rasieren Sie die Haare von der Brust.
Tragen Sie Salbe auf die Augen des Tieres auf und legen Sie das Tier in die Rückenlage auf einer 37 bis 38 Grad Celsius eingebauten Erwärmungsplattform. Schließen Sie die 13 bis 24-Megahertz-Linearsonde an die Ultraschallmaschine an. Legen Sie die Anwendungsvoreinstellung auf die Einstellung für die Kardiale Bildgebung fest, und positionieren Sie die Sonde mithilfe des Schienensystems, um die parasternale Kurzachsenansicht zu erhalten.
Verwenden Sie den XY-Achsenmikromanipulator, um die Sonde in rostrale Richtung zu bewegen, um die Lungenarterie zu lokalisieren. Bewegen Sie die Sonde, wodurch der linke Ventrikel besser sichtbar wird. Sobald das B-Modus-Bild erfasst und Cine gespeichert wurde, klicken Sie auf Farbe Doppler und visualisieren Sie die Herzkranzgefäße in der kurzen Achse.
Die rote Farbe, wie in Echtzeit beobachtet, ist bezeichnend für die Richtung des Flusses. Nach der Visualisierung der unteren vorderen absteigenden Herzkranzgefäße im Farb-Doppler-Modus ändern Sie den Modus in die Pulswelle und suchen Sie nach dem Vorhandensein einer gelben Indikatorlinie auf der Koronararterie. Platzieren Sie die gelbe Pulswellenlinie in der Mitte der Herzkranzgefäße, wobei Sie darauf achten, dass der Winkel parallel zur Strömungsrichtung verläuft, und verwenden Sie Cine Store, um die Geschwindigkeit des ruhenden linken vorderen koronaren Flusses und der Spitzendiastole der Wellenformen zu erfassen.
Nachdem Sie die ruhende linke vordere absteigende Strömungsgeschwindigkeit erhalten haben, legen Sie einen kleinen Streifen Gaze um die Basis des Schwanzes und verwenden Sie Hämostate, um das Tourniquet zu greifen und zu verdrehen, um Druck auszuüben, wodurch sich die Vene vergrößert. Legen Sie vorsichtig eine 25-Spur-Infusions-Schmetterlingsnadel an einer 10-Milliliter-Spritze befestigt, die mit Dobutamin beladen ist, in die erweiterte Schwanzvene und stabilisieren Sie die Nadel mit Kleber und einem Stück chirurgischem Klebeband. Wenn die Infusionsleitung gesichert ist, entfernen Sie die Hämostate und Tourniquet, um den Durchfluss wiederherzustellen, und legen Sie die Spritze in eine Infusionspumpe, die 20 Mikrogramm pro Kilogramm pro Minute injiziert.
Während der Infusion, sorgfältig überwachen Sie die linke vordere absteigende Arterie Spitze und Herzfrequenz, periodisch Aufzeichnung der linken vorderen arteriellen Arterienwellenspitzen im Doppler-Modus unter den Dobutamin-induzierten Stressbedingungen. Nachdem die vorderen absteigenden koronaren Arterienspitzen und Herzfrequenz während der Herausforderung Plateau, stoppen Sie die Infusion, entfernen Sie die SchwanzVenenin Infusion gesetzt, und entfernen Sie das Tier von der Plattform. Verwenden Sie dann das Werkzeug für Spitzengeschwindigkeit, um die spitzen diastolischen Geschwindigkeiten aus den Bildern zu erhalten, und berechnen Sie den koronaren Strömungsreserveindex als Verhältnis der linken vorderen arteriendeckenden Arterienspannung diastolischen Strömungsgeschwindigkeit zum ruhenden linken vorderen vorderen arterienspitzen diastolischen Strömungsgeschwindigkeit.
Mit einer Lichtwellenleiter intubieren Sie Ratten mit einem 18-Spur IV-Katheter und schließen Sie den Katheter an ein Beatmungsgerät an. Verwenden Sie als Nächstes eine 8-0 Monofilament-Nähte, um die linke vordere absteigende Arterie durch eine 15-Millimeter-Öffnung im fünften interkostalen Raum mit einem einfachen Knoten für 30 Minuten zu ligan. Am Ende der Ischämie-Periode, visuell bestätigen Sie die Ischämie durch Verfärbung der Herzoberfläche und lösen Sie die Ligatur.
Die Reperfusion kann durch die Rötung des zuvor verfärbten Bereichs des Herzmuskels bestätigt werden. 72 Stunden nach der Operation, messen Sie den koronaren Fluss und die koronare Strömungsreserve wie gezeigt, und vergleichen Sie die Messungen mit denen vor der Verletzung erhalten. In diesem repräsentativen Experiment wurde vor der Ischämie-Reperfusionsoperation die ruhende linke vordere, absteigende koronare Arteriengeschwindigkeit mit etwa 423 Millimetern pro Sekunde gemessen, um die Geschwindigkeit nach dobutamininer Infusion zu verdoppeln.
72 Stunden nach der Ischämie-Reperfusion war die ruhende linke vordere koronare Herzkranzgefäßgeschwindigkeit deutlich höher als die ruhende linke vordere koronare Herzkranzgefäßgeschwindigkeit vor der Operation. Die Stressreaktion auf einen Dobutamintest nach der Verletzung wurde im Vergleich zur Reaktion vor den Reaktionen der Operation signifikant reduziert. Die koronare Strömungsreserve wird als Verhältnis der Spitzenströmungsgeschwindigkeit während der Spannung zur Ruheströmungsgeschwindigkeit berechnet und betrug bei jungen Ratten vor der Operation etwa 2,1, reduzierte sich aber 72 Stunden nach der Verletzung signifikant.
Darüber hinaus gab es 72 Stunden nach der Verletzung keine signifikanten Veränderungen in der systolischen Funktion des linken Ventrikels. Nach seiner Entwicklung wird diese Technik es Forschern ermöglichen, Ultraschallaufnahmen von Herzkranzgefäßen in Kleintiermodellen zu erforschen und zu verwenden, die menschliche Krankheitsbedingungen genau nachahmen. Nachdem Sie sich dieses Video angeschaut haben, sollten Sie ein sehr gutes Verständnis dafür haben, wie Sie den koronaren Blutfluss messen und die koronare Mikrozirkulation in einem Modell für kleine Herzkrankheiten bewerten können.
