BKM ist durch eine National Institute of Health (NIH) / National Heart Lung and Blood Institute (NHLBI) zu gewähren (R01-HL085487) unterstützt. MH wird von der American Heart Association National (AHA) Scientist Development Grant (SDG) und der Society of Cardiology Geriatrische unterstützt.

1. Vorbereitung des OP-Bereichs <ol><li> Die Bedienoberfläche ist zuerst von Desinfektions-Bereich mit 70% Ethanol vorbereitet. </li><li> Alle chirurgischen Instrumente werden mit einem heißen Perle Sterilisator vor der Operation (und in der einzelnen Ratte Operationen) sterilisiert werden. Zu diesen Instrumenten gehören: chirurgische Scheren (2), Pinzette (1), einer gebogenen Pinzette (1), Nadelhalter (2), und eine Truhe rectractor. </li><li> Baumwollgaze und Applikatoren sind, um Blutungen zu verwalten zur Verfügung. </li><li> Stellen Sie die Temperatur eines homeothermic Decke-System (Heizkissen), verwendet werden, um die Körpertemperatur des Tieres bei 37 aufrecht zu erhalten ± 1 ° C, um zu verhindern, einen dramatischen Rückgang der Körpertemperatur, die Größe eines Infarkts ist abhängig von die Dauer der Okklusion sowie Körpertemperatur (Tarnavski et al.). </li><li> Vor der Narkose, wird jedes Tier erhält eine Dosis von Buprenorphin (0,1-2,5 mg / kg SQ) und Carprofen oral Tabletten (Rimadyl, Bioserv Tablette; 1 Tablette) am Tag vor der Operation. In der Zeit unmittelbar vor der Operation, wird jedes Tier wieder erhalten eine Dosis von Buprenorphin (0,1-2,5 mg / kg SQ). </li><li> Hinweis: Für Studien, bei denen die Beurteilung der Herzfunktion und kardiale Remodelling über einen Zeitraum von Zeit (7 - bis 28-Tage und darüber hinaus) eine Dosierung von Buprenorphin (0,1-2,5 mg / kg SQ) verabreicht wird, alle 6 Stunden nach der Operation für 24-48 Stunden nach der Operation und Carprofen oral Tabletten zur Verfügung gestellt wird einmal täglich (siehe &quot;Post-Operative Recovery&quot;). </li></ol> 2. Vorbereitung und Intubation des Rats <ol><li> Vor der Einleitung der Narkose, die Tiere untersucht, um alle bereits vorhandenen Bedingungen, die chirurgischen Ergebnisse erschweren könnten, zu erkennen sein; körperliche Untersuchung Sichtprüfung und Messung von Herzfrequenz, Atemfrequenz und Körpertemperatur und das Körpergewicht sind. </li><li> Wenn die Tiere bestimmt sind, gesund zu sein, werden 250-300 Gramm männlichen Ratten (z. B. Sprague Dawley) zu wägen und identifizierende Merkmale werden aufgezeichnet. </li><li> Ratten sind dann mit 80 mg / kg Pentobarbital narkotisiert, das richtige Niveau der Anästhesie wird durch das Glied Rückzug Reaktion durch Druck der Ratte Nagelbett (toe-Pinch-Reflex) und in regelmäßigen Abständen während des gesamten Verfahrens überprüft. </li><li> Buprenorphin (0,1-2,5 mg / kg; SQ) wird zum Zeitpunkt der Operation verabreicht werden. </li><li> Ein elektrischer Rasierer wird dann verwendet, um das Fell bilden den Hals und Brust zu rasieren. Hinweis: Für Studien, bei denen die Beurteilung der Herzfunktion und kardiale Remodelling über einen Zeitraum von Zeit (7 - bis 28-Tage und darüber hinaus), Fell muss vollständig rasiert werden vom OP-Bereich, um die Sterilität zu erhalten. </li><li> Die rasierten Bereiche werden gewaschen werden und desinfiziert mit betadine Lösung durch Abwischen der Fläche mit 70% Alkohol, gefolgt; dieser betadine und Alkohol schrubben und Desinfektionsverfahren wird dreimal wiederholt werden. </li><li> Die narkotisierten Tier wird dann in Rückenlage auf einer homeothermic Decke-System (Heizkissen) gelegt, um die Körpertemperatur aufrecht zu erhalten. </li><li> Endotracheale Intubation wird dann, indem Sie zunächst sorgfältig Freilegung der Luftröhre durchgeführt, um die Visualisierung der Intubation zu verbessern, indem Sie einen 5 mm Mitte Hals Schnitt-und Ausfahren des Muskelgewebes, knapp oberhalb der Luftröhre. </li><li> Dies ermöglicht eine bessere Visualisierung für die Insertion des Tubus (Polyethylen Größe 90; PE 90), wo der Schlauch am Rande für eine einfache Einfahrt durch den Kehlkopf ist abgeschrägt. </li><li> Der Endotrachealtubus in die Luftröhre eingeführt, mit Visualisierung mit Hilfe eines chirurgischen Stereo-Mikroskop unterstützt, durch eine sorgfältige Manipulation der Zunge während des Betrachtens der Luftröhre und der Eingang des Endotrachealtubus. </li><li> Die mechanische Beatmung ist dann durch den Anschluss des Endotrachealtubus zu Kent Scientific Ventilator (TOPO Dual Mode) Radfahren bei 80 Atemzügen pro Minute und einem Atemzugvolumen von 1,2 ml pro 100 Gramm Körpergewicht erreicht. </li><li> Einem sterilen Tuch wird dann über die Ratte platziert, so dass nur die OP-Bereich ausgesetzt, damit Minimierung möglicher Kontamination während der Operation. </li><li> Das Tier Chirurgen und Assistenten sind Maske, Kittel und Handschuhe zu tragen; mit Handschuhen, die zwischen einzelnen Ratte Operationen verändert. </li></ol> 3. Transient linken vorderen absteigenden (LAD) Artery Ligation <ol><li> Sobald gleichmäßigen Atem festgestellt wird, wird die Brust auf der linken vierten Interkostalraum eröffnet, indem Hämostatika oder runde Ende Schere, um den Raum zu öffnen, aber ohne Schneiden des Gewebes, so dass das Risiko von Blutungen reduziert werden kann. </li><li> Eine Brust-Haken wird dann innerhalb des vierten Interkostalraum positioniert, um die Rippen verteilt, so dass die linke Herzkammer (LV) ausgesetzt ist, unter größtmöglicher Sorgfalt nicht für die Schädigung der Lunge. </li><li> Der Herzbeutel wird dann geöffnet, aber am Ort belassen, wenn möglich. </li><li> Die proximalen linken vorderen absteigenden (LAD) Arterie wird identifiziert (Abbildung-1), wobei die Verwendung von alsurgical Stereo-Mikroskop, und die LAD wird dann vorübergehend unterbunden (oder kann mit einem slipknot gebunden werden) mit 6-0 Prolene Naht für eine 30-minütige ischämischen Periode (Abbildung-1), aber ohne Entäußerung des Herzens. </li><li> Um Herz-Reperfusion, sind mikrochirurgische Schere verwendet werden, um den Knoten in der Ligatur (oder durch Lösen der slipknot), beim 6:0 durch Prolene Naht, 30-Minuten nach der Ligation der LAD gemacht geschnitten. </li><li> In sham Kontrollratten, ist das Verfahren identisch, mit Ausnahme der LAD ist nicht vorübergehend unterbunden. </li><li> Der Abfluss wird dann kurz (1-2 Sekunden) abgeschnürt auf die Maske vor Wiederöffnung der Lunge zu ermöglichen. </li><li> Die Brust-Haken wird dann entfernt und die Rippen sind zusammen mit einem 2:0-Prolene Naht mit einer unterbrochenen Naht Muster gezeichnet. </li><li> Nachdem die Rippen geschlossen sind, wird der Abfluss des Ventilators nochmals kurz (1-2 Sekunden) abgeklemmt, um die richtige Atmung zu gewährleisten. </li><li> Die Haut wird geschlossen mit 6-0 Prolene Naht mit einer fortlaufenden Naht Muster. </li></ol> 4. Die Bestätigung der erfolgreichen Ligation der LAD <ol><li> Proper Ligation der LAD wird durch die Beobachtung Blanchieren von Herzmuskelgewebe distal der Naht sowie Funktionsstörungen der vorderen Wand bestätigt werden, als während des transienten LAD Ligation beobachtet. </li><li> Reperfusion wird durch die Rückkehr der roten Farbe der Herzmuskelgewebe und die Demonstration von einer gewissen Erholung der Vorderwand Bewegung überprüft werden, als unmittelbar nach der vorübergehenden LAD Ligation beobachtet. </li><li> Hinweis: Für Studien, bei denen die Beurteilung der Herzfunktion und kardiale Remodelling über einen Zeitraum von Zeit (7 - bis 28-Tage und darüber hinaus), wird ein Echokardiogramm 24-Stunden nach LAD-Ligation durchgeführt werden, um das Ausmaß der induzierten bestimmen Myokardinfarkt. Alle Tiere mit einer linksventrikulären fraktionelle Verkürzung (LV FS) &lt;20%, wie aus einem Echokardiogramm bestimmt, sowie Vorderwand Bewegung Dysfunktion im Einklang mit dem Infarkt, werden identifiziert und für das Follow-up Herzfunktion und Umbau Studien verwendet werden. Sham Kontrollratten wird erwartet, dass eine normale LV FS zwischen 40-45% (del Monte et al) haben. </li></ol> 5. Post-Operative Wiederherstellung <ol><li> Nach der Operation abgeschlossen ist, wird das sterile Tuch über das Tier entfernt werden. Die Körpertemperatur (durch einen rektalen Thermometer), Atemfrequenz (durch Sichtprüfung), Herzfrequenz (von Herzklopfen) und abnorme Anzeichen von Schmerzen überwacht werden sollen, bis das Tier wird ambulant. </li><li> Die Ratte wird vom Ventilator entfernt werden und dann in ein Tier Käfig platziert werden und darf aus der Narkose zu erholen. In diesem Käfig, wird man Ende des Käfigs durch ein Heizkissen erwärmt werden, damit die Ratte, um Wärme zu suchen. Außerdem wird Wasser zur Verfügung stehen, um die Ratte während dieser Beobachtungsperiode. </li><li> Bei Anzeichen von Austrocknung nach der Operation beobachtet werden, wird mit 0,5 ml steriler Kochsalzlösung intraperitoneal (IP) injiziert werden. </li><li> Buprenorphin (0,1-2,5 mg / kg; SQ) wird dann unmittelbar nach der Operation und während der postoperativen Erholung verabreicht werden. </li><li> Hinweis: Für Studien, bei denen die Beurteilung der Herzfunktion und kardiale Remodelling über einen Zeitraum von Zeit (7 - bis 28-Tage und darüber hinaus) eine Dosierung von Buprenorphin (0,1-2,5 mg / kg SQ) verabreicht wird, alle 6 Stunden nach der Operation für 24-48 Stunden nach der Operation. Carprofen oral Tabletten (Rimadyl, Bioserv Tablette) werden ebenfalls zur Verfügung (1-Tablette täglich) für mindestens 48-Stunden nach der Operation. </li></ol> 6. Histologische Evaluation der Ischämie Reperfusion <ol><li> Nach Abschluss der 4-stündigen Reperfusion Zeit werden Ratten betäubt werden wieder mit 80 mg / kg Pentobarbital und die LAD ist wieder (oder die slipknot kann retied) ligiert (Huang et al und Kaiser et al). </li><li> 1 ml von 5% Evans Blue (in Phosphat-gepufferter Salzlösung) wird dann in die rechte Herzkammer injiziert und ließ 2 Minuten perfuse. </li><li> Nach 2-Minuten wird 1 ml der gesättigten Kaliumchlorid-Lösung dann in die rechte Herzkammer injiziert, um das Herz aus, was Sache ist anzuhalten. </li><li> Das Herz ist dann schnell ausgeschnitten, eingebettet in 2% Agarose-Phosphat-gepufferte Kochsalzlösung, und dann geschnitten in 1-2 mm Scheiben schneiden. </li><li> Die vitalen Myokards wird dann mit 2% Triphenyltetrazoliumchlorid (TTC) für 20-Minuten und Bildern von jeder Scheibe verschmutzt ist gefangen. Die Bilder werden dann quantifiziert, um die Menge der myokardialen Bereich identifiziert: (1), dass nicht-at-Risk (blau Abschnitte), (2) Gebiet-at-Risk (AAR, rote und weiße Abschnitte) und (3 ) Bereich, der Infarkt (white &quot;unbefleckt&quot; Einzelpläne) (Abbildung-2). </li></ol> 7. Repräsentative Ergebnisse Für Studien, bei denen die Beurteilung der Infarktgröße und der Bereich-at-Risk (AAR), gefolgt von blauen Farbstoff Evans und Triphenyltetrazoliumchlorid (TTC), nach 4-Stunden Reperfusion, kann eine ordnungsgemäße Ligation der LAD bestätigt werdendurch die Beobachtung Blanchieren von Herzmuskelgewebe distal der Naht sowie Funktionsstörungen der vorderen Wand; wie während des transienten LAD Ligation beobachtet. Reperfusion kann durch die Rückkehr der roten Farbe, um das Herzmuskelgewebe und die Demonstration von einer gewissen Erholung der Vorderwand Bewegung überprüft werden; beobachtet unmittelbar nach der vorübergehenden LAD-Ligation. Für Studien, bei denen die Beurteilung der Herzfunktion und kardiale Remodelling über einen Zeitraum von Zeit (7 - bis 28 - Tage und darüber hinaus), kann eine ordnungsgemäße Ligation der Ischämie durch Reperfusion auch durch Blanchieren des Gewebes, Funktionsstörungen der vorderen Wand bestätigt werden und die Rückkehr der roten Farbe mit einer gewissen Erholung der Wandbewegung folgenden Reperfusion. Darüber hinaus können eingeschränkter Herzfunktion durch eine Echokardiographie als 24-Stunden nach LAD-Ligation durchgeführt bestimmt werden, um das Ausmaß der induzierten Herzinfarkt zu bestimmen. Alle Tiere mit einer linksventrikulären fraktionelle Verkürzung (LV FS) &lt;20%, wie aus einem Echokardiogramm bestimmt, sowie Vorderwand Bewegung Dysfunktion im Einklang mit dem Infarkt, werden identifiziert und für das Follow-up Herzfunktion und Umbau Studien verwendet werden. Sham Kontrollratten wird erwartet, dass eine normale LV FS zwischen 40-45% (del Monte) haben. <img src="/files/ftp_upload/2464/2464fig1.jpg" alt="Abbildung 1" /> Abbildung 1. Schematische Darstellung eines Herzinfarktes und LAD-Ligation. Schematische Darstellung (1) Myokardinfarkt und (2) Ligation der linken Herzkammer anterior (LAD) Arterie mit einer Naht, verwendet, um den Herzinfarkt durch die Pest verursachte Bildung zu imitieren. <img src="/files/ftp_upload/2464/2464fig2.jpg" alt="Abbildung 2" /> Abbildung 2. Repräsentatives Bild eines Rattenherzens Nach AMI. Repräsentatives Bild der Ratte Herz zeigt den Bereich, in blau (nicht verschlossen Koronarperfusion Bereich), Bereich in rot (verschlossen Koronarperfusion Bereich zeigt den Bereich-at-Risk (AAR) für Herzinfarkt, und Fläche in weiß / gelb (Infarktzone innerhalb der AAR).

<ol>
	<li>Hunt, S. A., Baker, D. W., Chin, M. H., Cinquegrani, M. P., Feldmanmd, A. M., Francis, G. S., Ganiats, T. G., Goldstein, S., Gregoratos, G., Jessup, M. L., Noble, R. J., Packer, M., Silver, M. A., Stevenson, L. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=SC.ACC/AHA+Guidelines+for+the+Evaluation+and+Management+of+Chronic+Heart+Failure+in+the+Adult:+Executive+Summary+A+Report+of+the+American+College+of+Cardiology/American+Heart+Association+Task+Force+on+Practice+Guidelines+(Committee+to+Revise+the+1995+Guidelines+for+the+Evaluation+and+Management+of+Heart+Failure).">SC.ACC/AHA Guidelines for the Evaluation and Management of Chronic Heart Failure in the Adult: Executive Summary A Report of the American College of Cardiology/American Heart Association Task Force on Practice Guidelines (Committee to Revise the 1995 Guidelines for the Evaluation and Management of Heart Failure).</a> Circulation. 104, 2996-3007 (2001).</li><li>Goldman, S., Raya, T. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rat+infarct+model+of+myocardial+infarction+and+heart+failure.">Rat infarct model of myocardial infarction and heart failure.</a> J Card Fail. 1, 169-177 (1995).</li><li>Tarnavski, O., McMullen, J. R., Schinke, M., Nie, Q., Kong, S., &amp;amp, I. z. u. m. o., S, . <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+cardiac+surgery:+comprehensive+techniques+for+the+generation+of+mouse+models+of+human+diseases+and+their+application+for+genomic+studies.">Mouse cardiac surgery: comprehensive techniques for the generation of mouse models of human diseases and their application for genomic studies.</a> Physiol Genomics. 16, 349-360 (2004).</li><li>Thygesen, K., Alpert, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Universal+Definition+of+Myocardial+Infarction.">Universal Definition of Myocardial Infarction.</a> Circulation. 116, 2634-2653 (2007).</li><li>Vasilyev, N., Williams, T., Brennan, M. L., Unzek, S., Zhou, X., Heinecke, J. W., Spitz, D. R., Topol, E. J., Hazen, S. L., Penn, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myeloperoxidase-generated+oxidants+modulate+left+ventricular+remodeling+but+not+infarct+size+after+myocardial+infarction.">Myeloperoxidase-generated oxidants modulate left ventricular remodeling but not infarct size after myocardial infarction.</a> Circulation. 112, 2812-2820 (2005).</li><li>McConnell, B. K., Popovic, Z., Mal, N., Lee, K., Bautista, J., Forudi, F., Schwartzman, R., Jin, J. P., Penn, M., Bond, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Disruption+of+protein+kinase+A+interaction+with+A-kinase-anchoring+proteins+in+the+heart+in+vivo:+effects+on+cardiac+contractility,+protein+kinase+A+phosphorylation,+and+troponin+I+proteolysis.">Disruption of protein kinase A interaction with A-kinase-anchoring proteins in the heart in vivo: effects on cardiac contractility, protein kinase A phosphorylation, and troponin I proteolysis.</a> J Biol Chem. 284, 1583-1592 (2009).</li><li>Monte, D. e. l., Butler, F., Boecker, K., Gwathmey, W., K, J., Hajjar, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+technique+of+aortic+banding+followed+by+gene+transfer+during+hypertrophy+and+heart+failure.">Novel technique of aortic banding followed by gene transfer during hypertrophy and heart failure.</a> Physiol. Genomics. 9, 49-56 (2002).</li><li>Huang, M. H., Nguyen, V., Wu, Y., Rastogi, S., McConnell, B. K., Wijaya, C., Uretsky, B. F., Poh, K. K., Tan, H. C., Cheng, J., Perin, E., Fujise, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synergistic+Infarct+Size+Reduction+by+Combination+Therapy+with+Milrinone+and+Esmolol+at+Early+Reperfusion+during+Acute+Myocardial+Infarction.">Synergistic Infarct Size Reduction by Combination Therapy with Milrinone and Esmolol at Early Reperfusion during Acute Myocardial Infarction.</a> American Journal of Physiology. , .</li><li>Kaiser, R. A., Bueno, O. F., Lips, D. J., Doevendans, P. A., Jones, F., Kimball, T. F., Molkentin, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeted+inhibition+of+p38+mitogen-activated+protein+kinase+antagonizes+cardiac+injury+and+cell+death+following+ischemia-reperfusion+in+vivo.">Targeted inhibition of p38 mitogen-activated protein kinase antagonizes cardiac injury and cell death following ischemia-reperfusion in vivo.</a> J Biol Chem. 279, 15524-15530 (2004).</li></ol>

Ein akuter Myokardinfarkt (AMI) in Ratten, die auch als Ischämie-Reperfusion (IR) bezeichnet, wird häufig verwendet, um menschliche ventrikulären Remodeling führt zu Herzinsuffizienz zu imitieren. Die Progression der linksventrikulären Dysfunktion und Herzinsuffizienz im Tiermodell (Ratten und Mäuse) ist ähnlich wie beim Menschen, die einen MI zu erhalten, zu überleben und anschließend entwickelt Herzinsuffizienz (Goldman) beobachtet. Das beschriebene Verfahren eine Version dieser Technik und enthielt auch zus?...

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		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
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		<tbody>
		
<tr>
<td>Ventilator</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Kent Scientific</td>
<td>TOPO</td>
<td>TOPO Dual Mode</td>
</tr>
<tr>
<td>Thermostatic Circulator E103</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Harvard Apparatus</td>
<td>732802</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Homeothermic Blanket System</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Harvard Apparatus</td>
<td>55-7222F</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Stereo Microscope</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Nikon Instruments</td>
<td>MMA36300</td>
<td>SMZ-645 Zoom Stereo Microscope</td>
</tr>
<tr>
<td>Hot Bead Sterilizer</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Harvard Apparatus</td>
<td>610183</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Electric Shaver</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>General Electric</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Blades and Handles</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>WelchAllyn</td>
<td>690047-1</td>
<td>Standard (Lamp) Laryngoscope Blades</td>
</tr>
<tr>
<td>Surgical Scissors</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fine Science Tools</td>
<td>14014-17</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Surgical Scissors</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fine Science Tools</td>
<td>14072-10</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Forceps</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fine Science Tools</td>
<td>11028-15</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Curved Forceps</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fine Science Tools</td>
<td>11001-12</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Needle Holder</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fine Science Tools</td>
<td>12004-18</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Needle Holder</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fine Science Tools</td>
<td>91201-13</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Chest Retractor</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fine Science Tools</td>
<td>17008-07</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Masks</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>VWR </td>
<td>47730-640</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Gauze Sponges</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Dermacea</td>
<td>441205</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Sterile Gloves</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Cardinal Health</td>
<td>2D7203I</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>PE 90 tubing</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>BD</td>
<td>427420</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>20 ml Syringe</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>BD</td>
<td>301625</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>6-0 Prolene Suture</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>ETHICON</td>
<td>8706H</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>2-0 Silk Suture</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>ETHICON</td>
<td>K873H</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Pentobarbital Sodium Injection</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>OVATION</td>
<td>NDC 67386-501-55</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Povidone-Iodine</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>NOVAPLUS</td>
<td>V10-8204</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Buprenorphine</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Pharmaceuticals Inc.</td>
<td>NDC 12496-0757-1</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

acute myocardial infarction in rats

Mit Herzinsuffizienz führende Todesursache in den USA (Hunt), ist die biomedizinische Forschung von grundlegender Bedeutung für medizinische Behandlungen für Herz-Kreislauf-Erkrankungen vor. Tiermodelle, dass die menschliche Herzerkrankungen zu imitieren, wie Myokardinfarkt (MI) und Ischämie-Reperfusion (IR), die Herzinsuffizienz sowie Druck-Überlast (Quer-Aorten-Verengung), die Herzhypertrophie und Herzinsuffizienz (Goldman und Tarnavski) induziert induziert, sind nützliche Modelle, um Herz-Kreislauf-Erkrankung zu untersuchen. Insbesondere ist Myokardischämie (MI) eine führende Ursache für kardiovaskuläre Morbidität und Mortalität trotz Kontrolle bestimmter Risikofaktoren wie Arteriosklerose und Behandlungen über einen chirurgischen Eingriff (Thygesen). Darüber hinaus erhöht eine akute Verlust des Herzmuskels nach Myokardischämie (MI) führt zu Be-Bedingungen, die ventrikulären Remodeling des infarzierten Grenzgebiet und die Fernbedienung nicht Infarktareal induziert. Myozyten Apoptose, Nekrose und die daraus resultierende erhöhte hämodynamische Belastung Aktivierung mehrerer biochemische intrazelluläre Signalwege, die LV-Dilatation, Hypertrophie, ventrikuläre Form Verzerrung und Kollagen Narbenbildung initiiert. Dieser pathologische Umbau und Misserfolg der erhöhten Wand normalisieren betont Ergebnisse in progressive Dilatation, Rekrutierung der Grenzzone Myokard in die Narbe, und schließlich Verschlechterung myokardiale kontraktile Funktion (dh Herzinsuffizienz). Die Progression der linksventrikulären Dysfunktion und Herzinsuffizienz bei Ratten ist ähnlich wie bei Patienten, die eine große Myokardinfarkt zu erhalten, zu überleben und anschließend entwickelt Herzinsuffizienz (Goldman) beobachtet. Die akuten Myokardinfarkt (AMI) in Ratten wurde verwendet, um menschliche Herz-Kreislauf-Erkrankungen imitieren; gezielt eingesetzt, um Herz-Signalisierung Mechanismen mit Herzinsuffizienz sowie den Beitrag von therapeutischen Strategien zur Behandlung der Herzinsuffizienz zu untersuchen. Die Methode in diesem Bericht beschrieben wird, die Ratten-Modell der akuten Myokardinfarkt (AMI). Was durch eine akute 30-minütigen Ischämie durch Ligation der linken vorderen absteigenden Arterie (LAD) durch Reperfusion des Gewebes gefolgt induziert; Dieses Modell ist auch als eine akute ischämische Kardiomyopathie oder Ischämie durch Reperfusion (IR), gefolgt bezeichnet Loslassen der LAD-Ligation (Wassiljew und McConnell). Zusätzliche Bemerkungen zur Auswertung der Herzfunktion und Umbau durch Änderung; Dieses Protokoll wird zur Beurteilung der Infarktgröße und der Bereich-at-Risk (AAR) durch blaue Farbstoff Evans und Triphenyltetrazoliumchlorid (TTC) nach 4-Stunden Reperfusion Fokus die Dauer der Reperfusion, wird ebenfalls vorgestellt. Insgesamt ist dies AMI Ratte Tiermodell für die Untersuchung der Folge eines Herzinfarktes auf die kardiale pathophysiologischen und physiologischen Funktion.

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Acute Myocardial Infarction in Rats

Das Rattenmodell der akuten Myokardinfarkt (AMI) ist nützlich, um die Folge eines MI auf die kardiale pathophysiologischen und physiologischen Funktion zu untersuchen.

Akuter Myokardinfarkt bei Ratten

With heart failure leading the cause of death in the USA (Hunt), biomedical research is fundamental to advance medical treatments for cardiovascular ...

Research

JoVE Journal

Medicine

52.6K Aufrufe.  University of Texas Medical Branch. Das Rattenmodell der akuten Myokardinfarkt (AMI) ist nützlich, um die Folge eines MI auf die kardiale pathophysiologischen und physiologischen Funktion zu untersuchen.

Serie: Acute Myocardial Infarction in Rats

Induction of Myocardial Infarction in Adult Zebrafish Using Cryoinjury

The mammalian heart is incapable of significant regeneration following an acute injury such as myocardial infarction1. By contrast, urodele amphibians and teleost fish retain a remarkable capacity for cardiac regeneration with little or no scarring throughout life2,3. It is not known why only some non-mammalian vertebrates can recreate a complete organ from remnant tissues4,5. To understand the molecular and cellular differences between regenerative responses in different species, we need to use similar approaches for inducing acute injuries.
In mammals, the most frequently used model to study cardiac repair has been acute ischemia after a ligation of the coronary artery or tissue destruction after cryoinjury6,7. The cardiac regeneration in newts and zebrafish has been predominantly studied after a partial resection of the ventricular apex2,3. Recently, several groups have established the cryoinjury technique in adult zebrafish8-10. This method has a great potential because it allows a comparative discussion of the results obtained from the mammalian and non-mammalian species.
Here, we present a method to induce a reproducible disc-shaped infarct of the zebrafish ventricle by cryoinjury. This injury model is based on rapid freezing-thawing tissue, which results in massive cell death of about 20% of cardiomyocytes of the ventricular wall. First, a small incision was made through the chest with iridectomy scissors to access the heart. The ventricular wall was directly frozen by applying for 23-25 seconds a stainless steel cryoprobe precooled in liquid nitrogen. To stop the freezing of the heart, fish water at room temperature was dropped on the tip of the cryoprobe. The procedure is well tolerated by animals, with a survival rate of 95%.
To characterize the regenerative process, the hearts were collected and fixed at different days after cryoinjury. Subsequently, the specimen were embedded for cryosectioning. The slides with sections were processed for histological analysis, in situ hybridization and immunofluorescence. This undertaking enhances our understanding of the factors that are required for the regenerative plasticity in the zebrafish, and provide new insights into the machinery of cardiac regeneration. A conceptual and molecular understanding of heart regeneration in zebrafish will impact both developmental biology and regenerative medicine.

Zebrafish represents a valuable model to study the mechanisms of heart regeneration in vertebrates. Here, we present a protocol for induction of a heart infarct in adult zebrafish using cryoinjury. This method results in massive cell death within 20% of the ventricular wall, similar to that observed in mammalian infarcts.

Induktion eines Myokardinfarktes in Adult Zebrafisch Mit Cryoinjury

The mammalian heart is incapable of significant regeneration following an acute injury such as myocardial infarction1. By contrast, urodele amphibians and ...

Forschung

Medizin

MRI and PET in Mouse Models of Myocardial Infarction

Myocardial infarction is one of the leading causes of death in the Western world. The similarity of the mouse heart to the human heart has made it an ideal model for testing novel therapeutic strategies.
In vivo magnetic resonance imaging (MRI) gives excellent views of the heart noninvasively with clear anatomical detail, which can be used for accurate functional assessment. Contrast agents can provide basic measures of tissue viability but these are nonspecific. Positron emission tomography (PET) is a complementary technique that is highly specific for molecular imaging, but lacks the anatomical detail of MRI. Used together, these techniques offer a sensitive, specific and quantitative tool for the assessment of the heart in disease and recovery following treatment.
In this paper we explain how these methods are carried out in mouse models of acute myocardial infarction. The procedures described here were designed for the assessment of putative protective drug treatments. We used MRI to measure systolic function and infarct size with late gadolinium enhancement, and PET with fluorodeoxyglucose (FDG) to assess metabolic function in the infarcted region. The paper focuses on practical aspects such as slice planning, accurate gating, drug delivery, segmentation of images, and multimodal coregistration. The methods presented here achieve good repeatability and accuracy maintaining a high throughput.

We describe how to perform MRI and PET imaging of the mouse heart. The protocol is tailored to assess treatment efficacy in models of myocardial infarction and heart failure.

Myocardial infarction is one of the leading causes of death in the Western world. The similarity of the mouse heart to the human heart has made it an ...

Myocardial Infarction and Functional Outcome Assessment in Pigs

Introduction of newly discovered cardiovascular therapeutics into first-in-man trials depends on a strictly regulated ethical and legal roadmap. One important prerequisite is a good understanding of all safety and efficacy aspects obtained in a large animal model that validly reflect the human scenario of myocardial infarction (MI). Pigs are widely used in this regard since their cardiac size, hemodynamics, and coronary anatomy are close to that of humans. Here, we present an effective protocol for using the porcine MI model using a closed-chest coronary balloon occlusion of the left anterior descending artery (LAD), followed by reperfusion. This approach is based on 90 min of myocardial ischemia, inducing large left ventricle infarction of the anterior, septal and inferoseptal walls. Furthermore, we present protocols for various measures of outcome that provide a wide range of information on the heart, such as cardiac systolic and diastolic function, hemodynamics, coronary flow velocity, microvascular resistance, and infarct size. This protocol can be easily tailored to meet study specific requirements for the validation of novel cardioregenerative biologics at different stages (i.e. directly after the acute ischemic insult, in the subacute setting or even in the chronic MI once scar formation has been completed). This model therefore provides a useful translational tool to study MI, subsequent adverse remodeling, and the potential of novel cardioregenerative agents.

This protocol describes the porcine myocardial infarction (MI) model using a 90 min closed-chest coronary balloon occlusion of the left anterior descending artery (LAD), followed by reperfusion. Furthermore, the protocol for several outcome parameters, such as cardiac function, hemodynamics, microvascular resistance, and infarct size, are also presented.

Myokardinfarkt und Functional Outcome Assessment in Schweine

Introduction of newly discovered cardiovascular therapeutics into first-in-man trials depends on a strictly regulated ethical and legal roadmap. One ...

Minimal Invasive Surgical Procedure of Inducing Myocardial Infarction in Mice

Myocardial infarction still remains the main cause of death in western countries, despite considerable progress in the stent development area in the last decades. For clarification of the underlying mechanisms and the development of new therapeutic strategies, the availability of valid animal models are mandatory. Since we need new insights into pathomechanisms of cardiovascular diseases under in vivo conditions to combat myocardial infarction, the validity of the animal model is a crucial aspect. However, protection of animals are highly relevant in this context. Therefore, we establish a minimally invasive and simple model of myocardial infarction in mice, which assures a high reproducibility and survival rate of animals. Thus, this models fulfils the requirements of the 3R principle (Replacement, Refinement and Reduction) for animal experiments and assure the scientific information needed for further developing of therapeutical strategies for cardiovascular diseases.

A highly reproducible model for myocardial infarction in mice with minimal invasive manipulations is described. The model can be easily performed, resulting in a high reproducibility and survival rate. Thus, the described model will reduce the number of required animals as requested by the 3R principle (Replacement, Refinement and Reduction).

Minimal-invasive chirurgische Verfahren zur Induktion Myokardinfarkt in Mice

Myocardial infarction still remains the main cause of death in western countries, despite considerable progress in the stent development area in the last ...

Primary Outcome Assessment in a Pig Model of Acute Myocardial Infarction

Mortality after acute myocardial infarction remains substantial and is associated with significant morbidity, like heart failure. Novel therapeutics are therefore required to confine cardiac damage, promote survival and reduce the disease burden of heart failure. Large animal experiments are an essential part in the translational process from experimental to clinical therapies. To optimize clinical translation, robust and representative outcome measures are mandatory. The present manuscript aims to address this need by describing the assessment of three clinically relevant outcome modalities in a pig acute myocardial infarction (AMI) model: infarct size in relation to area at risk (IS/AAR) staining, 3-dimensional transesophageal echocardiography (TEE) and admittance-based pressure-volume (PV) loops. Infarct size is the main determinant driving the transition from AMI to heart failure and can be quantified by IS/AAR staining. Echocardiography is a reliable and robust tool in the assessment of global and regional cardiac function in clinical cardiology. Here, a method for three-dimensional transesophageal echocardiography (3D-TEE) in pigs is provided. Extensive insight into cardiac performance can be obtained by admittance-based pressure-volume (PV) loops, including intrinsic parameters of myocardial function that are pre- and afterload independent. Combined with a clinically feasible experimental study protocol, these outcome measures provide researchers with essential information to determine whether novel therapeutic strategies could yield promising targets for future testing in clinical studies.

Reliable and accurate outcome assessment is the key for translation of preclinical therapies into clinical treatment. The current paper describes how to assess three clinically relevant primary outcome parameters of cardiac performance and damage in a pig acute myocardial infarction model.

Primärer Ergebnisbeurteilung in einem Schwein Modell eines akuten Myokardinfarkts

Mortality after acute myocardial infarction remains substantial and is associated with significant morbidity, like heart failure. Novel therapeutics are ...

Myocardial Infarction in Neonatal Mice, A Model of Cardiac Regeneration

Myocardial infarction induced by coronary artery ligation has been used in many animal models as a tool to study the mechanisms of cardiac repair and regeneration, and to define new targets for therapeutics. For decades, models of complete heart regeneration existed in amphibians and fish, but a mammalian counterpart was not available. The recent discovery of a postnatal window during which mice possess regenerative capabilities has led to the establishment of a mammalian model of cardiac regeneration. A surgical model of mammalian cardiac regeneration in the neonatal mouse is presented herein. Briefly, postnatal day 1 (P1) mice are anesthetized by isoflurane and placed on an ice pad to induce hypothermia. After the chest is opened, and the left anterior descending coronary artery (LAD) is visualized, a suture is placed around the LAD to inflict myocardial ischemia in the left ventricle. The surgical procedure takes 10-15 min. Visualizing the coronary artery is crucial for accurate suture placement and reproducibility. Myocardial infarction and cardiac dysfunction are confirmed by triphenyl-tetrazolium chloride (TTC) staining and echocardiography, respectively. Complete regeneration 21 days post myocardial infarction is verified by histology. This protocol can be used to as a tool to elucidate mechanisms of mammalian cardiac regeneration after myocardial infarction.

This protocol describes a highly reproducible model of cardiac regeneration by surgical induction of myocardial infarction in the left ventricle of postnatal day 1 mice. The method involves induction of hypothermic anesthesia and ligation of the left anterior descending coronary artery.

Myokardinfarkts bei neugeborenen Mäusen, ein Modell von Cardiac Regeneration

Myocardial infarction induced by coronary artery ligation has been used in many animal models as a tool to study the mechanisms of cardiac repair and ...

Real-time Pressure-volume Analysis of Acute Myocardial Infarction in Mice

Acute myocardial infarction can lead to acute heart failure and cardiogenic shock. The evaluation of hemodynamics is critical for the evaluation of any potential therapeutic approach directed against acute left ventricular (LV) dysfunction. Current imaging modalities (e.g., echocardiography and magnetic resonance imaging) have several limitations since data on LV pressure cannot directly be measured. LV catheterization in mice undergoing coronary artery occlusion could serve as a novel method for a real-time evaluation of LV function.
At the beginning of the procedure, mice were anesthetized followed by endotracheal intubation. For LV catheterization, the right carotid artery was exposed via middle-neck incision. The catheter was introduced and placed into the LV cavity. Left thoracotomy was conducted and the left main coronary artery (LCA) was ligated. To induce reperfusion, the suture was released after 45 min. Pressure-volume data was recorded at all times.
Ligation of the LCA caused a decrease in LV systolic function as evidenced by a 30% reduction in stroke volume, LV ejection fraction (EF), and cardiac output. Maximum dP/dt as a parameter for LV contractility was also significantly reduced and diastolic function was severely impaired (minimum dP/dt -40%). Reperfusion over a period of 20 min did not lead to a complete recovery of LV function.
Real-time pressure-volume analysis served as a valid procedure for monitoring cardiac function during acute myocardial infarction in mice. Maintaining stable anesthesia and a standardized surgical approach was crucial to ensure valid results. As the early phase of acute myocardial infarction is critical for morbidity and mortality, the delineated method could be beneficial for preclinical evaluation of new strategies for cardioprotection.

Acute myocardial infarction in mice induces acute but incompletely characterized changes in left ventricular (LV) function. LV catheterization in mice undergoing coronary artery occlusion serves as a novel method for a real-time evaluation of LV function.

Echtzeit-Druck-Volumen-Analyse eines akuten Myokardinfarkts bei Mäusen

Acute myocardial infarction can lead to acute heart failure and cardiogenic shock. The evaluation of hemodynamics is critical for the evaluation of any ...

Digital PCR for Quantifying Circulating MicroRNAs in Acute Myocardial Infarction and Cardiovascular Disease

Circulating serum microRNAs (miRNAs) have shown promise as biomarkers for the cardiovascular disease and acute myocardial infarction (AMI), being released from the cardiovascular cells into the circulation. Circulating miRNAs are highly stable and can be quantified. The quantitative expression of specific miRNAs can be linked to the pathology, and some miRNAs show high tissue and disease specificity. Finding novel biomarkers for cardiovascular diseases is of importance for medical research. Quite recently, digital polymerase chain reaction (dPCR) has been invented. dPCR, combined with fluorescent hydrolysis probes, enables specific direct absolute quantification. dPCR exhibits superior technical qualities, including a low variability, high linearity, and high sensitivity compared to the quantitative polymerase chain reaction (qPCR). Thus, dPCR is a more accurate and reproducible method for directly quantifying miRNAs, particularly for the use in large multi-center cardiovascular clinical trials. In this publication, we describe how to effectively perform digital PCR in order to assess the absolute copy number in serum samples.

Circulating microRNAs have shown promise as biomarkers for cardiovascular diseases and acute myocardial infarctions. In this study, we describe a protocol for miRNA extraction, reverse transcription, and digital PCR for the absolute quantification of miRNAs in the serum of patients with cardiovascular disease.

Digitale PCR zur Quantifizierung der zirkulierenden MicroRNAs in akuten Myokardinfarkt und kardiovaskulären Erkrankungen

Circulating serum microRNAs (miRNAs) have shown promise as biomarkers for the cardiovascular disease and acute myocardial infarction (AMI), being released ...

A Cryoinjury Model to Study Myocardial Infarction in the Mouse

The use of animal models is essential for developing new therapeutic strategies for acute coronary syndrome and its complications. In this article, we demonstrate a murine cryoinjury infarct model that generates precise infarct sizes with high reproducibility and replicability. In brief, after intubation and sternotomy of the animal, the heart is lifted from the thorax. The probe of a handheld liquid nitrogen delivery system is applied onto the myocardial wall to induce cryoinjury. Impaired ventricular function and electrical conduction can be monitored with echocardiography or optical mapping. Transmural myocardial remodeling of the infarcted area is characterized by collagen deposition and loss of cardiomyocytes. Compared to other models (e.g., LAD-ligation), this model utilizes a handheld liquid nitrogen delivery system to generate more uniform infarct sizes.

This article demonstrates a model to study cardiac remodeling after myocardial cryoinjury in mice.

Ein Cryoinjury-Modell zur Untersuchung des Myokardinfarkts in der Maus

The use of animal models is essential for developing new therapeutic strategies for acute coronary syndrome and its complications. In this article, we ...

Semi-Minimal Invasive Method to Induce Myocardial Infarction in Rats and the Assessment of Cardiac Function by an Isolated Working Heart System

Myocardial infarction (MI) remains the main contributor to morbidity and mortality worldwide. Therefore, research on this topic is mandatory. An easily and highly reproducible MI induction procedure is required to obtain further insight and better understanding of the underlying pathological changes. This procedure can also be used to evaluate the effects or potency of new and promising treatments (as drugs or interventions) in acute MI, subsequent remodeling and heart failure (HF). After intubation and pre-operative preparation of the animal, an anesthetic protocol with isoflurane was performed, and the surgical procedure was conducted&#160;quickly. Using a minimally invasive approach, the left anterior descending artery (LAD) was located and occluded by a ligature. The occlusion can be performed acutely for subsequent reperfusion (ischemia/reperfusion injury). Alternatively, the vessel can be ligated permanently to investigate the development of chronic MI, remodeling or HF. Despite common pitfalls, the drop-out rates are minimal. Various treatments such as remote ischemic conditioning can be examined for their cardioprotective potential pre-, peri- and post-operatively. The post-operative recovery was quick as the anesthesia was precisely controlled and the duration of the operation was short. Post-operative analgesia was administered for three days. The minimally invasive procedure reduces the risk of infection and inflammation. Furthermore, it facilitates rapid recovery. The &#8220;working heart&#8221; measurements were performed ex vivo and enabled precise control of preload, afterload and flow. This procedure requires specific equipment and training for adequate performance. This manuscript provides a detailed step-by-step introduction for conducting these measurements.

This article presents an efficient method to perform myocardial ischemia and subsequent chronic reperfusion in rats using a minimally invasive approach. In addition, left ventricular hemodynamic function of rats is assessed by echocardiography and isolated working heart methods.&#160;

Semi-Minimal Invasive Methode zur Induzieren von Myokardinfarkt bei Ratten und der Beurteilung der Herzfunktion durch ein isoliertes funktionierendes Herzsystem

Myocardial infarction (MI) remains the main contributor to morbidity and mortality worldwide. Therefore, research on this topic is mandatory. An easily ...