Generierung einer Leber orthotopischen Human Enuveal Melanom Xenograft Plattform bei immundefizienten Mäusen

Die meisten patientenabgeleiteten Tumortiermodelle werden subkutan implantiert, was die Bewertung wichtiger Merkmale von Tumoren und der Wirksamkeit des Arzneimittels verhindert. Die Unterbringung der implantierten Tumoren in der Leber erleichterte diese Analyse, ohne dass das Risiko zu großer Abweichungen innerhalb der Leber bestand. Vor Beginn des Verfahrens alle Materialien und Instrumente mit 70% Ethylalkohol besprühen.

Bestätigen Sie einen Mangel an Reaktion auf Zehenstich im anästhesierten Tier. Legen Sie die Maus in die Supine-Position auf einem Heizkissen und befeuchten Sie das Fell mit zusätzlichem 70%ethylalkohol. Verteilen Sie das Fell, um die Haut unter dem linken subcostalbereich zu visualisieren.

Entfernen Sie das Haar, und wenden Sie Jod auf, um in die Haut absorbiert werden. Legen Sie einen sterilen chirurgischen Vorhang mit einem Zwei-Zentimeter-Loch über die Maus, und verwenden Sie gekrümmte ultra feine Zange, um die Bauchhaut zu heben. Machen Sie einen ein Zentimeter quer linken subcostalen Schnitt in die Zelthaut, und legen Sie gekrümmte Scherenspitzen in den Schnitt, um das Peritoneum von der Haut zu trennen.

Ziehen Sie die Schere zurück, ohne die Klingen zu öffnen, und lokalisieren Sie die Leber unter dem Peritoneum durch ihre dunkelrötliche Farbe. Verwenden Sie die gekrümmte Schere, um einen ein Zentimeter Querschnitt im Peritoneum zu machen. Mit der anderen Hand, legen Sie die Kante eines Wattestäbchen unter dem linken Leberlappen, und rollen Sie den Tupfer nach unten, um die Leber zu schieben.

Heben Sie den Tupfer an, um die Leber auf ein vlieses, saugfähiges Stoffblech zu übertragen. Mit einer sterilen Skalpellklinge der Nummer 11 parallel zur Oberfläche drücken Sie die Klinge horizontal in die Leber, um einen fünf Millimeter tiefen und fünf Millimeter breiten Schnitt im Parenchym zu machen, während Sie die Einschnittstelle mit einem Wattestäbchen sanft drücken. Rollen Sie den Wattestäbchen nach oben, um die Einschnittstelle zu öffnen.

Verwenden Sie gekrümmte ultrafeine Zangen, um einen Ein-Millimeter-Würfel mit Tumorgewebe in die Tasche zu implantieren. Ziehen Sie die Zange ein, während Sie den Wattestäbchen in umgekehrter Richtung rollen, während Sie nach unten drücken, und entfernen Sie den Tupfer. Legen Sie sofort ein resorbierbares Hämostat auf die Einschnittstelle und bestätigen Sie die Hämostase.

Als nächstes verwenden stumpfe zange, um die Leber aus dem Stoffblatt zu schälen, und die Leber in die Bauchhöhle zurück. Schließen Sie dann das Peritoneum mit einer 5-0 resorbierbaren Naht und einer doppelten Ligatur, und schließen Sie die Haut mit einer 5-0 resorbierbaren Naht und einer dreifachen Ligatur. Der Xenograft-Tumor engraft als Einsamer Tumor ohne Tochterknötchen in die Leber.

Chirurgische orthotopische Injektion in die Leber mit Mikronadeln kann zu einer erfolgreichen Engraftmentierung eines Clusters von kultivierten menschlichen Leber metastasierenden uvealen Melanomzellen in der Leber führen. Mit diesem orthotopischen Tumormodell der Leber kann die Wirksamkeit der direkt in die Leber injizierten Medikamente mit ähnlichen erwarteten Ergebnissen wie bei klinischen Patienten getestet werden.