Point-of-Care CRISPR-basierte Diagnostik mit vorgemischten und gefriergetrockneten Reagenzien

Wir entwickeln Point-of-Care-Tests zum Nachweis dieses Materials von Infektionskrankheiten. Dieser Test verwendet isotherme Nukleinsäureamplifikation und CRISPR-basierte Detektion. Mit einer hochosmotischen Genauigkeit, ähnlich wie bei der PCR, können sie kleine Sequenzunterschiede einschließlich Einzelnukleotidpolymorphismen nachweisen und können Vielfache sein.

CRISPR, die osmotischen Reaktionen, bestehen aus mehreren Komponenten und Schritten und sind am Point-of-Care nur schwer durchzuführen. Da die Osmotika auf CRISPR basieren und hochempfindlich sind, besteht die Gefahr einer Verschleppungskontamination, die zu falschen Ergebnissen führen kann. Glücklicherweise kann dieses Problem gemildert werden, wenn wir die Abläufe der Reaktionen vereinfachen.

Wir bieten eine einfach zu bedienende Methode zum Nachweis unserer Krankheitserreger und genetischen Marker mittels Rekombinase, isothermer Amplifikation und CRISPR-basierter Reagenzien. Diese Reagenzien sind einfach zu lagern und zu verwenden. Wir bieten auch Tipps zur Behebung häufiger Probleme bei der Verwendung dieser Methoden und Reagenzien, um ihnen die Verwendung zu erleichtern.

Das Protokoll verwendet hier CRISPR-Reagenzien, die den Transport und die Lagerung erleichtern. Die gefriergetrockneten Reagenzien können an den Einsatzorten leicht rehydriert werden und behalten eine hohe Amplifikations- und Nachweiseffizienz bei. Wir hoffen, CRISPR-Diagnosetechnologien zur Erkennung endemischer und neu auftretender Infektionskrankheiten einsetzen zu können.

Wenn dieser Test routinemäßig und korrekt am Point-of-Care durchgeführt werden kann, könnte dies über antivirale und antibiotische Behandlungsoptionen informieren, möglicherweise Leben retten, den übermäßigen Gebrauch von Medikamenten und die Entwicklung von Resistenzen reduzieren.