Diagnostica point-of-care basata su CRISPR con reagenti premiscelati e liofilizzati

Sviluppiamo test point-of-care per rilevare questi materiali di malattie infettive. Questo test utilizza l'amplificazione isotermica dell'acido nucleico e il rilevamento basato su CRISPR. Con un'elevata precisione osmotica simile alla PCR, possono rilevare piccole differenze di sequenza, tra cui il polimorfismo a singolo nucleotide, e possono essere multipli.

CRISPR, le reazioni osmotiche contengono più componenti e passaggi e sono difficili da eseguire presso il punto di cura. Poiché gli osmotici sono altamente sensibili, c'è il rischio di contaminazione da carryover che può portare a risultati falsi. Fortunatamente, questo problema può essere mitigato se semplifichiamo le procedure delle reazioni.

Offriamo un metodo facile da usare per rilevare i nostri patogeni patogeni e marcatori genetici utilizzando l'amplificazione isotermica della ricombinasi e i reagenti basati su CRISPR. Questi reagenti sono semplici da conservare e utilizzare. Offriamo anche suggerimenti per risolvere i problemi comuni durante l'utilizzo di questi metodi e reagenti, facilitando l'uso da parte delle persone.

Il protocollo utilizza i reagenti CRISPR, che facilitano il trasporto e lo stoccaggio. I reagenti liofilizzati possono essere facilmente reidratati nei punti di utilizzo e mantengono un'elevata efficienza di amplificazione e rilevamento. Speriamo di applicare le tecnologie diagnostiche CRISPR per rilevare malattie infettive endemiche ed emergenti.

Se questo test può essere eseguito di routine e correttamente presso il punto di cura, ciò potrebbe informare le opzioni di trattamento antivirale e antibiotico, potenzialmente salvare vite umane, ridurre l'uso eccessivo di farmaci e lo sviluppo di resistenza.