Die Arbeit wurde von DK065872 (ENP), eine Smith Family Foundation Award of Excellence in Biomedical Research (ENP), F31 DA023760 (BMG, ENP) und P30 NS047243 (Tufts Center for Neuroscience Research) unterstützt.

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	<li>Geiger, B. M., Behr, G. G., Frank, L., Caldera-Siu, A. D., Beinfeld, M. C., Kokkotou, E. G., Pothos, E. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evidence+for+defective+mesolimbic+dopamine+exocytosis+in+obesity-prone+rats.">Evidence for defective mesolimbic dopamine exocytosis in obesity-prone rats.</a> FASEB Journal. 8, 2740-2746 (2008).</li><li>Pothos, E. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulation+of+dopamine+quantal+size+in+midbrain+and+hippocampal+neurons.">Regulation of dopamine quantal size in midbrain and hippocampal neurons.</a> Behavioural Brain Research. 130, 203-207 (2002).</li><li>Pothos, E. N., Larsen, K. E., Setlik, W., Gershon, M. D., Krantz, D., Liu, Y. -. J., Edwards, R. H., Sulzer, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synaptic+vesicle+transporter+expression+regulates+vesicle+phenotype+and+quantal+size.">Synaptic vesicle transporter expression regulates vesicle phenotype and quantal size.</a> The Journal of Neuroscience. 20, 7297-7306 (2000).</li><li>Pothos, E. N., Davila, V., Sulzer, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Presynaptic+recording+of+quanta+from+midbrain+dopamine+neurons+and+modulation+of+the+quantal+size.">Presynaptic recording of quanta from midbrain dopamine neurons and modulation of the quantal size.</a> The Journal of Neuroscience. 18, 4106-4118 (1998).</li><li>Sulzer, D., Pothos, E. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Presynaptic+mechanisms+that+regulate+quantal+size.">Presynaptic mechanisms that regulate quantal size.</a> Reviews in the Neurosciences. 11, 159-212 (2000).</li></ol>

Die hier beschriebenen Methoden ermöglichen feine Auflösung von morphologischen und neurochemischen Merkmalen der zentralen Dopamin-Neuronen, die sonst nicht in einen systemischen oder in vivo-Ansatz zur Verfügung.

Die Materialien werden in das Protokoll Text enthalten.

primary dissociated midbrain dopamine cell cultures from rodent neonates

Die Fähigkeit zur primären Zellkulturen von Dopamin-Neuronen erstellen können für die Untersuchung der präsynaptischen Eigenschaften des Dopamin-Neuronen isoliert von systemischen Eingabe von anderswo im Gehirn. In unserem Labor verwenden wir diese Neuronen zu Dopamin Freisetzungskinetik mit Kohlefaser Amperometrie sowie Expression von Dopamin-Genen und Proteinen mittels quantitativer PCR und Immunzytochemie beurteilen. In diesem Video zeigen wir Ihnen, wie wir diesen Kulturen zu generieren von Nagetier Neugeborenen. Der Prozess umfasst mehrere Schritte, einschließlich der Beschichtung von kortikalen Gliazellen Astrozyten, die Konditionierung der neuronalen Zellkultur-Medien von den Gliazellen Substrat, das Sezieren des Mittelhirns bei Neugeborenen, die Aufschluss, Extraktion und Abscheidung von Dopamin-Neuronen und die Zugabe von neurotrophen Faktoren zu sicherzustellen, das Überleben der Zelle. Die Anwendungen für ein solches Präparat enthalten Elektrophysiologie, Immunzytochemie, quantitative PCR, Video-Mikroskopie (dh in Echtzeit vesikulären Fusion mit der Plasmamembran), die Lebensfähigkeit der Zellen Assays und andere toxikologische Bildschirme.

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Primary Dissociated Midbrain Dopamine Cell Cultures from Rodent Neonates

Primäre dissoziiert Mittelhirn Dopamin Zellkulturen erlauben die Untersuchung der präsynaptischen Eigenschaften des Dopamin-Neuronen. Sie können verwendet werden, um Echtzeit-Freisetzung von Dopamin Kinetik und Protein / mRNA-Spiegel von Regulatoren der Dopamin-Exozytose zu überwachen. Hier zeigen wir Ihnen, wie Sie diese Kulturen von Nagetier Neugeborenen zu generieren.

Primäre Dissoziierte Mittelhirn Dopamin Zellkulturen aus Nager Neugeborene

The ability to create primary cell cultures of dopamine neurons allows for the study of the presynaptic characteristics of dopamine neurons in isolation ...

primary-dissociated-midbrain-dopamine-cell-cultures-from-rodent

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Biology

14.8K Aufrufe.  Tufts University. Primäre dissoziiert Mittelhirn Dopamin Zellkulturen erlauben die Untersuchung der präsynaptischen Eigenschaften des Dopamin-Neuronen. Sie können verwendet werden, um Echtzeit-Freisetzung von Dopamin Kinetik und Protein / mRNA-Spiegel von Regulatoren der Dopamin-Exozytose zu überwachen. Hier zeigen wir Ihnen, wie Sie diese Kulturen von Nagetier Neugeborenen zu generieren.