Uso de dispersión múltiple de luz para examinar la estabilidad de Phyllanthus emblica L. Extractos obtenidos con diferentes métodos de extracción

Resumen

Aquí, presentamos un método de evaluación de estabilidad basado en tecnología de dispersión de luz múltiple para evaluar la estabilidad de los extractos de medicina tradicional china.

Resumen

El intermedio de extracción de la medicina tradicional china es el intermediario clave en el proceso de preparación, y su estabilidad tiene un impacto importante en la eficacia y calidad del producto final. Sin embargo, los métodos de evaluación de estabilidad existentes a menudo requieren mucho tiempo y mano de obra, lo que requiere observación a largo plazo y la operación de equipos complejos (como la cromatografía líquida de alto rendimiento), y es difícil obtener más información física sobre la inestabilidad del sistema. Por lo tanto, existe una necesidad urgente de establecer una tecnología de análisis de estabilidad rápida y precisa para la medicina tradicional china. La dispersión múltiple de luz es un método analítico de vanguardia que puede evaluar con precisión y rapidez la estabilidad de las medicinas tradicionales chinas de una manera respetuosa con el medio ambiente sin cambiar la naturaleza o el estado de la muestra o usar reactivos orgánicos.

En este trabajo, utilizando los datos de escaneo precisos de la dispersión de luz múltiple, el protocolo actual adquirió rápidamente las curvas de variación para el grosor de la capa, la velocidad de migración de partículas y el tamaño promedio de las partículas a lo largo del tiempo. Esto permitió la identificación precisa del mecanismo y las características cruciales que causan la inestabilidad del sistema en sus primeras etapas. Cabe destacar que el período de investigación para el proceso de extracción puede acortarse considerablemente mediante la cuantificación detallada de la estabilidad del sistema, que también permite un análisis rápido, preciso y profundo de los efectos de varios procesos de extracción en la estabilidad de Phyllanthus emblica L.

Introducción

En la fabricación de la medicina tradicional china (MTC), la estabilidad de los intermedios de extracción de la MTC y las preparaciones líquidas relacionadas siempre ha sido el foco de la inspección¹. La eficacia clínica de los medicamentos, especialmente con polifenoles como ingrediente activo primario, sufre debido a importantes problemas de estabilidad ^2,3. El líquido oral Sanajon y el líquido oral Nuodikang son ejemplos de casos típicos de este problema⁴. Por lo tanto, es crucial aprender a utilizar herramientas eficientes para evaluar y optimizar de forma rápida y precisa la estabilidad de los intermedios líquidos en el proceso de producción de MTC. Se cree que Phyllanthus emblica L. (PE), una planta medicinal muy extendida en el sudeste asiático, tiene buenas propiedades antioxidantes⁵, así como acciones antiinflamatorias⁶, antibacterianas⁷ y antitumorales⁸. Durante el procedimiento de extracción térmica, los taninos en PE se transforman violentamente⁹. Bajo catálisis a altas temperaturas, estos taninos se hidrolizan rápidamente para producir moléculas como el ácido gálico y el ácido elágico, que conducen a inestabilidad o precipitación debido a su escasa solubilidad¹. Los métodos actuales para evaluar la estabilidad de la MTC, como las pruebas aceleradas o la centrifugación, suelen ser engorrosos⁴, lo que limita el desarrollo posterior de los procesos de preparación pertinentes.

Basándonos en el principio de dispersión múltiple de luz (MLS), establecimos un método de evaluación de estabilidad rápida para extractos de PEF y analizamos el mecanismo de inestabilidad. MLS es un método de medición basado en el escaneo de fuentes de luz infrarroja cercana. Cualquier cambio en el sistema de solución resulta en un cambio en la intensidad de la luz. La luz incidente se dispersa cuando es absorbida o penetrada por las partículas de la muestra. El sistema registra la señal luminosa de transmisión cuando pasa a través de la muestra; Si la transmitancia de luz de la muestra es deficiente, el sistema registra la señal luminosa de retrodispersión. En comparación con la observación visual, esto puede ahorrar mucho tiempo¹ y puede analizar de forma rápida y precisa el fenómeno de inestabilidad en detalle, proporcionando así información más útil para guiar la optimización del proceso de extracción.

Protocolo

1. Preparación del extracto

1. Pese con precisión una cantidad adecuada de PE y agregue 10 veces (peso) de agua desionizada para la extracción por reflujo.
2. Coloque cinco muestras para la extracción por reflujo durante 0 h (E1), 0,5 h (E2), 1 h (E3), 1,5 h (E4) y 2 h (E5) después del pesaje.
3. Después de la extracción, enfríe las muestras a temperatura ambiente y péselas para compensar el peso perdido para garantizar la consistencia con los pesos previos a la extracción.
4. Centrifugar las muestras a 8.581 × g durante 10 min para asegurar la eliminación del material insoluble y los residuos herbales de la solución de muestra.
5. Use una pipeta para agregar 20 ml de solución de muestra en el frasco de muestra para asegurarse de que la solución agregada cada vez esté a la misma altura.
   NOTA: Evite la contaminación, como huellas dactilares, en la parte de escaneo de la botella de muestra, asegúrese de que la botella de muestra esté limpia y verifique si hay arañazos visibles en la superficie de la botella. Al agregar la solución de muestra, tenga cuidado de no derramar o salpicar en la botella de muestra, y asegúrese de que el nivel de líquido esté a la misma altura en cada botella.

2. Funcionamiento del instrumento

1. Encienda el instrumento de detección MLS y caliéntelo durante 30 minutos.
2. Haga clic en el botón Crear archivo en el menú superior (o haga clic en Archivo | Nueva función de archivo) para crear un nuevo archivo de prueba.
3. Haga clic en el botón Mostrar temperatura de laboratorio de turbisca en el menú superior para ajustar la temperatura objetivo del instrumento a 25 ° C.
   NOTA: La temperatura establecida del instrumento debe ser superior a la temperatura ambiente; de lo contrario, la temperatura de la muestra se verá afectada por la temperatura ambiente.
4. Haga clic en Análisis del programa en el menú superior para ingresar al programa de análisis de configuración. Agregue el programa a la lista y, en la barra de tareas, agregue 5 minutos como ciclo, escanee durante 48 h a la secuencia de análisis y establezca el tiempo de equilibrio en 20 minutos. Seleccione este programa de análisis para todas las mediciones posteriores.
5. Mueva la botella de muestra preparada al sistema de detección MLS. Después de configurar el programa, haga clic en Inicio para iniciar la medición.
   NOTA: Tenga cuidado de no agitar la botella de vidrio al cargar la muestra. La medición solo se puede iniciar después de que la temperatura de la muestra y la temperatura de ajuste estén equilibradas.

3. Configuración del programa de análisis de dispersión de luz múltiple

1. Después de la recopilación de datos, haga clic en la lista de parámetros de cálculo para establecer los parámetros ópticos para calcular el índice de estabilidad (SI), el tamaño de partícula y la velocidad de migración de partículas.
2. Establezca los parámetros ópticos de la siguiente manera: la intensidad de transmisión de luz de fase continua (T₀) como 99.99% (agua), el índice de refracción de fase dispersa (np) como 1.36 y el índice de refracción de fase continua (nf) como 1.33.

Resultados

La Figura 1 muestra el principio de medición de luz múltiple y el significado de los resultados recopilados. En los resultados de los espectros MLS (Figura 2), la abscisa fue la altura de la celda de muestra, y la ordenada fue la intensidad de transmisión (T%) y retrodispersión (BS%). Al calcular los resultados de los espectros MLS, el sistema puede obtener los cambios en los parámetros físicos clave de la muestra durante el período de m...

Discusión

La evaluación rápida y precisa de la estabilidad de la MTC siempre ha sido un foco de la investigación de la MTC. Para proporcionar información más útil para dirigir la mejora del proceso de extracción, este estudio analizó los mecanismos de estabilidad e inestabilidad de una muestra utilizando una tecnología no destructiva de infrarrojo cercano.

En este protocolo, los parámetros de estabilidad importantes se calculan en función de los datos precisos del escaneo MLS. Los escaneos ML...

Materiales

Name	Company	Catalog Number	Comments
Adjustable electric heating jacket	Beijing Kewei Yongxing Instrument Co., Ltd	MH-1000	www.keweiyq.com
Analytical balance(1/10000)	Sartorious, Germany	BSA224S	www.sartorius.com.cn
CNC ultrasonic instrument	Kunshan Ultrasonic Instrument Co., Ltd	KQ-500DE	www.ks-csyq.com
GL-16 high-speed centrifuge	Sichuan Shuke Instrument Co., Ltd	18091403	www.sklxj.com
Phyllanthus emblica L.	Hehuachi medicinal materials market	YJL2004	Produced in Yunnan
Turbisoft Lab multiple light scattering instrument	French Formulaction Company	Turbisoft Lab 2.3.1.125 Fanalyser 1.3.5	www.formulaction.com
UPR-II-5T ultra-pure water device	Sichuan ULUPURE  Ultrapure Technology Co., Ltd	Z16030559	www.ccdup.com