JoVE Logo
Yazarlar
Bize Ulaşın

Oturum Aç

Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliği gereklidir. Oturum açın veya ücretsiz deneme sürümünü başlatın.

Bu Makalede

  • Erratum Notice
  • Özet
  • Özet
  • Giriş
  • Protokol
  • Sonuçlar
  • Tartışmalar
  • Açıklamalar
  • Teşekkürler
  • Malzemeler
  • Referanslar
  • Erratum
  • Yeniden Basımlar ve İzinler

Erratum Notice

Important: There has been an erratum issued for this article. Read More ...

Özet

Burada, geleneksel Çin tıbbı ekstraktlarının stabilitesini değerlendirmek için çoklu ışık saçılma teknolojisine dayanan bir stabilite değerlendirme yöntemi sunuyoruz.

Özet

Geleneksel Çin tıbbının ekstraksiyon ara maddesi, hazırlık sürecindeki kilit ara maddedir ve stabilitesi, nihai ürünün etkinliği ve kalitesi üzerinde önemli bir etkiye sahiptir. Bununla birlikte, mevcut stabilite değerlendirme yöntemleri genellikle zaman alıcı ve emek yoğundur, uzun süreli gözlem ve karmaşık ekipmanların (yüksek performanslı sıvı kromatografisi gibi) çalışmasını gerektirir ve sistemin kararsızlığı hakkında daha fazla fiziksel bilgi edinmek zordur. Bu nedenle, geleneksel Çin tıbbı için hızlı ve doğru bir stabilite analiz teknolojisi oluşturmak için acil bir ihtiyaç vardır. Çoklu ışık saçılması, geleneksel Çin ilaçlarının stabilitesini, numunenin doğasını veya durumunu değiştirmeden veya organik reaktifler kullanmadan çevre dostu bir şekilde doğru ve hızlı bir şekilde değerlendirebilen son teknoloji bir analitik yöntemdir.

Bu çalışmada, çoklu ışık saçılımının hassas tarama verilerini kullanarak, mevcut protokol zaman içinde katman kalınlığı, parçacık göç hızı ve ortalama parçacık boyutu için varyasyon eğrilerini hızla elde etti. Bu, mekanizmanın ve sistemin erken aşamalarında istikrarsızlığına neden olan önemli özelliklerin kesin olarak tanımlanmasını sağladı. Not olarak, ekstraksiyon işlemi için araştırma süresi, sistem kararlılığının ayrıntılı bir şekilde ölçülmesi ile önemli ölçüde kısaltılabilir, bu da çeşitli ekstraksiyon işlemlerinin Phyllanthus emblica L'nin stabilitesi üzerindeki etkilerinin hızlı, doğru ve derinlemesine bir analizine izin verir.

Giriş

Geleneksel Çin tıbbı (TCM) üretiminde, TCM ekstraksiyon ara ürünlerinin ve ilgili sıvı preparatların kararlılığı her zaman muayene1'in odak noktası olmuştur. Tıbbi ürünlerin, özellikle de birincil etken madde olarak polifenollerin klinik etkinliği, önemli stabilite sorunları nedeniyle acı çekmektedir 2,3. Sanajon oral sıvı ve Nuodikang oral sıvı, bu sayının tipik vakalarına örnektir4. Bu nedenle, TCM üretim sürecinde sıvı ara ürünlerin stabilitesini hızlı ve doğru bir şekilde değerlendirmek ve optimize etmek için verimli araçların nasıl kullanılacağını öğrenmek çok önemlidir. Güneydoğu Asya'da yaygın bir tıbbi bitki olan Phyllanthus emblica L. (PE), iyi antioksidan özelliklere sahip olduğu düşünülmektedir5, ayrıca anti-enflamatuar6, antibakteriyel7 ve antitümör etkileri8. Termal ekstraksiyon prosedürü sırasında, PE'deki tanenler şiddetli bir şekilde dönüşür9. Yüksek sıcaklıklara sahip kataliz altında, bu tanenler gallik asit ve ellagik asit gibi moleküller üretmek için hızlı bir şekilde hidrolize olur, bu da zayıf çözünürlükleri nedeniyle kararsızlığa veya çökelmeye neden olur1. Hızlandırılmış test veya santrifüjleme gibi TCM stabilitesini değerlendirmek için mevcut yöntemler genellikle hantaldır4, bu da ilgili hazırlık süreçlerinin daha da geliştirilmesini sınırlar.

Çoklu ışık saçılması (MLS) prensibine dayanarak, PEF ekstraktları için hızlı bir stabilite değerlendirme yöntemi oluşturduk ve kararsızlık mekanizmasını analiz ettik. MLS, yakın kızılötesi ışık kaynaklarının taranmasına dayanan bir ölçüm yöntemidir. Herhangi bir çözüm sistemi değişikliği, ışık yoğunluğunda bir değişikliğe neden olur. Gelen ışık, numunenin parçacıkları tarafından emildiğinde veya nüfuz ettiğinde dağılır. Sistem, numuneden geçerken iletim ışık sinyalini kaydeder; Numunenin ışık geçirgenliği zayıfsa, sistem geri saçılan ışık sinyalini kaydeder. Görsel gözlemle karşılaştırıldığında, bu çok zaman kazandırabilir1 ve kararsızlık fenomenini ayrıntılı olarak hızlı ve doğru bir şekilde analiz edebilir, böylece ekstraksiyon işleminin optimizasyonuna rehberlik etmek için daha yararlı bilgiler sağlar.

Protokol

1. Ekstrakt hazırlama

  1. Uygun miktarda PE'yi doğru bir şekilde tartın ve reflü ekstraksiyonu için 10x (ağırlık) deiyonize su ekleyin.
  2. Tartımdan sonra 0 saat (E1), 0,5 saat (E2), 1 saat (E3), 1,5 saat (E4) ve 2 saat (E5) boyunca reflü ekstraksiyonu için beş numune ayarlayın.
  3. Ekstraksiyondan sonra, numuneleri oda sıcaklığına soğutun ve ekstraksiyon öncesi ağırlıklarla tutarlılık sağlamak için kaybedilen ağırlığı telafi etmek için tartım.
  4. Çözünmeyen materyalin ve bitkisel kalıntıların numune çözeltisinden uzaklaştırılmasını sağlamak için numuneleri 10 dakika boyunca 8.581 × g'da santrifüj edin.
  5. Her seferinde eklenen çözeltinin aynı yükseklikte olduğundan emin olmak için numune şişesine 20 mL numune çözeltisi eklemek için bir pipet kullanın.
    NOT: Numune şişesinin tarama kısmında parmak izi gibi kontaminasyonlardan kaçının, numune şişesinin temiz olduğundan emin olun ve şişe yüzeyinde görünür çizikler olup olmadığını kontrol edin. Numune çözeltisini eklerken, numune şişesine dökülmemeye veya sıçramamaya dikkat edin ve sıvı seviyesinin her şişede aynı yükseklikte olduğundan emin olun.

2. Cihazın çalışması

  1. MLS algılama cihazını açın ve 30 dakika ısıtın.
  2. Üst menüdeki Dosya oluştur düğmesine tıklayın (veya Dosya | Yeni dosya işlevi) kullanarak yeni bir test dosyası oluşturun.
  3. Cihazın hedef sıcaklığını 25 °C'ye ayarlamak için üst menüdeki Show Turbiscan Lab Temperature (Türbiscan Laboratuvarı Sıcaklığını Göster ) düğmesine tıklayın.
    NOT: Cihazın ayarlanan sıcaklığı oda sıcaklığından daha yüksek olmalıdır; aksi takdirde, numune sıcaklığı oda sıcaklığından etkilenecektir.
  4. Kurulum analizi programına girmek için üst menüdeki Program Taraması'na tıklayın. Programı listeye ekleyin ve görev çubuğuna döngü olarak 5 dakika ekleyin, analiz dizisine 48 saat tarayın ve denge süresini 20 dakika olarak ayarlayın. Sonraki tüm ölçümler için bu analiz programını seçin.
  5. Hazırlanan numune şişesini MLS algılama sistemine taşıyın. Programı kurduktan sonra, ölçümü başlatmak için Başlat'a tıklayın.
    NOT: Numuneyi yüklerken cam şişeyi sallamamaya dikkat edin. Ölçüm ancak numune sıcaklığı ve ayar sıcaklığı dengelendikten sonra başlatılabilir.

3. Çoklu ışık saçılma analiz programı ayarı

  1. Veri toplandıktan sonra, kararlılık indeksini (SI), parçacık boyutunu ve parçacık göç hızını hesaplamak üzere optik parametreleri ayarlamak için hesaplama parametreleri listesine tıklayın.
  2. Optik parametreleri şu şekilde ayarlayın: sürekli faz ışık geçirgenlik yoğunluğu (T0)% 99.99 (su), dağınık faz kırılma indisi (np) 1.36 ve sürekli faz kırılma indisi (nf) 1.33 olarak.

Sonuçlar

Şekil 1, çoklu ışık ölçümünün prensibini ve toplanan sonuçların anlamını göstermektedir. MLS spektrum sonuçlarında (Şekil 2), apsis örnek hücrenin yüksekliğiydi ve ordinat iletim (% T) ve geri saçılma (BS% ) yoğunluğuydu. MLS spektrum sonuçlarını hesaplayarak, sistem ölçüm periyodu boyunca delta iletim ortalama değeri (ΔT) (Şekil 3A), foton serbest yolu (

Tartışmalar

TCM kararlılığının hızlı ve doğru bir şekilde değerlendirilmesi her zaman TCM araştırmasının odak noktası olmuştur. Ekstraksiyon işleminin iyileştirilmesini yönlendirmek için daha yararlı bilgiler sağlamak için, bu çalışma yakın kızılötesi tahribatsız bir teknoloji kullanarak bir numunenin stabilite ve kararsızlık mekanizmalarını analiz etmiştir.

Bu protokolde, önemli kararlılık parametreleri doğru MLS tarama verilerine dayanarak hesaplanır. MLS taramal...

Açıklamalar

Yazarların açıklayacak çıkar çatışmaları yoktur.

Teşekkürler

Bu çalışma, Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı (81973493) tarafından sağlanan hibelerle desteklenmiştir; Geleneksel Çin Tıbbı Ulusal Disiplinlerarası İnovasyon Ekibi (ZYYCXTD-D-202209); Sanajon İlaç Grubu Chengdu TCM Üniversitesi üretim, çalışma ve Araştırma Ortak Laboratuvar Projesi (2019-YF04-00086-JH); ve Sichuan Eyaleti Bilim ve Teknoloji Planı Destekli Proje (2021YFN0100). Yazarlar, Chengdu TCM Üniversitesi Yenilikçi Çin Tıbbı ve Eczacılık Enstitüsü'ne kütle spektrometresi çalışmalarındaki teknik desteği için teşekkür eder.

Malzemeler

NameCompanyCatalog NumberComments
Adjustable electric heating jacketBeijing Kewei Yongxing Instrument Co., LtdMH-1000 www.keweiyq.com
Analytical balance(1/10000)Sartorious, GermanyBSA224S www.sartorius.com.cn
CNC ultrasonic instrumentKunshan Ultrasonic Instrument Co., LtdKQ-500DEwww.ks-csyq.com
GL-16 high-speed centrifuge Sichuan Shuke Instrument Co., Ltd18091403www.sklxj.com
Phyllanthus emblica L.Hehuachi medicinal materials market YJL2004Produced in Yunnan
Turbisoft Lab multiple light scattering instrumentFrench Formulaction CompanyTurbisoft Lab 2.3.1.125 Fanalyser 1.3.5www.formulaction.com
UPR-II-5T ultra-pure water deviceSichuan ULUPURE  Ultrapure Technology Co., LtdZ16030559www.ccdup.com

Referanslar

  1. Huang, H. -. Z., et al. Exploration on the approaches of diverse sedimentations in polyphenol solutions: An integrated chain of evidence based on the physical phase, chemical profile, and sediment elements. Frontiers in Pharmacology. 10, 1060 (2019).
  2. Ran, F., et al. High or low temperature extraction, which is more conducive to Triphala against chronic pharyngitis. Biomedicine and Pharmacotherapy. 140, 111787 (2021).
  3. Wei, X., et al. Hepatoprotective effects of different extracts from Triphala against CCl(4)-induced acute liver injury in mice. Frontiers in Pharmacology. 12, 664607 (2021).
  4. Huang, H. Z., et al. Study on the stability control strategy of Triphala solution based on the balance of physical stability and chemical stabilities. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis. 158, 247-256 (2018).
  5. Bhattacharya, A., Chatterjee, A., Ghosal, S., Bhattacharya, S. K. Antioxidant activity of active tannoid principles of Emblica officinalis (amla). Indian Journal of Experimental Biology. 37 (7), 676-680 (1999).
  6. Chao, P. C., Hsu, C. C., Yin, M. C. Anti-inflammatory and anti-coagulatory activities of caffeic acid and ellagic acid in cardiac tissue of diabetic mice. Nutrition and Metabolism. 6, 33 (2009).
  7. Tiwari, V., Kuhad, A., Chopra, K. Emblica officinalis corrects functional, biochemical and molecular deficits in experimental diabetic neuropathy by targeting the oxido-nitrosative stress mediated inflammatory cascade. Phytotherapy Research. 25 (10), 1527-1536 (2011).
  8. Baliga, M. S., Dsouza, J. J. Amla (Emblica officinalis Gaertn), a wonder berry in the treatment and prevention of cancer. European Journal of Cancer Prevention. 20 (3), 225-239 (2011).
  9. Rehman, H. -. u., et al. Studies on the chemical constituents of Phyllanthus emblica. Natural Product Research. 21 (9), 775-781 (2007).
  10. Jang, Y., Koh, E. Characterisation and storage stability of aronia anthocyanins encapsulated with combinations of maltodextrin with carboxymethyl cellulose, gum Arabic, and xanthan gum. Food Chemistry. 405, 135002 (2022).
  11. Fu, X., et al. Novel phenylalanine-modified magnetic ferroferric oxide nanoparticles for ciprofloxacin removal from aqueous solution). Journal of Colloid and Interface Science. 632, 345-356 (2023).
  12. Jiang, T., Charcosset, C. Encapsulation of curcumin within oil-in-water emulsions prepared by premix membrane emulsification: Impact of droplet size and carrier oil on the chemical stability of curcumin. Food Research International. 157, 111475 (2022).

Erratum


Formal Correction: Erratum: Using Multiple Light Scattering to Examine the Stability of Phyllanthus emblica L. Extracts Obtained with Different Extraction Methods
Posted by JoVE Editors on 8/04/2023. Citeable Link.

An erratum was issued for: Using Multiple Light Scattering to Examine the Stability of Phyllanthus emblica L. Extracts Obtained with Different Extraction Methods. The Authors section was updated from:

Haozhou Huang1
Mengqi Li2
Chuanhong Luo3
Sanhu Fan4
Taigang Mo4
Li Han3
Dingkun Zhang3
Junzhi Lin5
1Innovative Institute of Chinese Medicine and Pharmacy/Academy for Interdiscipline, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine
2Sichuan Nursing Vocational College
3School of Pharmacy/School of Modern Chinese Medicine Industry, State Key Laboratory of Characteristic Chinese Medicine Resources in Southwest China
4Sanajon Pharmaceutical Group
5TCM Regulating Metabolic Diseases Key Laboratory of Sichuan Province, Hospital of Chengdu University of Traditional Chinese Medicine

to

Haozhou Huang1,2
Mengqi Li3
Chuanhong Luo4
Sanhu Fan5
Taigang Mo5
Li Han4
Dingkun Zhang4
Junzhi Lin6
1State Key Laboratory of Southwestern Chinese Medicine Resources, Innovative Institute of Chinese Medicine and Pharmacy/Academy for Interdiscipline, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine
2Meishan Hospital of Chengdu University of Traditional Chinese Medicine
3Sichuan Nursing Vocational College
4State Key Laboratory of Southwestern Chinese Medicine Resources, School of Pharmacy, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine
5Sanajon Pharmaceutical Group
6TCM Regulating Metabolic Diseases Key Laboratory of Sichuan Province, Hospital of Chengdu University of Traditional Chinese Medicine

Yeniden Basımlar ve İzinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya resimlerini yeniden kullanma izni talebi

Izin talebi

Daha Fazla Makale Keşfet

T pSay 194Phyllanthus emblica Lstabiliteoklu k sa lmasz

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Gizlilik

Kullanım Şartları

İlkeler

Bize Ulaşın

KÜTÜPHANEYE TAVSİYE ET

JoVE HABER BÜLTENLERİ

Araştırma

Eğitim

Yazarlar

Kütüphaneciler

JoVE Hakkında

Telif Hakkı © 2020 MyJove Corporation. Tüm hakları saklıdır