Damos las gracias a Bet Rauch y la Universidad de Wisconsin pequeña instalación de imágenes de animales para la resonancia magnética. El Departamento de Cirugía Neurológica de la Universidad de Wisconsin-Madison proporcionó fondos para este trabajo.

MCAO modelo de rata Preparación prequirúrgica La técnica aséptica se debe utilizar para la supervivencia de todos los procedimientos quirúrgicos. Desinfectar la superficie de trabajo quirúrgico con un desinfectante comercial y preparar paquetes quirúrgicos estériles de los instrumentos, las cortinas, gasas, algodones, suturas y hojas de bisturí en autoclave. Una máscara quirúrgica, sombrero de pelo y guantes estériles deben ser usados. Un cordón seco Germinador esterilizador también se utiliza para esterilizar instrumentos quirúrgicos entre los procedimientos en caso de cirugías múltiples rata se llevará a cabo durante una sesión. Precalentar una manta homeotérmicos con camisa de agua y de lugar en una almohadilla absorbente para evitar la hipotermia de la rata durante la cirugía. <ol><li> De manera espontánea de ratas hipertensas (o cepa de rata otros de elección) en una cámara de inducción y de inducir la anestesia con isoflurano 5% (máquina de anestesia debe ser ajustado a 1.0 L / min de O 2 y 1,0 L / min N 2 O). Inferior al 1-2% isoflurano para mantener la anestesia. </li><li> Aplique un ungüento lágrimas artificiales en los dos ojos. </li><li> Afeitado de la garganta y el cuello a la izquierda más allá de la zona de la incisión posibles usando las podadoras (Oster A5 con la hoja n. º 10). </li><li> Aplicar Betadine a una almohadilla de gasa y desinfección de la piel desde el centro de la región quirúrgica, en espiral hacia afuera. Enjuague con una gasa estéril que contiene etanol al 70%, pasando pad en un patrón similar. Repita los dos pasos para un total de tres ciclos. </li><li> Inyectar 0,2 ml de bupivacaína al 0.5% por vía subcutánea a lo largo del sitio de la incisión posibles. </li><li> Lugar de ratas en jersey estéril o la cubierta con un paño quirúrgico estéril. </li></ol> Oclusión transitoria de la MCA <ol start="7"><li> Bajo un microscopio, una incisión en la línea media ventral y se realiza disección de la fascia superficial es. </li><li> Debajo de la fascia superficial, a que el tejido glandular de los músculos de la izquierda y tres que forman un triángulo: el esternohioideo, que se encuentra la línea media en la tráquea, el digástrico (fácilmente identificable con su brillante porción tendinosa blanco) y, por último, el músculo esternocleidomastoideo. </li><li> Una cuidadosa disección aguda y roma se realiza dentro del triángulo para identificar la arteria carótida (disección roma exclusiva puede ser la preferida por algunos para minimizar los daños accidentales). Las arterias carótida externa, interna y común (ECA, ICA, CCA) están expuestos. La arteria carótida es grande y legumbres visiblemente. El nervio vago es visto circulando en la cara lateral de ambas arterias carótidas común e interna y es fuertemente diseca la arteria carótida común e interna. </li><li> Dos ramas de la CEPA se diseca bruscamente, la primera rama título medial y la segunda rama título lateralmente. Ambas ramas se cauterizan y corte, que permite una mayor facilidad en la movilización de los buques más grandes. </li><li> La CEPA está diseccionado más rostral. El hueso hioides se puedan encontrar y esto limitará la extensión de la disección rostral. La arteria carótida externa se liga lo más distalmente posible, con una sutura de seda 6-0. </li><li> Otra sutura de seda 6-0 se coloca libremente alrededor de la ECA, cerca de la bifurcación con la ICA. Asegúrese de no obstruir el buque, como la sutura intraluminal que se utilizará para la oclusión se va por aquí en un paso posterior. </li><li> Clips de microcirugía se colocan en las arterias carótidas común e interna cerca de la bifurcación. </li><li> Una arteriotomía parcial inicial se crea entre los dos lazos de sutura de seda en la arteria carótida externa. </li><li> Introducir un 2.2 -3.0 cm de longitud de la sutura de nylon monofilamento de 4-0, con una torcedura 2,0 cm de su redondeada, de silicio recubierto de punta, en la luz del Tribunal de Cuentas hacia el CCA donde se encuentra el clip de microcirugía. Estas suturas están disponibles comercialmente (Doccol Corp., Redlands, CA, EE.UU.). Cortar el resto de la ECA (en el sitio de la arteriotomía parcial) para liberar el muñón y la posición del tronco debajo de la bifurcación de la CEA y del ICA, lo que más fácilmente permiten la sutura intraluminal a deslizarse hacia el ICA. </li><li> Apriete la sutura de seda alrededor del muñón CEPA para asegurar la sutura de nylon intraluminal y prevenir el sangrado, y luego retire el clip microvascular de la ICA. Abra el clip lentamente antes de retirarlo para comprobar si hay sangrado. </li><li> Seguir avanzando en la sutura de nylon de la ECA a ICA lumen de la arteria cerebral media (ACM). Esta longitud es típicamente 18-20 mm y es la razón para la colocación de una torcedura en la sutura antes de la inserción. Después de un período variable de sutura de nylon se inserta, la resistencia se puede sentir. Si esto ocurre con gran parte de la sutura de nylon sigue presente fuera de la nave, que indica que la sutura es probable entrar en la arteria pterigopalatina (ver nota abajo). Tire hacia atrás y la curva de la sutura ligeramente para continuar por el ICA, que se desarrollará más medial. Además, la disección del origen de la PPA se puede hacer para visualizar mejor el caminodel filamento intraluminal. Seguir para insertar la sutura de nylon hasta sentir resistencia en y después de la posición de 2 cm doblado. En este punto, la sutura intraluminal ha bloqueado el origen de la MCA. MCA oclusión puede ser confirmado por el control de la reducción del flujo sanguíneo cerebral regional mediante un láser-doppler (véase la tabla de materiales para la fuente de un equipo). También tenga en cuenta que el origen de la arteria pterigopalatina fuera de la ICA puede ser directamente atado, si se prefiere, con el fin de evitar la intubación accidental de este vaso con la sutura intraluminal. </li><li> En marcha el cronómetro y el tiempo de registro de la oclusión de inicio. </li><li> Retire la microclip de la CCA. </li><li> Cerrar la incisión (dermis, tejido subcutáneo carnoso, las capas del tejido subcutáneo) de forma rápida con sutura de seda 3-0 (un patrón continuo simple para facilitar la reapertura de la reperfusión) y coloque cuidadosamente la rata en una jaula de recuperación. Verifique que el piso de la jaula alrededor de la nariz y la boca están libres de material de cama y seguimiento de la recuperación de la anestesia. </li></ol> La restauración del flujo sanguíneo MCA (reperfusión) <ol start="21"><li> Poco antes del período de oclusión debe terminar, vuelva a anestesiar la rata, la desinfección de la zona de la incisión con Betadine y el 70% de etanol (3 ciclos, como antes) y volver a abrir la incisión mediante la eliminación de las suturas de cierre. </li><li> Coloque una microclip en la CCA, como antes. </li><li> Retirar la sutura parcialmente oclusión de la CIA hasta el final de sutura es visible a través del ICA. NO retire totalmente de la sutura de la ICA / ECA! </li><li> Coloque una microclip en el ICA por encima del extremo de la sutura intraluminal. </li><li> Eliminar por completo la oclusión de sutura y bien atar el muñón ECA. Registro de final de la oclusión (inicio de reperfusión) tiempo. </li><li> Retire la microclip de la ICA. </li><li> Retire la microclip de la CCA. </li><li> Humedezca la zona con varias gotas de solución salina estéril y cerca de las capas de la incisión (dermis, tejido subcutáneo carnoso, tejido subcutáneo) con sutura de seda 3-0 con un sencillo patrón interrumpido. </li><li> Administrar 0,05 mg / kg de buprenorfina (u otro analgésico postoperatorio adecuado tras la directrices institucionales) en el espacio peritoneal. </li><li> Inyectar 5 cc de suero salino por vía intraperitoneal precalentado. Esto proporcionará la hidratación durante la etapa de recuperación. </li><li> Monitorear la recuperación de la rata de la anestesia. </li><li> Después de la rata se ha recuperado, para la indicación de la prueba de comportamiento de un infarto mediante la celebración de la rata por la cola y observando si la rata puede convertir a ambas partes. Curling a un lado sólo se espera. Escalas de puntuación simple se puede utilizar para grabar iniciales post-infarto de funcionamiento conductual (ver Discusión). </li><li> Inyecciones adicionales de buprenorfina (dosis igual al anterior) se debe administrar cada 6 a 8 horas durante 24 horas de alivio del dolor. Extender la analgesia si el animal muestra signos de incomodidad. </li></ol> Resultados representante <img src="/files/ftp_upload/1978/1978fig1.jpg" alt="Figura 1" /> Figura 1. La oclusión de la arteria cerebral media con sutura endovascular. Un diagrama simplificado del sistema circulatorio del cráneo de la rata se muestra con una sutura intraluminal de silicio recubierto ocluir el origen de la MCA. La OA y las ramas de ST de la ECA se han ligado a la izquierda y una corbata de sutura alrededor del muñón ECA tiene la sutura intraluminal en el lugar. ACA, la arteria cerebral anterior, BA, arteria basilar, CCA, la arteria carótida común, la CEPA, la arteria carótida externa, ICA, la arteria carótida interna, MCA, la arteria cerebral media, la OA, la arteria occipital, PCA, la arteria cerebral posterior; PComA, comunicante posterior arteria, PPA, la arteria pterigopalatina, ST, la arteria tiroidea superior. Figura adaptada de Sasaki et al. 4 y Lee 3. <img src="/files/ftp_upload/1978/1978fig2.jpg" alt="Figura 2" /> Figura 2. Representante imágenes de resonancia magnética de cortes coronales de cerebro de rata 24 horas después de una hora MCAO transitoria. Edema cerebral que acompaña la isquemia focal se visualiza en imágenes potenciadas en T2 de resonancia magnética. La zona del infarto aparece hiperintensa (brillante) en las imágenes T2. Patrones similares de infarto se puede ver con las técnicas más avanzadas, tales como resonancia magnética de difusión ponderada de imágenes y coeficiente de difusión aparente mapeo 5. <img src="/files/ftp_upload/1978/1978fig3.jpg" alt="Figura 3" /> Figura 3. Representante de las secciones coronal de cerebro de rata teñidas con TTC 24 horas después de una hora MCAO transitoria. Tinción TTC revela blanco (sin teñir) las regiones infartadas de la corteza cerebral y el estriado de la rata misma que se muestra en la Figura 2. Tenga en cuenta que el patrón general de las lesiones focales isquémica es similar a la observada en la RM en T2, aunque la zona final del infarto determinado histológicamente pueden ser ligeramente más pequeña que la lesión T2.

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Z., Weinstein, P. R., Carlson, S., Cummins, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reversible+middle+cerebral+artery+occlusion+without+craniectomy+in+rats.">Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats.</a> Stroke. 20, 84-91 (1989).</li><li>Shigeno, T., McCulloch, J., Graham, D. I., Mendelow, A. D., Teasdale, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pure+cortical+ischemia+versus+striatal+ischemia.+Circulatory,+metabolic,+and+neuropathologic+consequences.">Pure cortical ischemia versus striatal ischemia. Circulatory, metabolic, and neuropathologic consequences.</a> Surgical neurology. 24, 47-51 (1985).</li><li>Bederson, J. 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Los autores no tienen conflictos de intereses a revelar. Este protocolo fue aprobado por el Cuidado de Animales institucional y el empleo en la Universidad de Wisconsin-Madison Escuela de Medicina y Salud Pública y se rige por los Institutos Nacionales de Salud directrices para el uso de animales de experimentación.

Modelos de roedores de la isquemia cerebral puede ser clasificado como global o focal y reversible o irreversible. Utilizamos un modelo de isquemia focal reversible con el fin de imitar la lesión de reperfusión que puede ocurrir después de la recanalización de los pacientes con ictus humanos. Mientras que la de la rata con la ventaja de circulación similar a la del cráneo humano, la extensa circulación colateral intracraneal por el Círculo de Willis y los resultados de anastomosis leptomeníngea en los volúmenes de infarto inconsistente 6. Usamos la ratas espontáneamente hipertensas (SHR) tensión porque el tamaño del infarto es mayor en SHR expuestos a la isquemia cerebral focal en comparación con las ratas normotensas 70-10. Inducción de accidente cerebrovascular en SHR también es más consistente y puede generar menos mortalidad que en otras cepas de uso común 11. Además, los parámetros fisiológicos deben ser controlados a través de la cirugía, debido a las fluctuaciones pueden añadir a la variabilidad en los volúmenes de infarto, estos parámetros incluyen la presión arterial, arterial de O 2 y CO 2, la hipotermia y la hiperglucemia, que puede agravar la lesión isquémica 2,12 . La hipotermia es motivo de especial preocupación, ya que puede disminuir el grado de la lesión isquémica neuronal, y por lo tanto, la colocación de la rata en una almohadilla eléctrica de termorregulación durante la cirugía es esencial. Contamos con preparados comercialmente de silicio recubierto suturas en este procedimiento en un intento de aumentar la coherencia en el tamaño del infarto 13-15. Tradicionalmente, los puntos de sutura intraluminal utilizados para ocluir la MCA han sido preparados por una llama redondeo 3-0 punta de sutura de nylon o con una pistola de pegamento caliente para cubrir la punta de la sutura con una pequeña gota de pegamento 16. Estos procedimientos producen las suturas con diámetros de punta diferentes y por lo tanto, puede requerir varios intentos antes de encontrar la oclusión de una sutura que coincida con el diámetro de los vasos de una rata dado. Otras variaciones en el método descrito en este MCAO de vídeo incluyen la oclusión más distal, evitando las ramas lenticuloestriadas con el fin de tener un infarto cortical pura 17, y la oclusión simultánea de la MCA y ipsilateral arteria carótida común para reducir el flujo sanguíneo colateral 6,9. Los efectos funcionales de accidente cerebrovascular puede ser evaluada utilizando una variedad de pruebas de comportamiento, en la que los déficits en las tareas específicas se reflejan en una escala de puntuación simple. Por ejemplo, Bederson et al. 18 ratas desarrollaron una puntuación neurológica clasificación del grado de flexión de la extremidad anterior en una posición elevada del cuerpo, resistencia asimétrica a un empuje lateral y el comportamiento en campo abierto en círculos. Las ratas se extiende tanto a las extremidades anteriores al suelo cuando elevada y que no presentan otras deficiencias se calificaron &quot;Normal (0)&quot;, mientras que las ratas con la flexión de miembro superior contralateral sólo fueron clasificados con &quot;déficit moderado (1)&quot;. &quot;Grave grado 2&quot; ratas muestran disminución de la resistencia en el lado contralateral a una fuerza lateral y &quot;severo grado 3&quot;, las ratas, además, participan en círculos comportamientos. Déficits conductuales menor grado se observó siempre en el grado inmediatamente superior (por ejemplo, grado 2 y 3 animales también se muestra la flexión de miembro superior), y estos resultados fueron predictivos de las diferencias en el tamaño del infarto 18. Por lo tanto, como un sencillo sistema de puntuación permite una rápida y consistente semi-cuantitativos de evaluación de los déficits funcionales de un accidente cerebrovascular. La medición de la extensión del infarto cerebral que comúnmente se logra mediante tinción histológica del daño tisular utilizando TTC, cresil violeta (Nissl mancha) o hematoxilina y eosina. Técnicas de imagen por resonancia magnética, incluyendo RMC difusión para visualizar el infarto en los puntos de los primeros tiempos después de la oclusión, que permitan la determinación de un volumen del infarto en ratas cada individuo sin la necesidad de cosechar los tejidos. Esto es especialmente valioso en los estudios dirigidos a determinar la eficacia de un tratamiento neuroprotector después del accidente cerebrovascular; imagen de la rata después de MCAO pero la administración antes del tratamiento da la confianza de investigador que todos los animales experimentales y de control con experiencia trazos similares a los de inicio, la reducción de los efectos de confusión de la variabilidad en la inducción de un derrame cerebral.

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		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td> 4-0 Nylon suture</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Doccol Corporation</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>2-3 mm silicon coating length, 0.39 mm tip diameter</td>
</tr>
<tr>
<td>Spontaneously hypertensive rats</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Charles River Laboratories</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>290-300 g, male</td>
</tr>
<tr>
<td>Gaymar T/Pump thermoregulatory pump and pads</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Gaymar Industries</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Vetroson V-10 bipolar electrosurgical unit</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Summit Hill Laboratories</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Germinator 500 glass bead sterilizer</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>CellPoint Scientific </td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Vasamedics Bpm2Laserflo blood perfusion monitor</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>TSI Inc.</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

focal cerebral ischemia model by endovascular suture occlusion of the middle cerebral artery in the rat

El accidente cerebrovascular es la principal causa de discapacidad y la tercera causa de muerte en adultos en todo el mundo 1. En la carrera de hombres, existe un estado clínico muy variable, en el desarrollo de modelos animales de isquemia focal, sin embargo, el logro de la reproducibilidad del volumen del infarto inducida experimentalmente es esencial. La rata es un modelo animal ampliamente utilizado para el accidente cerebrovascular debido a sus costos relativamente bajos cría de animales y de la similitud de su circulación craneal a la de los seres humanos 2,3. En los seres humanos, la arteria cerebral media (ACM) es el más comúnmente afectado por el derrame cerebral y síndromes de múltiples métodos de MCA oclusión (MCAO) se han descrito para imitar este síndrome clínico en modelos animales. Debido a que la recanalización ocurre comúnmente después de un accidente cerebrovascular agudo en la reperfusión humanos, después de un período de oclusión se ha incluido en muchos de estos modelos. En este vídeo, se demuestra lo transitorio de sutura endovascular MCAO modelo en ratas espontáneamente hipertensas (SHR). Un filamento de punta con una capa de silicio se coloca intraluminal en el origen MCA durante 60 minutos, seguida de reperfusión. Tenga en cuenta que el período de oclusión óptima puede variar en las cepas de ratas, como Wistar o Sprague-Dawley. Varios indicadores de comportamiento de accidente cerebrovascular en la rata se muestran. Isquemia focal se confirma con imágenes potenciadas en T2 de resonancia magnética y por tinción de las secciones del cerebro con cloruro de 2,3,5-trifenil tetrazolio (TTC) 24 horas después de MCAO.

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Focal Cerebral Ischemia Model by Endovascular Suture Occlusion of the Middle Cerebral Artery in the Rat

Inducción quirúrgica del daño cerebral isquémico en la rata es un modelo ampliamente utilizado para la investigación del accidente cerebrovascular. Aquí se demuestra la inducción de isquemia cerebral focal por oclusión de la arteria cerebral media. Visualización del infarto como resultado de la tinción histológica y la resonancia magnética también se indica.

Modelo de isquemia cerebral focal por oclusión endovascular de sutura de la arteria cerebral media en la rata

Stroke is the leading cause of disability and the third leading cause of death in adults worldwide1. In human stroke, there exists a highly variable ...

focal-cerebral-ischemia-model-endovascular-suture-occlusion-middle

Research

JoVE Journal

Neuroscience

79.2K vistas.  University of Wisconsin-Madison. Inducción quirúrgica del daño cerebral isquémico en la rata es un modelo ampliamente utilizado para la investigación del accidente cerebrovascular. Aquí se demuestra la inducción de isquemia cerebral focal por oclusión de la arteria cerebral media. Visualización del infarto como resultado de la tinción histológica y la resonancia magnética también se indica.

Video: Focal Cerebral Ischemia Model by Endovascular Suture Occlusion of the Middle Cerebral Artery in the Rat

Lateral Chronic Cranial Window Preparation Enables In Vivo Observation Following Distal Middle Cerebral Artery Occlusion in Mice

Focal cerebral ischemia (i.e., ischemic stroke) may cause major brain injury, leading to a severe loss of neuronal function and consequently to a host of motor and cognitive disabilities. Its high prevalence poses a serious health burden, as stroke is among the principal causes of long-term disability and death worldwide1. Recovery of neuronal function is, in most cases, only partial. So far, treatment options are very limited, in particular due to the narrow time window for thrombolysis2,3. Determining methods to accelerate recovery from stroke remains a prime medical goal; however, this has been hampered by insufficient mechanistic insights into the recovery process. Experimental stroke researchers frequently employ rodent models of focal cerebral ischemia. Beyond the acute phase, stroke research is increasingly focused on the sub-acute and chronic phase following cerebral ischemia. Most stroke researchers apply permanent or transient occlusion of the MCA in mice or rats. In patients, occlusions of the MCA are among the most frequent causes of ischemic stroke4. Besides proximal occlusion of the MCA using the filament model, surgical occlusion of the distal MCA is probably the most frequently used model in experimental stroke research5. Occlusion of a distal (to the branching of the lenticulo-striate arteries) MCA branch typically spares the striatum and primarily affects the neocortex. Vessel occlusion can be permanent or transient. High reproducibility of lesion volume and very low mortality rates with respect to the long-term outcome are the main advantages of this model. Here, we demonstrate how to perform a chronic cranial window (CW) preparation lateral to the sagittal sinus, and afterwards how to surgically induce a distal stroke underneath the window using a craniotomy approach. This approach can be applied for sequential imaging of acute and chronic changes following ischemia via epi-illuminating, confocal laser scanning, and two-photon intravital microscopy.

Lateral Chronic Cranial Window Preparation Enables In Vivo Observation Following Distal Middle Cerebral Artery Occlusion in Mice

Surgical occlusion of a distal middle cerebral artery branch (MCAo) is a frequently used model in experimental stroke research. This manuscript describes the basic technique of permanent MCAo, combined with the insertion of a lateral cranial window, which offers the opportunity for longitudinal intravital microscopy in mice.

Ventana lateral crónica craneal Preparación Activa<em&gt; En Vivo</em&gt; Observación Siguiendo distal de la arteria cerebral media oclusión en ratones

Focal cerebral ischemia (i.e., ischemic stroke) may cause major brain injury, leading to a severe loss of neuronal function and consequently to a host of ...

Investigación

Neurociencias

A Rat Model of Mild Intrauterine Hypoperfusion with Microcoil Stenosis

Intrauterine hypoperfusion/ischemia is one of the major causes of intrauterine/fetal growth restriction, preterm birth, and low birth weight. Most studies of this phenomenon have been performed in either models with severe intrauterine ischemia or models with gradient degree of intrauterine hypoperfusion. No study has been performed in a model on uniform mild intrauterine hypoperfusion (MIUH). Two models have been used for studies of MIUH: a model based on suture ligation of either side of the arterial arcade formed with the uterine and ovarian arteries, and a transient model based on clipping the bilateral ovarian arteries and aorta having patency. Those two rodent models of MIUH have some limitations, e.g., not all fetuses are subjected to MIUH, depending on their position in the uterine horn. In our MIUH model, all fetuses are subjected to a comparable level of intrauterine hypoperfusion. MIUH was achieved by mild stenosis of all four arteries feeding the uterus, i.e., the bilateral uterine and ovarian arteries.
Arterial stenosis was induced by metal microcoils wrapped around the feeding arteries. Producing arterial stenosis with microcoils allowed us to control, optimize, and reproduce decreased blood flow with very little inter-animal variability and a low mortality rate, thus enabling accurate evaluation. When microcoils with an inner diameter of 0.24 mm were used, the blood flow in both the placenta and fetus was mildly decreased (approximately 30% from the pre-stenosis level in the placenta). The offspring of our MIUH model clearly demonstrates long-lasting alterations in neurological, neuroanatomical and behavioral test results.

Mild intrauterine hypoperfusion was produced by artery stenosis with metal microcoils wrapped around the uterine and ovarian arteries in rats at embryonic day 17. This procedure produced prenatal hypoperfusion and intrauterine growth restriction.

Un modelo de rata de hipoperfusión leve intrauterina con microcoil de transcatheter estenosis

Intrauterine hypoperfusion/ischemia is one of the major causes of intrauterine/fetal growth restriction, preterm birth, and low birth weight. Most studies ...

Effects of Blast-induced Neurotrauma on Pressurized Rodent Middle Cerebral Arteries

Though there have been studies on the histopathological and behavioral effects of blast exposure, fewer have been dedicated to blast&#39;s cerebral vascular effects. Impact (i.e., non-blast) traumatic brain injury (TBI) is known to decrease pressure autoregulation in the cerebral vasculature in both humans and experimental animals. The hypothesis that blast-induced traumatic brain injury (bTBI), like impact TBI, results in impaired cerebral vascular reactivity was tested by measuring myogenic dilatory responses to reduced intravascular pressure in rodent middle cerebral arterial (MCA) segments from rats subjected to mild bTBI using an Advanced Blast Simulator (ABS) shock tube. Adult, male Sprague-Dawley rats were anesthetized, intubated, ventilated and prepared for Sham bTBI (identical manipulation and anesthesia except for blast injury) or mild bTBI. Rats were randomly assigned to receive Sham bTBI or mild bTBI followed by sacrifice 30 or 60 min post-injury. Immediately after bTBI, righting reflex (RR) suppression times were assessed, euthanasia at the time points post-injury was completed, the brain was harvested and the individual MCA segments were collected, mounted and pressurized. As the intraluminal pressure perfused through the arterial segments was reduced in 20 mmHg increments from 100 to 20 mmHg, MCA diameters were measured and recorded. With decreasing intraluminal pressure, MCA diameters steadily increased significantly above baseline in the Sham bTBI groups while MCA dilator responses were significantly reduced (p &#60; 0.05) in both bTBI groups as evidenced by the impaired, smaller MCA diameters recorded for the bTBI groups. In addition, RR suppression in the bTBI groups was significantly (p &#60; 0.05) higher than in the Sham bTBI groups. MCA&#39;s collected from the Sham bTBI groups exhibited typical vasodilatory properties to decreases in intraluminal pressure while MCA&#39;s collected following bTBI exhibited significantly impaired myogenic vasodilatory responses to reduced pressure that persisted for at least 60 min after bTBI.

Here, we present a protocol to describe methods for ex vivo vascular reactivity determination following a primary blast traumatic brain injury (bTBI) using isolated, pressurized, rodent middle cerebral arterial (MCA) segments. bTBI induction is accomplished using a shock tube, also known as an Advanced Blast Simulator (ABS) device.

Efectos de Neurotrauma inducido ráfaga en roedor a presión media de las arterias cerebrales

Though there have been studies on the histopathological and behavioral effects of blast exposure, fewer have been dedicated to blast&#39;s cerebral ...

Modeling Stroke in Mice: Transient Middle Cerebral Artery Occlusion via the External Carotid Artery

Stroke is the third most common cause of mortality and the leading cause of acquired adult disability in developed countries. To date, therapeutic options are limited to a small proportion of stroke patients within the first hours after stroke. Novel therapeutic strategies are being extensively investigated, especially to prolong the therapeutic time window. These current investigations include the study of important pathophysiological pathways after stroke, such as post-stroke inflammation, angiogenesis, neuronal plasticity, and regeneration. Over the last decade, there has been increasing concern about the poor reproducibility of experimental results and scientific findings among independent research groups. To overcome the so-called &#8220;replication crisis&#8221;, detailed standardized models for all procedures are urgently needed. As an effort within the &#8220;ImmunoStroke&#8221; research consortium (https://immunostroke.de/), a standardized mouse model of transient middle cerebral artery occlusion (MCAo) is proposed. This model allows the complete restoration of the blood flow upon removal of the filament, simulating the therapeutic or spontaneous clot lysis that occurs in a large proportion of human strokes. The surgical procedure of this &#8220;filament&#8221; stroke model and tools for its functional analysis are demonstrated in the accompanying video.

Different models of middle cerebral artery occlusion (MCAo) are used in experimental stroke research. Here, an experimental stroke model of transient MCAo via the external carotid artery (ECA) is described, which aims to mimic human stroke, in which the cerebrovascular thrombus is removed due to spontaneous clot lysis or therapy.

Modelado del accidente cerebrovascular en ratones: oclusión transitoria de la arteria cerebral media a través de la arteria carótida externa

Stroke is the third most common cause of mortality and the leading cause of acquired adult disability in developed countries. To date, therapeutic options ...

A Model for Encephalomyosynangiosis Treatment after Middle Cerebral Artery Occlusion-Induced Stroke in Mice

There is no effective treatment available for most patients suffering with ischemic stroke, making development of novel therapeutics imperative. The brain's ability to self-heal after ischemic stroke is limited by inadequate blood supply in the impacted area. Encephalomyosynangiosis (EMS) is a neurosurgical procedure that achieves angiogenesis in patients with moyamoya disease. It involves craniotomy with placement of a vascular temporalis muscle graft on the ischemic brain surface. EMS has never been studied in the setting of acute ischemic stroke in mice. The hypothesis driving this study is that EMS enhances cerebral angiogenesis at the cortical surface surrounding the muscle graft. The protocol shown here describes the procedure and provides initial data supporting the feasibility and efficacy of the EMS approach. In this protocol, after 60 min of transient middle cerebral artery occlusion (MCAo), mice were randomized to either MCAo or MCAo + EMS treatment. The EMS was performed 3-4 h after occlusion. The mice were sacrificed 7 or 21 days after MCAo or MCAo + EMS treatment. Temporalis graft viability was measured using nicotinamide adenine dinucleotide reduced-tetrazolium reductase assay. A mouse angiogenesis array quantified angiogenic and neuromodulating protein expression. Immunohistochemistry was used to visualize graft bonding with brain cortex and change in vessel density. The preliminary data here suggest that grafted muscle remained viable 21 days after EMS. Immunostaining showed successful graft implantation and increase in vessel density near the muscle graft, indicating increased angiogenesis. Data show that EMS increases fibroblast growth factor (FGF) and decreases osteopontin levels after stroke. Additionally, EMS after stroke did not increase mortality suggesting that protocol is safe and reliable. This novel procedure is effective and well-tolerated and has the potential to provide information of novel interventions for enhanced angiogenesis after acute ischemic stroke.

The protocol aims to provide methods for encephalomyosynangiosis-grafting of a vascular temporalis muscle flap on the pial surface of ischemic brain tissue-for the treatment of non-moyamoya acute ischemic stroke. The approach's efficacy in increasing angiogenesis is evaluated using a transient middle cerebral artery occlusion model in mice.

Un modelo para el tratamiento de la encefalomiosinangiosis después del accidente cerebrovascular inducido por la oclusión de la arteria cerebral media en ratones

There is no effective treatment available for most patients suffering with ischemic stroke, making development of novel therapeutics imperative. The ...

Establecimiento de un modelo transcraneal de ratones de oclusión de la arteria cerebral media

A Modified Transcranial Middle Cerebral Artery Occlusion Model to Study Stroke Outcomes in Aged Mice

In experimental stroke research, middle cerebral artery occlusion (MCAO) with an intraluminal filament is widely used to model ischemic stroke in mice. The filament MCAO model typically exhibits a massive cerebral infarction in C57Bl/6 mice that sometimes includes brain tissue in the territory supplied by the posterior cerebral artery, which is largely due to a high incidence of posterior communicating artery atresia. This phenomenon is considered a major contributor to the high mortality rate observed in C57Bl/6 mice during long-term stroke recovery after filament MCAO. Thus, many chronic stroke studies exploit distal MCAO models. However, these models usually produce infarction only in the cortex area, and consequently, the assessment of post-stroke neurologic deficits could be a challenge. This study has established a modified transcranial MCAO model in which the MCA at the trunk is partially occluded either permanently or transiently via a small cranial window. Since the occlusion location is relatively proximal to the origin of the MCA, this model generates brain damage in both the cortex and striatum. Extensive characterization of this model has demonstrated an excellent long-term survival rate, even in aged mice, as well as readily detectable neurologic deficits. Therefore, the MCAO mouse model described here represents a valuable tool for experimental stroke research.

Autor destacado: Técnicas innovadoras y direcciones futuras en la investigación del ictus 

This protocol demonstrates a unique mouse stroke model with a medium-sized infarct and an excellent survival rate. This model allows preclinical stroke researchers to extend the ischemia duration, use aged mice, and assess long-term functional outcomes.

Un modelo de oclusión transcraneal modificado de la arteria cerebral media para estudiar los resultados del accidente cerebrovascular en ratones ancianos

In experimental stroke research, middle cerebral artery occlusion (MCAO) with an intraluminal filament is widely used to model ischemic stroke in mice. ...

Modelo de isquemia cerebral transitoria por oclusión de la arteria cerebral media

Transient Middle Cerebral Artery Occlusion Model of Stroke

Stroke stands as a major cause of death or chronic disability globally. Nevertheless, existing optimal treatments are limited to reperfusion therapies during the acute phase of ischemic stroke. To gain insights into stroke physiopathology and develop innovative therapeutic approaches, in vivo rodent models of stroke play a fundamental role. The availability of genetically modified animals has particularly propelled the use of mice as experimental stroke models.
In stroke patients, occlusion of the middle cerebral artery (MCA) is a common occurrence. Consequently, the most prevalent experimental model involves intraluminal occlusion of the MCA, a minimally invasive technique that doesn't require craniectomy. This procedure involves inserting a monofilament through the external carotid artery (ECA) and advancing it through the internal carotid artery (ICA) until it reaches the branching point of the MCA. After a 45 min arterial occlusion, the monofilament is removed to allow reperfusion. Throughout the process, cerebral blood flow is monitored to confirm the reduction during occlusion and subsequent recovery upon reperfusion. Neurological and tissue outcomes are evaluated using behavioral tests and magnetic resonance imaging (MRI) studies.

Autor destacado: Evaluación del daño isquémico del accidente cerebrovascular a través del modelo de oclusión de la arteria cerebral media 

This protocol describes the model of transient focal cerebral ischemia in mice through intraluminal occlusion of the middle cerebral artery. Additionally, examples of outcome assessment are shown using magnetic resonance imaging and behavioral tests.

Modelo de oclusión transitoria de la arteria cerebral media de accidente cerebrovascular

Stroke stands as a major cause of death or chronic disability globally. Nevertheless, existing optimal treatments are limited to reperfusion therapies ...