우리는 베스 라우흐와 위스콘신 대학의 자기 공명 이미징을위한 작은 동물 이미징 시설을 주셔서 감사합니다. 위스콘신 - 매디슨 대학에서 신경 외과의학과이 작품에 대한 자금을 제공했습니다.

MCAO 랫 모델 Presurgical 준비 무균 기술은 모든 생존 수술 절차를 사용해야합니다. 상업 살균제와 함께 수술 작업 표면을 소독하고 autoclaving하여 악기, 커튼, 거즈, 면봉, 봉합, 그리고 메스 블레이드 살균 외과 팩을 준비합니다. 수술 마스크, 헤어 보넷와 멸균 장갑을 착용하여야한다. Germinator 건조 구슬 살균기는 여러 쥐 수술을 한 세션 동안 할 수있다면 절차를 사이에 수술 악기를 resterilize하는 데 사용됩니다. 흡수성 패드 아래에 Prewarm 물 외피 homeothermic 담요과 장소 수술 중 쥐 저체온증을 방지하기 위해서. <ol><li> 유도 챔버에 자발적 신경성 쥐 (또는 원하는 다른 쥐의 변형) 장소와 함께 5% isoflurane (마취 기계는 1.0 L / 분, O 2 및 1.0 L / 분, N 2 O로 설정되어야합니다.) 마취를 유도 마취를 유지하기 위해 isoflurane 1~2%을 낮춥니다. </li><li> 양쪽 눈 모두에 인공 눈물 연고를 적용합니다. </li><li> 가위 (# 10 블레이드와 오스터 A5)를 사용하여 예비 절개 사이트 넘어 목구멍과 왼쪽 목에 영역을 쉐이브. </li><li> 거즈 패드에 Betadine을 적용하고 바깥쪽으로 나선형으로, 수술이 지역의 중심부터 피부를 소독. 비슷한 패턴의 패드를 움직이는 70 %의 에탄올을 포함하는 멸균 거즈 패드로 헹굼. 세 사이클의 총 단계를 모두 반복합니다. </li><li> 예비 절개 사이트를 따라 subcutaneously 0.5 % bupivacaine의 0.2 ML를 주사. </li><li> 무균 수술 드레이프와 살균 stockinette 또는 커버 플레이스 쥐. </li></ol> MCA의 과도 폐색 <ol start="7"><li> 운영 현미경, 복부 정중선 절개가 수행되고 표면 근막을 해부합니다. </li><li> 마지막으로 sternomastoid 근육, digastric (쉽게 그 반짝 이는 흰색 건의 부분을 통해 식별),기도를 통해 정중선 자리 sternohyoid, : 표면 근막 아래,이 삼각형을 형성 왼쪽 세 근육에 선의 조직입니다. </li><li> 주의 샤프하고 무딘 절개는 경동맥 (독점 무딘 절개가 실수로 조직 손상을 최소화하기 위해 일부로 선호있을 수 있습니다)를 파악하기 위해 삼각형 내에서 수행됩니다. , 외부 내부 및 일반 경동맥 동맥은 (ECA, ICA, CCA) 노출됩니다. 경동맥은 크고 가시 펄스입니다. 미주 신경은 일반적으로 내부 경동맥 동맥 모두의 측면을 따라 자, 이제 볼 수 있으며, 크게 일반 및 내부 경동맥 동맥에서 해부하는 것입니다. </li><li> 두 ECA의 지점은 다음 첫 번째 분기 medially 제목 두 번째 지점은 옆으로 향하고 급격하게 해부하고 있습니다. 두 가지가 큰 혈관을 동원 더욱 쉽게 허용하는, 불로 지졌죠 및 절단됩니다. </li><li> ECA는 이제 더 rostrally 해부하는 것입니다. 설골을가 발생 될 수 있으며이 주동이의 절개의 범위를 제한합니다. 외부 경동맥은 6-0 실크 봉합사로 distally 최대한 떨어져 묶여 있습니다. </li><li> 또 다른 6-0 실크 봉합사는 ICA와 분기점 근처 ECA 주위에 느슨하게 배치됩니다. 폐색에 사용될 intraluminal 봉합 나중 단계에서 이곳을 거치는 것입니다로 혈관을 막다하지 않도록하십시오. </li><li> Microsurgical 클립은 분기점 근처 일반 및 내부 경동맥 동맥에 표시됩니다. </li><li> 초기 부분 arteriotomy은 외부 경동맥에있는 두 개의 실크 봉합사의 유대 사이에 생성됩니다. </li><li> microsurgical 클립이있는 CCA쪽으로 ECA 루멘으로의 둥근, 실리콘 코팅 팁에서 꼬임 2.0 cm로 4-0 monofilament 나일론 봉합사의 2.2 -3.0 cm 길이를, 아래 소개합니다. 이러한 봉합은 (Doccol 공단, 레들랜즈, CA, 미국) 상업적으로 사용할 수 있습니다. 선거 유세 및 위치 ECA와 ICA의 분기점 아래의 그루터기를 무료로 ECA의 나머지 부분을 (부분 arteriotomy의 사이트에서) 절단, 이것은 더 쉽게 intraluminal 봉합이 ICA에 슬라이드 수 있습니다. </li><li> intraluminal 나일론 봉합사를 안전하고 출혈을 방지하고, 다음 ICA에서 microvascular 클립을 제거하는 ECA 스텀프 주변 실크 봉합사를 조이십시오. 출혈를 확인하기 위해 그것을 제거하기 전에 천천히 클립을 엽니다. </li><li> 중간 대뇌 동맥 (MCA)에 ECA에서 ICA 루멘으로 나일론 봉합사를 발전 계속합니다. 이 길이는 일반적으로 18-20밀리미터하고 삽입하기 전에 봉합에 꼬임을 배치하는 이유입니다. 나일론 봉합사의 변수 길이가 삽입되면 저항이 느낄 수 있습니다. 이 많은 선박 외부 여전히 현재 나일론 봉합사의가 발생하면, 그것은 봉합 가능성이 (아래 참고 참조) pterygopalatine 동맥을 입력을 나타냅니다. 후퇴와 곡선 봉합사가 약간 더 medially 실행되는, ICA 따라 계속합니다. 또한, PPA의 기원에 절개가 더 나은 경로를 시각화하기 위해 할 수 있습니다intraluminal 필라멘트니다. 저항이에 있으며 2cm kinked 위치 이후에 생각 때까지 나일론 봉합사를 삽입 계속합니다. 이 시점에서, intraluminal 봉합은 MCA의 출처를 차단했습니다. MCA 폐색은 레이저 도플러 유량계를 (한 장비 소스 재료 테이블을 참조)를 사용하여 지역 대뇌 혈류의 감소를 모니터링하여 확인하실 수 있습니다. 또한 intraluminal 봉합이 선박의 사고 삽관법을 피하기 위해, 원하는 경우 ICA의 해제 pterygopalatine 동맥의 기원이 직접 떨어져 묶여있을 수 있습니다. </li><li> 타이머 및 기록 폐색 시작 시간을 시작합니다. </li><li> CCA에서 microclip를 제거합니다. </li><li> 3-0 실크 봉합사 (간단한 연속 패턴 reperfusion에 대한 재조사 용이하게합니다)와 함께 신속하게 절개를 (진피, panniculus carnosus, 피하 조직 층) 닫고 조심스럽게 복구 케이지에 쥐를 놓습니다. 코와 입 주위 케이지 바닥 침구 소재 및 마취에서 모니터 복구 무료입니다 있는지 확인합니다. </li></ol> MCA의 혈류의 복원 (reperfusion) <ol start="21"><li> 폐색 기간이 종료해야 직전, 쥐를 다시 마취 Betadine 70 %의 에탄올 (3주기, 이전과) 함께 절개 사이트를 소독하고 닫는 봉합을 제거하여 절개를 다시 엽니다. </li><li> 이전처럼, CCA에 microclip 놓으십시오. </li><li> 봉합사의 끝이 ICA를 통해 볼 때까지 ICA에서 occluding의 봉합의 파트를 철회가. 완전히 ICA / ECA에서 봉합사를 제거하지 마십시오! </li><li> intraluminal 봉합사의 끝을 위 ICA에 microclip 놓으십시오. </li><li> 완전히 occluding의 봉합사를 제거하고 단단히 ECA 스텀프를 묶을. 폐색의 기록 엔드 (reperfusion 시작) 시간. </li><li> ICA에서 microclip를 제거합니다. </li><li> CCA에서 microclip를 제거합니다. </li><li> 멸균 생리 여러 방울과 함께 지역을 축축하게하다 간단한 중단 패턴을 사용하여 3-0 실크 봉합사와 절개의 레이어를 (진피, panniculus carnosus, 피하 조직) 닫습니다. </li><li> 복막 공간에 (당신의 제도적 지침에 따라 또는 기타 적절한 사후 수술 진통제) 0.05 밀리그램 / kg buprenorphine을 관리할 수 있습니다. </li><li> prewarmed 생리 intraperitoneally의 5cc를 주입. 이것은 복구 단계에서 수화를 제공합니다. </li><li> 마취에서 암흑의 복구를 모니터링합니다. </li><li> 쥐가 회복되면 꼬리로 쥐를 개최하고 쥐가 양쪽을 설정할 수 있는지 여부를 관찰하여 경색의 행동 표시를위한 시험. 한쪽으로 컬링은 예정입니다. 간단한 점수 비늘이 (토론 참조) 초기 이후 경색 behavorial 기능을 기록하는 데 사용할 수 있습니다. </li><li> buprenorphine (위와 동일 투여)의 추가 주사는 통증의 24 시간을위한 모든 6-8시간 부여해야합니다. 동물 불편의 흔적을 보여주는 경우 진통제를 확장합니다. </li></ol> 대표 결과 <img src="/files/ftp_upload/1978/1978fig1.jpg" alt="그림 1" /> 그림 1. endovascular 봉합사에 의해 중간 대뇌 동맥의 폐색이. 쥐의 두개골 순환 시스템의 단순화 그림은 MCA의 출처를 occluding 실리콘 코팅 intraluminal 봉합과 함께 표시됩니다. 왼쪽 ECA의에서 OA 및 ST 지점은 출혈도 잡았 및 ECA 그루터기 주위 봉합의 넥타이는 장소에 intraluminal 봉합을 보유하고 있습니다. ACA, 앞의 대뇌 동맥, BA, 두개골 기저부의 동맥, CCA, 일반 경동맥, ECA, 외부 경동맥, ICA, 내부 경동맥, MCA, 중간 대뇌 동맥, OA, 후두 동맥, PCA, 후부 대뇌 동맥, PComA, 사후 통신 동맥, PPA, pterygopalatine 동맥, ST, 우수한 갑상선 동맥. 사사키 외. 4 리 3 적응 그림. <img src="/files/ftp_upload/1978/1978fig2.jpg" alt="그림 2" /> 그림 2. 쥐의 뇌 24 시간 코로나 섹션의 대표 자기 공명 이미징 1 시간 과도 MCAO 후. 초점 국소 빈혈을 동반 뇌 부종은 T2 - 가중 MRI 이미지 시각이다. 경색 영역 T2 이미지 (밝은) hyperintense 나타납니다. 비슷한 경색 패턴은 이러한 확산 - 가중 이미지와 5 단계를 매핑 겉보기 확산 계수와 같은보다 고급 MRI 기술을 볼 수 있습니다. <img src="/files/ftp_upload/1978/1978fig3.jpg" alt="그림 3" /> 그림 3. 쥐 두뇌의 대표 코로나 섹션 1 시간 과도 MCAO 후 TTC 24시간 물들일. TTC의 얼룩은 그림 2에 표시된 것과 같은 쥐의 대뇌 피질과 striatum의 흰색 (흠없는) infarcted 영역을 보여줍니다. 결정 최종 경색 영역 histologically T2 병변보다 약간 작은 수 있지만 초점 허혈성 병변의 일반적인 패턴이, MRI T2 - 가중 영상에서 본 것과 유사한입니다.

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저자는 공개하지 충돌 관심이 없습니다. 이 프로토콜은 실험 동물의 사용을위한 건강 지침 국립 연구소에 의해 의학 및 공중 보건과 abides의 위스콘신 - 매디슨 대학 학교 기관 애니멀 케어 및 사용위원회에 의해 승인되었습니다.

대뇌 국소 빈혈의 설치류 모델은 글로벌 또는 초점과 같은 가역 또는 돌이킬으로 분류하실 수 있습니다. 우리는 인간의 뇌졸중 환자에서 다음과 같은 recanalization을 발생할 수 reperfusion 부상을 모방하기 위해 가역 초점 국소 빈혈 모델을 사용합니다. 동안 쥐의 주 인간, 윌리스와 일관성이 경색 볼륨 6 leptomeningeal anastomoses 결과의 서클로 인한 광범위한 intracranial 부수적인 순환과 유사한 두개골 순환의 장점. 경색의 크기는 70-10 normotensive 쥐에 비해 초점 대뇌 국소 빈혈에 노출 SHRs 더욱이기 때문에 우리는 저절로 신경성 쥐 (SHR) 변형을 사용합니다. SHRs의 행정 유도도 더 일관성 있고 다른 일반적으로 사용되는 종자 11보다 사망률을 생성할 수 있습니다. 변동 경색 볼륨의 다양성에 추가할 수 있기 때문에뿐만 아니라, 생리적 매개 변수, 수술 전반에 걸쳐 모니터링해야합니다, 이러한 매개 변수는 허혈성 부상에게 2,12 증명했다 수있는 혈압, 동맥 O 2, CO 2 레벨, 저체온증과 고혈당증를 포함 . 그것이 필수적인 수술 중에 thermoregulatory 가열 패드에 밀고를 삽입, 따라서의 연결 허혈성 손상의 정도를 완화하고, 저체온 수 있기 때문에 특정 관심사입니다. 우리는 상업 경색 크기 13-15의 일관성을 향상하기 위해이 절차에 실리콘 코팅 봉합을 준비하는 회사들도 있습니다. 전통적으로, MCA를 막다하는 데 사용 intraluminal 봉합은 불꽃 - 반올림 3-0 나일론 봉합사 팁 또는 코팅 작은 구슬 접착제 16로 봉합 팁를 뜨거운 아교 총을 사용하여 준비하고 있습니다. 이러한 절차는 특정 암흑의 혈관 직경에 맞는 치료를 찾는 전에 폐색에 여러 번 시도해야 할 수도 있습니다, 따라서 다양한 팁 직경과 함께 봉합을 생산합니다. 이 동영상에 설명되어있는 MCAO 방법에 대한 자세한 차이는 부수적인 혈액 흐름 6,9을 줄이기 위해 순수한 대뇌 피질의 경색 17 및 MCA와 ipsilateral 일반적인 경동맥의 동시 폐색을하기 위해 lenticulostriate 지점을 살려주는 더 말초 폐색을 포함합니다. 뇌졸중의 기능적 효과는 특정 작업에 적자가 단순한 점수 규모에 반영하는 행동 테스트의 다양한 사용 평가하실 수 있습니다. 예를 들어, Bederson 외. 18 강화된 신체 위치, 수평 밀어 비대칭 저항, 그리고 오픈 필드 돌고 행동 forelimb 굴곡의 범위에 신경 점수 등급 쥐를 개발하였습니다. 고가와 다른 적자를 전시없는 경우 바닥에 두 앞발을 확장 쥐 평점 있었다 &quot;일반 (0)&quot;, contralateral forelimb 굴곡과 쥐에만 &quot;보통 결손 (1)&quot;로 분류되었다 반면. &quot;심한 학년 2&quot;쥐가 측면 강제로 contralateral 측면에 감소 저항을 표시하고 &quot;심한 학년 3&quot;쥐 또한 행동을 휘감은에 종사. 낮은 등급 행동 적자는 항상 다음 높은 학년 관찰 (예, 등급 2도 forelimb 굴곡을 표시 3 동물) 및 이러한 점수는 경색의 크기 18 차이 예측 하였다. 따라서, 이러한 단순한 채점 시스템은 행정의 기능 적자의 급속한 일관성 세미 양적 평가 수 있습니다. 대뇌 경색의 범위 측정은 일반적으로 TTC, cresyl 바이올렛 (Nissl는 얼룩) 또는 hematoxylin 및 eosin를 사용하여 조직 손상에 대한 histological 염색법에 의해 수행됩니다. 를 포함하여 확산 - 가중 폐색 후, 조직을 수확 필요없이 각각의 쥐의 경색 볼륨의 결정에 대한 허용 초기 시간 지점에서 경색을 시각화하기 위해 MRI. 자기 공명 이미징 기술, 이미징 MCAO 후 밀고 있지만 이전에 치료 관리는 변화의 혼란함을 주죠 효과를 감소, 모든 실험 및 제어 동물이 시작 유사한 뇌졸중을 경험하는 조사의 신뢰를 제공, 이것은 스트로크에 따라 neuroprotective 치료의 효능을 결정하기위한 연구에 특히 가치가있다 뇌졸중 유도 인치

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		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td> 4-0 Nylon suture</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Doccol Corporation</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>2-3 mm silicon coating length, 0.39 mm tip diameter</td>
</tr>
<tr>
<td>Spontaneously hypertensive rats</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Charles River Laboratories</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>290-300 g, male</td>
</tr>
<tr>
<td>Gaymar T/Pump thermoregulatory pump and pads</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Gaymar Industries</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Vetroson V-10 bipolar electrosurgical unit</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Summit Hill Laboratories</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Germinator 500 glass bead sterilizer</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>CellPoint Scientific </td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Vasamedics Bpm2Laserflo blood perfusion monitor</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>TSI Inc.</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

focal cerebral ischemia model by endovascular suture occlusion of the middle cerebral artery in the rat

행정 장애 1 전 세계 성인 사망의 세 번째 주요 원인의 주요 원인이다. 인간의 뇌졸중에서 높은 변수 임상 상태가 존재, 초점 국소 빈혈의 동물 모델의 개발에, 그러나 실험적으로 유도 경색 볼륨의 재현성을 달성하는 것은 필수적입니다. 쥐는 비교적 낮은 동물 축산 비용과 인간 2,3의하기 위해 두개골 순환의 유사성으로 인해 뇌졸중에 널리 사용되는 동물 모델입니다. 인간에서는, 중간 대뇌 동맥 (MCA)가 가장 일반적으로 뇌졸중 syndromes와 MCA 폐색 (MCAO)의 여러 방법에 영향을받습니다 것은 동물 모델에서이 임상 증후군을 모방하기 위해 설명되었습니다. recanalization은 일반적으로 폐색 기간 후에 인간, reperfusion에 급성 뇌졸중에 따라 발생하기 때문에 이러한 모델의 많은에 포함되었습니다. 이 비디오에서는, 우리는 저절로 신경성 쥐 (SHR)에서 일시 endovascular 봉합 MCAO 모델을 보여줍니다. 실리콘 팁 코팅 필라멘트가 reperfusion 다음 60 분 동안 MCA의 기원에 intraluminally 배치됩니다. 최적의 폐색 기간이 같은 위스타이나 스프 라그 - 돌리 등 다른 쥐의 변종에 따라 다를 수 있습니다. 쥐에서 뇌졸중의 여러 행동 지표가 표시됩니다. 초점 국소 빈혈은 T2 - 가중 자기 공명 이미지를 사용하여 확인 24 시간 MCAO 후 2,3,5 - triphenyltetrazolium 염화물 (TTC)와 두뇌 섹션을 얼룩에 의해. 것입니다

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Focal Cerebral Ischemia Model by Endovascular Suture Occlusion of the Middle Cerebral Artery in the Rat

쥐에서 허혈성 뇌 손상 외과 유도는 뇌졸중 연구 널리 사용되는 모델입니다. 여기서 우리는 중간 대뇌 동맥의 폐색에 의해 초점 대뇌 국소 빈혈의 유도를 보여줍니다. histological 얼룩 및 자기 공명 영상에 의해 발생하는 경색의 시각화도 표시됩니다.

쥐 중간 대뇌 동맥의 폐색의 Endovascular 봉합사에 의해 초점 대뇌 국소 빈혈 모델

Stroke is the leading cause of disability and the third leading cause of death in adults worldwide1. In human stroke, there exists a highly variable ...

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Research

JoVE Journal

Neuroscience

79.4K 조회수.  University of Wisconsin-Madison. 쥐에서 허혈성 뇌 손상 외과 유도는 뇌졸중 연구 널리 사용되는 모델입니다. 여기서 우리는 중간 대뇌 동맥의 폐색에 의해 초점 대뇌 국소 빈혈의 유도를 보여줍니다. histological 얼룩 및 자기 공명 영상에 의해 발생하는 경색의 시각화도 표시됩니다.

비디오: Focal Cerebral Ischemia Model by Endovascular Suture Occlusion of the Middle Cerebral Artery in the Rat

Lateral Chronic Cranial Window Preparation Enables In Vivo Observation Following Distal Middle Cerebral Artery Occlusion in Mice

Focal cerebral ischemia (i.e., ischemic stroke) may cause major brain injury, leading to a severe loss of neuronal function and consequently to a host of motor and cognitive disabilities. Its high prevalence poses a serious health burden, as stroke is among the principal causes of long-term disability and death worldwide1. Recovery of neuronal function is, in most cases, only partial. So far, treatment options are very limited, in particular due to the narrow time window for thrombolysis2,3. Determining methods to accelerate recovery from stroke remains a prime medical goal; however, this has been hampered by insufficient mechanistic insights into the recovery process. Experimental stroke researchers frequently employ rodent models of focal cerebral ischemia. Beyond the acute phase, stroke research is increasingly focused on the sub-acute and chronic phase following cerebral ischemia. Most stroke researchers apply permanent or transient occlusion of the MCA in mice or rats. In patients, occlusions of the MCA are among the most frequent causes of ischemic stroke4. Besides proximal occlusion of the MCA using the filament model, surgical occlusion of the distal MCA is probably the most frequently used model in experimental stroke research5. Occlusion of a distal (to the branching of the lenticulo-striate arteries) MCA branch typically spares the striatum and primarily affects the neocortex. Vessel occlusion can be permanent or transient. High reproducibility of lesion volume and very low mortality rates with respect to the long-term outcome are the main advantages of this model. Here, we demonstrate how to perform a chronic cranial window (CW) preparation lateral to the sagittal sinus, and afterwards how to surgically induce a distal stroke underneath the window using a craniotomy approach. This approach can be applied for sequential imaging of acute and chronic changes following ischemia via epi-illuminating, confocal laser scanning, and two-photon intravital microscopy.

Lateral Chronic Cranial Window Preparation Enables In Vivo Observation Following Distal Middle Cerebral Artery Occlusion in Mice

Surgical occlusion of a distal middle cerebral artery branch (MCAo) is a frequently used model in experimental stroke research. This manuscript describes the basic technique of permanent MCAo, combined with the insertion of a lateral cranial window, which offers the opportunity for longitudinal intravital microscopy in mice.

측면 만성 두개골 창 준비 활성화<em&gt; 생체</em&gt; 마우스의 말초 중간 대뇌 동맥 폐색에 따라 관측

Focal cerebral ischemia (i.e., ischemic stroke) may cause major brain injury, leading to a severe loss of neuronal function and consequently to a host of ...

연구

신경과학

Effects of Blast-induced Neurotrauma on Pressurized Rodent Middle Cerebral Arteries

Though there have been studies on the histopathological and behavioral effects of blast exposure, fewer have been dedicated to blast&#39;s cerebral vascular effects. Impact (i.e., non-blast) traumatic brain injury (TBI) is known to decrease pressure autoregulation in the cerebral vasculature in both humans and experimental animals. The hypothesis that blast-induced traumatic brain injury (bTBI), like impact TBI, results in impaired cerebral vascular reactivity was tested by measuring myogenic dilatory responses to reduced intravascular pressure in rodent middle cerebral arterial (MCA) segments from rats subjected to mild bTBI using an Advanced Blast Simulator (ABS) shock tube. Adult, male Sprague-Dawley rats were anesthetized, intubated, ventilated and prepared for Sham bTBI (identical manipulation and anesthesia except for blast injury) or mild bTBI. Rats were randomly assigned to receive Sham bTBI or mild bTBI followed by sacrifice 30 or 60 min post-injury. Immediately after bTBI, righting reflex (RR) suppression times were assessed, euthanasia at the time points post-injury was completed, the brain was harvested and the individual MCA segments were collected, mounted and pressurized. As the intraluminal pressure perfused through the arterial segments was reduced in 20 mmHg increments from 100 to 20 mmHg, MCA diameters were measured and recorded. With decreasing intraluminal pressure, MCA diameters steadily increased significantly above baseline in the Sham bTBI groups while MCA dilator responses were significantly reduced (p &#60; 0.05) in both bTBI groups as evidenced by the impaired, smaller MCA diameters recorded for the bTBI groups. In addition, RR suppression in the bTBI groups was significantly (p &#60; 0.05) higher than in the Sham bTBI groups. MCA&#39;s collected from the Sham bTBI groups exhibited typical vasodilatory properties to decreases in intraluminal pressure while MCA&#39;s collected following bTBI exhibited significantly impaired myogenic vasodilatory responses to reduced pressure that persisted for at least 60 min after bTBI.

Here, we present a protocol to describe methods for ex vivo vascular reactivity determination following a primary blast traumatic brain injury (bTBI) using isolated, pressurized, rodent middle cerebral arterial (MCA) segments. bTBI induction is accomplished using a shock tube, also known as an Advanced Blast Simulator (ABS) device.

가압된 설치류에 폭발을 이용한 Neurotrauma의 효과 중간 대뇌 동맥

Though there have been studies on the histopathological and behavioral effects of blast exposure, fewer have been dedicated to blast&#39;s cerebral ...

Modeling Stroke in Mice: Transient Middle Cerebral Artery Occlusion via the External Carotid Artery

Stroke is the third most common cause of mortality and the leading cause of acquired adult disability in developed countries. To date, therapeutic options are limited to a small proportion of stroke patients within the first hours after stroke. Novel therapeutic strategies are being extensively investigated, especially to prolong the therapeutic time window. These current investigations include the study of important pathophysiological pathways after stroke, such as post-stroke inflammation, angiogenesis, neuronal plasticity, and regeneration. Over the last decade, there has been increasing concern about the poor reproducibility of experimental results and scientific findings among independent research groups. To overcome the so-called &#8220;replication crisis&#8221;, detailed standardized models for all procedures are urgently needed. As an effort within the &#8220;ImmunoStroke&#8221; research consortium (https://immunostroke.de/), a standardized mouse model of transient middle cerebral artery occlusion (MCAo) is proposed. This model allows the complete restoration of the blood flow upon removal of the filament, simulating the therapeutic or spontaneous clot lysis that occurs in a large proportion of human strokes. The surgical procedure of this &#8220;filament&#8221; stroke model and tools for its functional analysis are demonstrated in the accompanying video.

Different models of middle cerebral artery occlusion (MCAo) are used in experimental stroke research. Here, an experimental stroke model of transient MCAo via the external carotid artery (ECA) is described, which aims to mimic human stroke, in which the cerebrovascular thrombus is removed due to spontaneous clot lysis or therapy.

마우스에서 뇌졸중 모델링: 외부 경동맥을 통한 일시적인 중간 뇌동맥 폐색

Stroke is the third most common cause of mortality and the leading cause of acquired adult disability in developed countries. To date, therapeutic options ...

A Model for Encephalomyosynangiosis Treatment after Middle Cerebral Artery Occlusion-Induced Stroke in Mice

There is no effective treatment available for most patients suffering with ischemic stroke, making development of novel therapeutics imperative. The brain's ability to self-heal after ischemic stroke is limited by inadequate blood supply in the impacted area. Encephalomyosynangiosis (EMS) is a neurosurgical procedure that achieves angiogenesis in patients with moyamoya disease. It involves craniotomy with placement of a vascular temporalis muscle graft on the ischemic brain surface. EMS has never been studied in the setting of acute ischemic stroke in mice. The hypothesis driving this study is that EMS enhances cerebral angiogenesis at the cortical surface surrounding the muscle graft. The protocol shown here describes the procedure and provides initial data supporting the feasibility and efficacy of the EMS approach. In this protocol, after 60 min of transient middle cerebral artery occlusion (MCAo), mice were randomized to either MCAo or MCAo + EMS treatment. The EMS was performed 3-4 h after occlusion. The mice were sacrificed 7 or 21 days after MCAo or MCAo + EMS treatment. Temporalis graft viability was measured using nicotinamide adenine dinucleotide reduced-tetrazolium reductase assay. A mouse angiogenesis array quantified angiogenic and neuromodulating protein expression. Immunohistochemistry was used to visualize graft bonding with brain cortex and change in vessel density. The preliminary data here suggest that grafted muscle remained viable 21 days after EMS. Immunostaining showed successful graft implantation and increase in vessel density near the muscle graft, indicating increased angiogenesis. Data show that EMS increases fibroblast growth factor (FGF) and decreases osteopontin levels after stroke. Additionally, EMS after stroke did not increase mortality suggesting that protocol is safe and reliable. This novel procedure is effective and well-tolerated and has the potential to provide information of novel interventions for enhanced angiogenesis after acute ischemic stroke.

The protocol aims to provide methods for encephalomyosynangiosis-grafting of a vascular temporalis muscle flap on the pial surface of ischemic brain tissue-for the treatment of non-moyamoya acute ischemic stroke. The approach's efficacy in increasing angiogenesis is evaluated using a transient middle cerebral artery occlusion model in mice.

마우스에서 중뇌동맥 폐색 유발 뇌졸중 후 뇌근육활막증 치료 모델

There is no effective treatment available for most patients suffering with ischemic stroke, making development of novel therapeutics imperative. The ...

경두개 중뇌동맥 폐색 마우스 모델 구축

A Modified Transcranial Middle Cerebral Artery Occlusion Model to Study Stroke Outcomes in Aged Mice

In experimental stroke research, middle cerebral artery occlusion (MCAO) with an intraluminal filament is widely used to model ischemic stroke in mice. The filament MCAO model typically exhibits a massive cerebral infarction in C57Bl/6 mice that sometimes includes brain tissue in the territory supplied by the posterior cerebral artery, which is largely due to a high incidence of posterior communicating artery atresia. This phenomenon is considered a major contributor to the high mortality rate observed in C57Bl/6 mice during long-term stroke recovery after filament MCAO. Thus, many chronic stroke studies exploit distal MCAO models. However, these models usually produce infarction only in the cortex area, and consequently, the assessment of post-stroke neurologic deficits could be a challenge. This study has established a modified transcranial MCAO model in which the MCA at the trunk is partially occluded either permanently or transiently via a small cranial window. Since the occlusion location is relatively proximal to the origin of the MCA, this model generates brain damage in both the cortex and striatum. Extensive characterization of this model has demonstrated an excellent long-term survival rate, even in aged mice, as well as readily detectable neurologic deficits. Therefore, the MCAO mouse model described here represents a valuable tool for experimental stroke research.

저자 스포트라이트: 뇌졸중 연구의 혁신적인 기법과 미래 방향 

This protocol demonstrates a unique mouse stroke model with a medium-sized infarct and an excellent survival rate. This model allows preclinical stroke researchers to extend the ischemia duration, use aged mice, and assess long-term functional outcomes.

늙은 쥐의 뇌졸중 결과를 연구하기 위해 수정된 경두개 중뇌동맥 폐색 모델

In experimental stroke research, middle cerebral artery occlusion (MCAO) with an intraluminal filament is widely used to model ischemic stroke in mice. ...

중뇌동맥의 폐색에 의한 일과성 대뇌허혈의 모델

Transient Middle Cerebral Artery Occlusion Model of Stroke

Stroke stands as a major cause of death or chronic disability globally. Nevertheless, existing optimal treatments are limited to reperfusion therapies during the acute phase of ischemic stroke. To gain insights into stroke physiopathology and develop innovative therapeutic approaches, in vivo rodent models of stroke play a fundamental role. The availability of genetically modified animals has particularly propelled the use of mice as experimental stroke models.
In stroke patients, occlusion of the middle cerebral artery (MCA) is a common occurrence. Consequently, the most prevalent experimental model involves intraluminal occlusion of the MCA, a minimally invasive technique that doesn't require craniectomy. This procedure involves inserting a monofilament through the external carotid artery (ECA) and advancing it through the internal carotid artery (ICA) until it reaches the branching point of the MCA. After a 45 min arterial occlusion, the monofilament is removed to allow reperfusion. Throughout the process, cerebral blood flow is monitored to confirm the reduction during occlusion and subsequent recovery upon reperfusion. Neurological and tissue outcomes are evaluated using behavioral tests and magnetic resonance imaging (MRI) studies.

저자 스포트라이트: 중뇌동맥 폐색 모델을 통한 허혈성 뇌졸중 손상 평가 

This protocol describes the model of transient focal cerebral ischemia in mice through intraluminal occlusion of the middle cerebral artery. Additionally, examples of outcome assessment are shown using magnetic resonance imaging and behavioral tests.

뇌졸중의 일시적인 중뇌동맥 폐색 모델

Stroke stands as a major cause of death or chronic disability globally. Nevertheless, existing optimal treatments are limited to reperfusion therapies ...