אנו מודים בית ראוך של אוניברסיטת ויסקונסין חיה קטנה הדמיה מתקן עבור דימות בתהודה מגנטית. המחלקה לכירורגיה נוירולוגיות באוניברסיטת ויסקונסין במדיסון סיפק מימון עבור עבודה זו.

MCAO דגם עכברוש Presurgical ההכנות טכניקה אספטי אמור לשמש את כל הליכי הישרדות כירורגית. לחטא את משטח העבודה כירורגית עם חומר חיטוי מסחרי ולהכין חבילות כירורגיות סטריליות של מכשירים, וילונות, גזה, מטליות, התפרים, ולהבי אזמל ידי מעוקר. מסכה כירורגית, מצנפת שיער כפפות סטריליות צריך להיות משוחק. יבש Germinator חרוז מעקר משמש גם כדי לחטא מחדש מכשירי ניתוח בין אם הליכי ניתוחים עכברוש מרובים ייעשה במהלך אחד. שמיכה Prewarm מים במקטורן homeothermic מקום תחת משטח סופג כדי למנוע היפותרמיה של עכברוש במהלך הניתוח. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> המקום ספונטני עכברוש יתר לחץ דם (או זן עכברים אחרים של בחירה) לתוך תא אינדוקציה לגרום הרדמה עם 5% isoflurane (מכונת הרדמה צריך להיות מוגדר O 1.0 L / 2 דקות ו - 1.0 ליטר / דקה N 2 O). התחתון כדי% 1-2 isoflurane לשמור על הרדמה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החל מלאכותית משחה דמעות בשתי העיניים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לגלח את הגרון באזור צוואר שמאל מעבר לאזור החתך פוטנציאליים באמצעות קוצץ (אוסטר A5 עם להב 10 #). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החל בבטאדין לרפד גזה ולחטא את העור החל במרכז אזור הניתוח, מתפתלת החוצה. לשטוף עם תחבושת סטרילית המכילה 70% אתנול, העברת פנקס דפוס דומה. חזור על שני השלבים עבור סכום כולל של שלושה מחזורים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להזריק 0.2 מ&quot;ל של bupivacaine 0.5% מתחת לעור לאורך באתר חתך פוטנציאליים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> המקום עכברוש Stockinette כיסוי סטרילי או עם וילון כירורגי סטרילי. </li></ol> חסימה חלוף של MCA <ol start="7" style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תחת מיקרוסקופ ההפעלה, חתך קו האמצע הגחון מבוצע ואת fascia השטחית הוא גזור. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מתחת fascia השטחי, יש רקמה בלוטית לשרירים שמאל ושלושה היוצרים משולש: sternohyoid, הנמצאת על קו האמצע קנה הנשימה; digastric (המזוהה בקלות עם חלק tendinous מבריק לבן שלה); ולבסוף, השריר sternomastoid. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> דיסקציה חריפה ובוטה זהירות מתבצע בתוך המשולש כדי לזהות את העורק הראשי (דיסקציה קהה בלעדי עשוי להיות מועדף על ידי חלק למזער נזק לרקמות מקרי). עורקי התרדמה חיצוני, פנימי משותף (ECA, ICA, המרכז לאמנות עכשווית) נחשפים. העורק הראשי הוא גדול לעין פולסים. העצב התועה נראה זורם לאורך הפן לרוחב של שני עורקי הראש המשותף פנימיים הוא ניתח בחריפות את עורקי הראש נפוצים פנימי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שני סניפים ECA הם גזור אז בחריפות, את הסניף הראשון הכותרת מדיאלית ואת הסניף השני הכותרת רוחבית. ענפים שניהם צרוב וחותכים, אשר מאפשר בקלות רבה יותר בגיוס כלי גדול יותר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ECA הוא גזור עכשיו יותר rostrally. עצם הלשון ניתן נתקל והדבר יגביל את מידת לנתיחה מקורי. בעורק התרדמה החיצוני נקשר כמו distally האפשרי עם תפר 6-0 משי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תפר עוד 6-0 משי מונחת ברישול סביב ECA ליד הסתעפות עם הרשפ&quot;ת. הקפד לא כדי לחסום את כלי כמו תפר intraluminal לשמש חסימה יהיה עובר כאן בשלב מאוחר יותר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> קליפים Microsurgical ממוקמות על עורקי הראש נפוצים פנימי ליד הסתעפות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Arteriotomy חלקית הראשונית נוצרת בין שני לתפור עניבות משי על עורק הצוואר חיצוני. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להכניס 2.2 -3.0 ס&quot;מ אורך של תפר monofilament ניילון 4-0, עם 2.0 ס&quot;מ שריטה מ מעוגל קצהו סיליקון מצופה, לתוך לומן ECA מטה לכיוון המרכז לאמנות עכשווית שבה קליפ microsurgical ממוקם. תפרים אלה זמינים מסחרית (Doccol קורפ, Redlands, קליפורניה, ארה&quot;ב). חותכים את החלק הנותר של ECA (באתר של arteriotomy החלקי) לשחרר את הגדם ולמקם את הגדם מתחת הסתעפות של ECA ויק&quot;א, זה יהיה בקלות רבה יותר לאפשר תפר intraluminal להחליק לתוך ICA. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הדק את תפר משי סביב הגדם ECA כדי לאבטח את תפר ניילון intraluminal ולמנוע דימום, ולאחר מכן להסיר את הסרטון כלי הדם של ICA. פתח את הסיכה לפני הסרת לאט זה כדי לבדוק אם הדימום. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> המשך קידום תפר ניילון מ ECA כדי ICA לומן על עורק המוח האמצעי (MCA). אורך זה הוא בדרך כלל 18-20 מ&quot;מ הסיבה הצבת שריטה תפר לפני הכניסה. לאחר באורך משתנה של תפר ניילון מוכנס, התנגדות יורגשו. אם זה קורה עם הרבה תפר ניילון הנוכחי עדיין מחוץ הספינה, מעידה על כך תפר צפוי להיכנס עורק pterygopalatine (ראה הערה להלן). משוך לאחור עקומת תפר מעט להמשיך לאורך הרשפ&quot;ת, אשר ירוצו יותר מדיאלית. בנוסף, דיסקציה המוצא של PPA ניתן לעשות כדי להמחיש טוב יותר את הנתיבשל החוט intraluminal. המשך להכניס את תפר ניילון עד ההתנגדות היא הרגישה ואחרי עמדה 2 ס&quot;מ מפותל. בשלב זה, תפר intraluminal חסם את מקורם של MCA. MCA חסימה יכולה להיות מאושרת על ידי ניטור הפחתה בזרימת הדם במוח האזורית באמצעות flowmeter לייזר דופלר (ראה טבלה חומרים ממקור אחד ציוד). כמו כן לציין כי מקורו של העורק pterygopalatine הנחה של הרשפ&quot;ת יכול להיות קשור ישירות לדרך, אם העדיף, על מנת למנוע מקרי אינטובציה של כלי זה עם תפר intraluminal. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפעל את שעון העצר חסימה שיא הזמן להתחיל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את microclip מן המרכז לאמנות עכשווית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סגירת החתך (הדרמיס, מרפד carnosus, שכבות רקמה תת עורית) במהירות עם תפר 3-0 משי (דפוס מתמשך פשוט יקל על פתיחתו מחדש של reperfusion) ובזהירות המקום חולדה בכלוב התאוששות. בדוק את רצפת כלוב סביב האף והפה חופשיים החומר מצעים התאוששות לפקח מן ההרדמה. </li></ol> שחזור זרימת הדם MCA (reperfusion) <ol start="21" style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> זמן קצר לפני תקופת חסימה צריכה להסתיים, להרדים מחדש את העכברוש, לחטא את האתר חתך בבטאדין אתנול ו 70% (3 מחזורים, כמו קודם) ולפתוח מחדש את החתך על ידי הסרת התפרים הסגירה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים microclip על המרכז לאמנות עכשווית, כמו קודם. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> למשוך את תפר occluding חלקית של ICA עד סוף תפר גלוי דרך ICA. לא לגמרי להסיר את תפר של ICA / ECA! </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים microclip על ICA מעל בסוף תפר intraluminal. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להסיר לחלוטין את תפר occluding בחוזקה לקשור את הגדם ECA. שיא סוף חסימה (להתחיל reperfusion) זמן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את microclip של ICA. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את microclip מן המרכז לאמנות עכשווית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחלח את האזור עם מספר טיפות של תמיסת מלח סטרילית לסגור את החתך שכבות (הדרמיס, מרפד carnosus, רקמה תת עורית) עם תפר 3-0 באמצעות דפוס משי קטע פשוט. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ניהול 0.05 מ&quot;ג / ק&quot;ג עצירות (או משכך כאבים אחר המתאים שלאחר הניתוח שלהלן הנחיות מוסדיים שלך) לחלל הצפק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הזרק 5cc של intraperitoneally מלוחים prewarmed. זה יספק לחות בשלב ההתאוששות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צג התאוששות של חולדה מן ההרדמה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אחרי החולדה התאוששה, מבחן אינדיקציה התנהגותית של אוטם ידי החזקת את העכברוש בזנבו והתבוננות אם עכברוש יכול לפנות לשני הצדדים. קרלינג לצד אחד בלבד צפוי. קשקשים הניקוד פשוט יכול לשמש כדי להקליט תפקוד הראשונית שלאחר האוטם behavorial (ראה דיון). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> זריקות נוספות של עצירות (מינון כמו לעיל) יש לתת כל 6 עד 8 שעות במשך 24 שעות של הקלה בכאב. הרחבת כאבים אם החיה מראה סימנים של אי נוחות. </li></ol> נציג תוצאות <img src="/files/ftp_upload/1978/1978fig1.jpg" alt="איור 1" /> באיור 1. חסימה של עורק המוח האמצעי על ידי תפר endovascular. דיאגרמה פשוטה של מערכת הדם גולגולת של עכברוש מוצג עם תפר סיליקון מצופה intraluminal occluding מקורם של MCA. OA וענפים ST מעל ECA שמאל כבר ligated ועניבה תפר סביב הגדם ECA מחזיקה תפר intraluminal במקום. ACA, עורק המוח הקדמי: BA, basilar העורק; המרכז לאמנות עכשווית, העורק הראשי משותפת; ECA, חיצוני עורק התרדמה, ICA, עורק התרדמה הפנימי, MCA, עורק המוח האמצעי, OA, עורק העורפית, PCA, עורק המוח האחורי; PComA, האחורי תקשורת העורק; PPA, עורק pterygopalatine: ST, עורק התריס מעולה. איור עיבוד סאסאקי et al. 4 ולי 3. <img src="/files/ftp_upload/1978/1978fig2.jpg" alt="איור 2" /> איור 2. נציג תהודה מגנטית סעיפים העטרה של המוח עכברוש 24 שעות לאחר חלוף MCAO 1 שעה. בצקת מוחית המלווה איסכמיה היא מוקד דמיינו T2 משוקלל תמונות MRI. אזור האוטם מופיע hyperintense (בהיר) על תמונות T2. דפוסי האוטם דומים ניתן לראות יותר עם ​​טכניקות מתקדמות כגון MRI-הדמיה דיפוזיה משוקלל מקדם דיפוזיה לכאורה מיפוי 5. <img src="/files/ftp_upload/1978/1978fig3.jpg" alt="איור 3" /> איור 3. סעיפים העטרה נציג של המוח עכברוש מוכתם TTC 24 שעות לאחר חלוף MCAO 1 שעה. מכתים TTC מגלה לבן (בלא כתם) infarcted אזורים בקליפת המוח בסטריאטום ב עכברוש זהה לזה שמוצג באיור 2. שים לב כי הדפוס הכללי של נגעים איסכמיים מוקד דומה לזה לראות את T2 משוקלל בתמונות MRI, אם כי באזור האוטם הסופי נקבע בהיסטולוגיה עשוי להיות מעט קטן יותר מאשר הפגיעה T2.

<ol>
	<li>van Gijn, J., Dennis, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Issues+and+answers+in+stroke+care.">Issues and answers in stroke care.</a> Lancet. 352, SIII23-27 (1998).</li><li>Macrae, I. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+models+of+focal+cerebral+ischaemia.">New models of focal cerebral ischaemia.</a> British Journal of Clinical Pharmacology. 34, 302-302 (1992).</li><li>Lee, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morphology+of+cerebral+arteries.">Morphology of cerebral arteries.</a> Pharmacol Ther. 66, 149-173 (1995).</li><li>Sasaki, M., Honmou, O., Kocsis, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+rat+middle+cerebral+artery+occlusion+model+and+intravenous+cellular+delivery.">A rat middle cerebral artery occlusion model and intravenous cellular delivery.</a> Methods Mol Biol. 549, 187-195 (2009).</li><li>Br&#229;tane, B. T., Bastan, B., Fisher, M., Bouley, J., Henninger, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ischemic+lesion+volume+determination+on+diffusion+weighted+images+vs.+apparent+diffusion+coefficient+maps.">Ischemic lesion volume determination on diffusion weighted images vs. apparent diffusion coefficient maps.</a> Brain Res. 1279, 182-188 (2009).</li><li>Chen, S. T., Hsu, C. Y., Hogan, E. L., Maricq, H., Balentine, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+model+of+focal+ischemic+stroke+in+the+rat:+reproducible+extensive+cortical+infarction.">A model of focal ischemic stroke in the rat: reproducible extensive cortical infarction.</a> Stroke. 17, 738-743 (1986).</li><li>Dogan, A., Ba&#351;kaya, M. K., Rao, V. L., Rao, A. M., Dempsey, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intraluminal+suture+occlusion+of+the+middle+cerebral+artery+in+Spontaneously+Hypertensive+rats.">Intraluminal suture occlusion of the middle cerebral artery in Spontaneously Hypertensive rats.</a> Neurol Res. 20, 265-270 (1998).</li><li>Ogata, J., Fujishima, M., Morotomi, Y., Omae, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cerebral+infarction+following+bilateral+carotid+artery+ligation+in+normotensive+and+spontaneously+hypertensive+rats:+a+pathological+study.">Cerebral infarction following bilateral carotid artery ligation in normotensive and spontaneously hypertensive rats: a pathological study.</a> Stroke. 7, 54-60 (1976).</li><li>Brint, S., Jacewicz, M., Kiessling, M., Tanabe, J., Pulsinelli, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Focal+brain+ischemia+in+the+rat:+methods+for+reproducible+neocortical+infarction+using+tandem+occlusion+of+the+distal+middle+cerebral+and+ipsilateral+common+carotid+arteries.">Focal brain ischemia in the rat: methods for reproducible neocortical infarction using tandem occlusion of the distal middle cerebral and ipsilateral common carotid arteries.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 8, 474-485 (1988).</li><li>Duverger, D., MacKenzie, E. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+quantification+of+cerebral+infarction+following+focal+ischemia+in+the+rat:+influence+of+strain,+arterial+pressure,+blood+glucose+concentration,+and+age.">The quantification of cerebral infarction following focal ischemia in the rat: influence of strain, arterial pressure, blood glucose concentration, and age.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 8, 449-461 (1988).</li><li>Coyle, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Different+susceptibilities+to+cerebral+infarction+in+spontaneously+hypertensive+(SHR)+and+normotensive+Sprague-Dawley+rats.">Different susceptibilities to cerebral infarction in spontaneously hypertensive (SHR) and normotensive Sprague-Dawley rats.</a> Stroke. 17, 520-525 (1986).</li><li>Slivka, A. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypertension+and+hyperglycemia+in+experimental+stroke.">Hypertension and hyperglycemia in experimental stroke.</a> Brain Res. 562, 66-70 (1991).</li><li>Bouley, J., Fisher, M., Henninger, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+between+coated+vs.+uncoated+suture+middle+cerebral+artery+occlusion+in+the+rat+as+assessed+by+perfusion/diffusion+weighted+imaging.">Comparison between coated vs. uncoated suture middle cerebral artery occlusion in the rat as assessed by perfusion/diffusion weighted imaging.</a> Neurosci Lett. 412, 185-190 (2007).</li><li>Schmid-Elsaesser, R., Zausinger, S., Hungerhuber, E., Baethmann, A., Reulen, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+critical+reevaluation+of+the+intraluminal+thread+model+of+focal+cerebral+ischemia:+evidence+of+inadvertent+premature+reperfusion+and+subarachnoid+hemorrhage+in+rats+by+laser-Doppler+flowmetry.">A critical reevaluation of the intraluminal thread model of focal cerebral ischemia: evidence of inadvertent premature reperfusion and subarachnoid hemorrhage in rats by laser-Doppler flowmetry.</a> Stroke. 29, 2162-2170 (1998).</li><li>Shimamura, N., Matchett, G., Tsubokawa, T., Ohkuma, H., Zhang, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+silicon-coated+nylon+suture+to+plain+nylon+suture+in+the+rat+middle+cerebral+artery+occlusion+model.">Comparison of silicon-coated nylon suture to plain nylon suture in the rat middle cerebral artery occlusion model.</a> J Neurosci Methods. 156, 161-165 (2006).</li><li>Longa, E. Z., Weinstein, P. R., Carlson, S., Cummins, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reversible+middle+cerebral+artery+occlusion+without+craniectomy+in+rats.">Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats.</a> Stroke. 20, 84-91 (1989).</li><li>Shigeno, T., McCulloch, J., Graham, D. I., Mendelow, A. D., Teasdale, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pure+cortical+ischemia+versus+striatal+ischemia.+Circulatory,+metabolic,+and+neuropathologic+consequences.">Pure cortical ischemia versus striatal ischemia. Circulatory, metabolic, and neuropathologic consequences.</a> Surgical neurology. 24, 47-51 (1985).</li><li>Bederson, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rat+middle+cerebral+artery+occlusion:+evaluation+of+the+model+and+development+of+a+neurologic+examination.">Rat middle cerebral artery occlusion: evaluation of the model and development of a neurologic examination.</a> Stroke. 17, 472-476 (1986).</li></ol>

המחברים אין אינטרסים מנוגדים לחשוף. פרוטוקול זה אושר על ידי טיפול בבעלי חיים מוסדיים ועדת השתמש בבית הספר באוניברסיטת ויסקונסין במדיסון לרפואה לבריאות הציבור פועלת לפי המכון הלאומי לבריאות הנחיות לשימוש בחיות מעבדה.

מודלים מכרסם של איסכמיה מוחית יכולה להיות מסווגת העולמי או מוקדי הפיך כמו או בלתי הפיך. אנו משתמשים במודל הפיך איסכמיה מוקד על מנת לחקות את הפגיעה reperfusion שעלול להתרחש recanalization הבאים לחולי שבץ אדם. בעוד חולדה מניות היתרון של מחזור הגולגולת דומה האדם, את זרימת נרחב בטחונות תוך גולגולתי עקב מעגל של וויליס leptomeningeal anastomoses תוצאות בכמויות האוטם עקבי 6. אנו משתמשים עכברוש יתר לחץ דם באופן ספונטני (SHR) זן בגלל גודל האוטם הוא יותר SHRs חשופים איסכמיה מוחית מוקד לעומת חולדות normotensive 7-10. אינדוקציה שבץ SHRs גם עקבית יותר ועלול ליצור תמותה נמוך יותר מאשר זנים נפוצים אחרים 11. בנוסף, פרמטרים פיזיולוגיים יש לעקוב לאורך כל הניתוח, מפני תנודות יכול להוסיף ההשתנות בכמויות האוטם; פרמטרים אלו כוללים לחץ דם עורקי O 2 ו-CO 2 רמות, היפותרמיה, ועל היפרגליקמיה, אשר יכול להחמיר פגיעה איסכמית 2,12 . היפותרמיה הוא מדאיג במיוחד משום שהוא יכול להפחית את מידת פגיעה עצבית איסכמית, ולכן הצבת חולדה על כרית חימום thermoregulatory במהלך הניתוח היא חיונית. אנו מעסיקים מוכן מסחרית סיליקון מצופה התפרים בהליך זה בניסיון להגדיל עקביות בגודל האוטם 13-15. באופן מסורתי, התפרים intraluminal להשתמש כדי לחסום את MCA הוכנו על ידי להבה עיגול טיפ 3-0 ניילון תפר או באמצעות אקדח דבק חם את קצה המעיל תפר עם דבק קטן חרוז 16. נהלים אלה לייצר התפרים בקטרים ​​קצה שונות, ובכך, עשויה לדרוש מספר ניסיונות על חסימה לפני מציאת תפר התואמת את קוטר כלי שיט של עכברוש נתון. וריאציות נוספות על השיטה MCAO המתואר וידאו זה כוללים חסימה דיסטלי יותר, חוסך את הענפים lenticulostriate כדי להיות אוטם קורטיקלי טהור 17, חסימה זמנית של השפעת MCA ו ipsilateral העורק הראשי משותף להפחית את זרימת הדם בטחונות 6,9. ההשפעות תפקודית של שבץ ניתן להעריך באמצעות מגוון של בדיקות התנהגותיות, שבו חסרים משימות ספציפיות באים לידי ביטוי בהיקף מניה פשוטה. לדוגמה, פיתחה Bederson et al. לדירוג 18 חולדות נוירולוגיות ציון על מידת כיפוף forelimb במצב גוף גבוה, עמידות אסימטרית לדחוף לרוחב, והתנהגות שדה פתוח מקיף. חולדות הן הארכת forelimbs על הרצפה כאשר מוגבה לא מציג גירעונות אחרים דורגו &quot;Normal (0)&quot;, ואילו בחולדות עם כיפוף forelimb הנגדי רק סווגו עם &quot;הגירעונות מתונה (1)&quot;. &quot;חמור 2 כיתה&quot; חולדות מוצגת התנגדות ירד בצד הנגדי לכוח לרוחב ו - &quot;חמור בדרגה 3&quot; חולדות עוסקת בנוסף מסתובבים התנהגויות. גירעונות התנהגותיים ציון נמוך נצפו תמיד בכיתה גבוהה הבא (למשל, כיתה 2 ו -3 בעלי חיים מוצג גם כיפוף forelimb) ועשרות אלה היו חזוי של ההבדלים בגודל האוטם 18. לכן, כגון מערכת ניקוד פשוטה מאפשר הערכה מהירה, וכמותיות עקבית של הגירעונות פונקציונלי משבץ. מדידה של היקף אוטם מוחי נעשה בדרך כלל על ידי צביעה היסטולוגית עבור נזק לרקמות באמצעות TTC, סגול cresyl (Nissl כתם) או hematoxylin ו eosin. תהודה מגנטית טכניקות, כולל דיפוזיה משוקלל MRI כדי להמחיש את האוטם בנקודות זמן מוקדם אחרי חסימה, לאפשר לקביעת נפח האוטם ב עכברוש בנפרד ללא צורך קצירת רקמות. זה חשוב במיוחד במחקרים שמטרתם לקבוע את יעילות הטיפול neuroprotective בעקבות שבץ; הדמיה את העכברוש לאחר MCAO אבל הממשל טיפול לפני נותן אמון החוקר כי כל חיות הניסוי ובקרה מנוסה משיכות דומה להתחיל, הפחתת תופעות בלבול של השתנות ב אינדוקציה שבץ.

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td> 4-0 Nylon suture</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Doccol Corporation</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>2-3 mm silicon coating length, 0.39 mm tip diameter</td>
</tr>
<tr>
<td>Spontaneously hypertensive rats</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Charles River Laboratories</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>290-300 g, male</td>
</tr>
<tr>
<td>Gaymar T/Pump thermoregulatory pump and pads</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Gaymar Industries</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Vetroson V-10 bipolar electrosurgical unit</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Summit Hill Laboratories</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Germinator 500 glass bead sterilizer</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>CellPoint Scientific </td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Vasamedics Bpm2Laserflo blood perfusion monitor</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>TSI Inc.</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

focal cerebral ischemia model by endovascular suture occlusion of the middle cerebral artery in the rat

שבץ הוא הגורם המוביל של נכות הגורם השלישי למוות בקרב מבוגרים ברחבי העולם 1. ב שבץ אדם, קיים מצב קליני משתנה מאוד; בפיתוח של מודלים בבעלי חיים של איסכמיה מוקדי, לעומת זאת, השגת שחזור של נפח האוטם המושרה בניסוי היא חיונית. החולדה היא מודל החיה בשימוש נרחב עבור שבץ בשל עלויות נמוכות יחסית בעלי חיים ועל הדמיון של זרימת הגולגולת שלו לזו של בני האדם 2,3. בבני אדם, עורק המוח האמצעי (MCA) מושפע לרוב תסמונות שבץ שיטות מרובות של MCA חסימה (MCAO) תוארו לחקות זו תסמונת קליניים במודלים של בעלי חיים. מכיוון recanalization נפוצה בעקבות שבץ חריף reperfusion, אדם לאחר תקופה של חסימה נכללה רבים של המודלים האלה. בסרטון הזה, אנחנו מדגימים את המודל חולף endovascular MCAO תפר בחולדה יתר לחץ דם באופן ספונטני (SHR). נימה עם ציפוי קצה סיליקון ממוקם intraluminally על המקור MCA במשך 60 דקות, ואחריו reperfusion. ראוי לציין, כי תקופת חסימה אופטימלית עשויים להשתנות זני עכברים אחרים, כגון Wistar או Sprague-Dawley. מדדים התנהגותיים כמה שבץ החולדה מוצגות. איסכמיה מרחק הוא אישר באמצעות T2 משוקלל תמונות תהודה מגנטית ועל ידי צביעת חלקים במוח עם כלוריד 2,3,5-triphenyltetrazolium (TTC) 24 שעות לאחר MCAO.

Watch this Scientific Journal Video about Focal Cerebral Ischemia Model by Endovascular Suture Occlusion of the Middle Cerebral Artery in the Rat at JoVE.com

Focal Cerebral Ischemia Model by Endovascular Suture Occlusion of the Middle Cerebral Artery in the Rat

אינדוקציה כירורגי של נזק מוחי איסכמי בחולדה הוא מודל בשימוש נרחב עבור מחקר שבץ. כאן אנו מדגימים את האינדוקציה של איסכמיה מוחית המוקד על ידי חסימה של עורק המוח האמצעי. ויזואליזציה של האוטם שהתקבל על ידי צביעה היסטולוגית ו דימות בתהודה מגנטית מוצג גם.

דגם מרחק איסכמיה מוחית על ידי ספיגה תפר Endovascular של עורק המוח התיכון עכברוש

Stroke is the leading cause of disability and the third leading cause of death in adults worldwide1. In human stroke, there exists a highly variable ...

focal-cerebral-ischemia-model-endovascular-suture-occlusion-middle

Research

JoVE Journal

Neuroscience

79.2K Views.  University of Wisconsin-Madison. אינדוקציה כירורגי של נזק מוחי איסכמי בחולדה הוא מודל בשימוש נרחב עבור מחקר שבץ. כאן אנו מדגימים את האינדוקציה של איסכמיה מוחית המוקד על ידי חסימה של עורק המוח האמצעי. ויזואליזציה של האוטם שהתקבל על ידי צביעה היסטולוגית ו דימות בתהודה מגנטית מוצג גם.

Video: Focal Cerebral Ischemia Model by Endovascular Suture Occlusion of the Middle Cerebral Artery in the Rat

Lateral Chronic Cranial Window Preparation Enables In Vivo Observation Following Distal Middle Cerebral Artery Occlusion in Mice

Focal cerebral ischemia (i.e., ischemic stroke) may cause major brain injury, leading to a severe loss of neuronal function and consequently to a host of motor and cognitive disabilities. Its high prevalence poses a serious health burden, as stroke is among the principal causes of long-term disability and death worldwide1. Recovery of neuronal function is, in most cases, only partial. So far, treatment options are very limited, in particular due to the narrow time window for thrombolysis2,3. Determining methods to accelerate recovery from stroke remains a prime medical goal; however, this has been hampered by insufficient mechanistic insights into the recovery process. Experimental stroke researchers frequently employ rodent models of focal cerebral ischemia. Beyond the acute phase, stroke research is increasingly focused on the sub-acute and chronic phase following cerebral ischemia. Most stroke researchers apply permanent or transient occlusion of the MCA in mice or rats. In patients, occlusions of the MCA are among the most frequent causes of ischemic stroke4. Besides proximal occlusion of the MCA using the filament model, surgical occlusion of the distal MCA is probably the most frequently used model in experimental stroke research5. Occlusion of a distal (to the branching of the lenticulo-striate arteries) MCA branch typically spares the striatum and primarily affects the neocortex. Vessel occlusion can be permanent or transient. High reproducibility of lesion volume and very low mortality rates with respect to the long-term outcome are the main advantages of this model. Here, we demonstrate how to perform a chronic cranial window (CW) preparation lateral to the sagittal sinus, and afterwards how to surgically induce a distal stroke underneath the window using a craniotomy approach. This approach can be applied for sequential imaging of acute and chronic changes following ischemia via epi-illuminating, confocal laser scanning, and two-photon intravital microscopy.

Lateral Chronic Cranial Window Preparation Enables In Vivo Observation Following Distal Middle Cerebral Artery Occlusion in Mice

Surgical occlusion of a distal middle cerebral artery branch (MCAo) is a frequently used model in experimental stroke research. This manuscript describes the basic technique of permanent MCAo, combined with the insertion of a lateral cranial window, which offers the opportunity for longitudinal intravital microscopy in mice.

הכנת חלון גולגולת כרוני לרוחב מאפשרת<em&gt; In vivo</em&gt; תצפית בעקבות העורקים התיכון ספיגה מוחין דיסטלי של עכברים

Focal cerebral ischemia (i.e., ischemic stroke) may cause major brain injury, leading to a severe loss of neuronal function and consequently to a host of ...

A Rat Model of Mild Intrauterine Hypoperfusion with Microcoil Stenosis

Intrauterine hypoperfusion/ischemia is one of the major causes of intrauterine/fetal growth restriction, preterm birth, and low birth weight. Most studies of this phenomenon have been performed in either models with severe intrauterine ischemia or models with gradient degree of intrauterine hypoperfusion. No study has been performed in a model on uniform mild intrauterine hypoperfusion (MIUH). Two models have been used for studies of MIUH: a model based on suture ligation of either side of the arterial arcade formed with the uterine and ovarian arteries, and a transient model based on clipping the bilateral ovarian arteries and aorta having patency. Those two rodent models of MIUH have some limitations, e.g., not all fetuses are subjected to MIUH, depending on their position in the uterine horn. In our MIUH model, all fetuses are subjected to a comparable level of intrauterine hypoperfusion. MIUH was achieved by mild stenosis of all four arteries feeding the uterus, i.e., the bilateral uterine and ovarian arteries.
Arterial stenosis was induced by metal microcoils wrapped around the feeding arteries. Producing arterial stenosis with microcoils allowed us to control, optimize, and reproduce decreased blood flow with very little inter-animal variability and a low mortality rate, thus enabling accurate evaluation. When microcoils with an inner diameter of 0.24 mm were used, the blood flow in both the placenta and fetus was mildly decreased (approximately 30% from the pre-stenosis level in the placenta). The offspring of our MIUH model clearly demonstrates long-lasting alterations in neurological, neuroanatomical and behavioral test results.

Mild intrauterine hypoperfusion was produced by artery stenosis with metal microcoils wrapped around the uterine and ovarian arteries in rats at embryonic day 17. This procedure produced prenatal hypoperfusion and intrauterine growth restriction.

מודל עכברוש של זילוח תוך רחמי קלה עם היצרות Microcoil

Intrauterine hypoperfusion/ischemia is one of the major causes of intrauterine/fetal growth restriction, preterm birth, and low birth weight. Most studies ...

Effects of Blast-induced Neurotrauma on Pressurized Rodent Middle Cerebral Arteries

Though there have been studies on the histopathological and behavioral effects of blast exposure, fewer have been dedicated to blast&#39;s cerebral vascular effects. Impact (i.e., non-blast) traumatic brain injury (TBI) is known to decrease pressure autoregulation in the cerebral vasculature in both humans and experimental animals. The hypothesis that blast-induced traumatic brain injury (bTBI), like impact TBI, results in impaired cerebral vascular reactivity was tested by measuring myogenic dilatory responses to reduced intravascular pressure in rodent middle cerebral arterial (MCA) segments from rats subjected to mild bTBI using an Advanced Blast Simulator (ABS) shock tube. Adult, male Sprague-Dawley rats were anesthetized, intubated, ventilated and prepared for Sham bTBI (identical manipulation and anesthesia except for blast injury) or mild bTBI. Rats were randomly assigned to receive Sham bTBI or mild bTBI followed by sacrifice 30 or 60 min post-injury. Immediately after bTBI, righting reflex (RR) suppression times were assessed, euthanasia at the time points post-injury was completed, the brain was harvested and the individual MCA segments were collected, mounted and pressurized. As the intraluminal pressure perfused through the arterial segments was reduced in 20 mmHg increments from 100 to 20 mmHg, MCA diameters were measured and recorded. With decreasing intraluminal pressure, MCA diameters steadily increased significantly above baseline in the Sham bTBI groups while MCA dilator responses were significantly reduced (p &#60; 0.05) in both bTBI groups as evidenced by the impaired, smaller MCA diameters recorded for the bTBI groups. In addition, RR suppression in the bTBI groups was significantly (p &#60; 0.05) higher than in the Sham bTBI groups. MCA&#39;s collected from the Sham bTBI groups exhibited typical vasodilatory properties to decreases in intraluminal pressure while MCA&#39;s collected following bTBI exhibited significantly impaired myogenic vasodilatory responses to reduced pressure that persisted for at least 60 min after bTBI.

Here, we present a protocol to describe methods for ex vivo vascular reactivity determination following a primary blast traumatic brain injury (bTBI) using isolated, pressurized, rodent middle cerebral arterial (MCA) segments. bTBI induction is accomplished using a shock tube, also known as an Advanced Blast Simulator (ABS) device.

השפעות הפיצוץ-induced Neurotrauma על מכרסם מווסת המזרח התיכון העורקים המוחיים

Though there have been studies on the histopathological and behavioral effects of blast exposure, fewer have been dedicated to blast&#39;s cerebral ...

Modeling Stroke in Mice: Transient Middle Cerebral Artery Occlusion via the External Carotid Artery

Stroke is the third most common cause of mortality and the leading cause of acquired adult disability in developed countries. To date, therapeutic options are limited to a small proportion of stroke patients within the first hours after stroke. Novel therapeutic strategies are being extensively investigated, especially to prolong the therapeutic time window. These current investigations include the study of important pathophysiological pathways after stroke, such as post-stroke inflammation, angiogenesis, neuronal plasticity, and regeneration. Over the last decade, there has been increasing concern about the poor reproducibility of experimental results and scientific findings among independent research groups. To overcome the so-called &#8220;replication crisis&#8221;, detailed standardized models for all procedures are urgently needed. As an effort within the &#8220;ImmunoStroke&#8221; research consortium (https://immunostroke.de/), a standardized mouse model of transient middle cerebral artery occlusion (MCAo) is proposed. This model allows the complete restoration of the blood flow upon removal of the filament, simulating the therapeutic or spontaneous clot lysis that occurs in a large proportion of human strokes. The surgical procedure of this &#8220;filament&#8221; stroke model and tools for its functional analysis are demonstrated in the accompanying video.

Different models of middle cerebral artery occlusion (MCAo) are used in experimental stroke research. Here, an experimental stroke model of transient MCAo via the external carotid artery (ECA) is described, which aims to mimic human stroke, in which the cerebrovascular thrombus is removed due to spontaneous clot lysis or therapy.

שבץ דוגמנות בעכברים: אומת עורק מוחי אמצעי חולף דרך העורק הראשי החיצוני

Stroke is the third most common cause of mortality and the leading cause of acquired adult disability in developed countries. To date, therapeutic options ...

A Model for Encephalomyosynangiosis Treatment after Middle Cerebral Artery Occlusion-Induced Stroke in Mice

There is no effective treatment available for most patients suffering with ischemic stroke, making development of novel therapeutics imperative. The brain's ability to self-heal after ischemic stroke is limited by inadequate blood supply in the impacted area. Encephalomyosynangiosis (EMS) is a neurosurgical procedure that achieves angiogenesis in patients with moyamoya disease. It involves craniotomy with placement of a vascular temporalis muscle graft on the ischemic brain surface. EMS has never been studied in the setting of acute ischemic stroke in mice. The hypothesis driving this study is that EMS enhances cerebral angiogenesis at the cortical surface surrounding the muscle graft. The protocol shown here describes the procedure and provides initial data supporting the feasibility and efficacy of the EMS approach. In this protocol, after 60 min of transient middle cerebral artery occlusion (MCAo), mice were randomized to either MCAo or MCAo + EMS treatment. The EMS was performed 3-4 h after occlusion. The mice were sacrificed 7 or 21 days after MCAo or MCAo + EMS treatment. Temporalis graft viability was measured using nicotinamide adenine dinucleotide reduced-tetrazolium reductase assay. A mouse angiogenesis array quantified angiogenic and neuromodulating protein expression. Immunohistochemistry was used to visualize graft bonding with brain cortex and change in vessel density. The preliminary data here suggest that grafted muscle remained viable 21 days after EMS. Immunostaining showed successful graft implantation and increase in vessel density near the muscle graft, indicating increased angiogenesis. Data show that EMS increases fibroblast growth factor (FGF) and decreases osteopontin levels after stroke. Additionally, EMS after stroke did not increase mortality suggesting that protocol is safe and reliable. This novel procedure is effective and well-tolerated and has the potential to provide information of novel interventions for enhanced angiogenesis after acute ischemic stroke.

The protocol aims to provide methods for encephalomyosynangiosis-grafting of a vascular temporalis muscle flap on the pial surface of ischemic brain tissue-for the treatment of non-moyamoya acute ischemic stroke. The approach's efficacy in increasing angiogenesis is evaluated using a transient middle cerebral artery occlusion model in mice.

מודל לטיפול באנצפלומיוסיננגיוזיס לאחר שבץ מוחי הנגרם על ידי חסימת עורקים מוחיים באמצע בעכברים

There is no effective treatment available for most patients suffering with ischemic stroke, making development of novel therapeutics imperative. The ...

הקמת מודל עכברי חסימת עורק מוחי אמצעי תוך גולגולתי

A Modified Transcranial Middle Cerebral Artery Occlusion Model to Study Stroke Outcomes in Aged Mice

In experimental stroke research, middle cerebral artery occlusion (MCAO) with an intraluminal filament is widely used to model ischemic stroke in mice. The filament MCAO model typically exhibits a massive cerebral infarction in C57Bl/6 mice that sometimes includes brain tissue in the territory supplied by the posterior cerebral artery, which is largely due to a high incidence of posterior communicating artery atresia. This phenomenon is considered a major contributor to the high mortality rate observed in C57Bl/6 mice during long-term stroke recovery after filament MCAO. Thus, many chronic stroke studies exploit distal MCAO models. However, these models usually produce infarction only in the cortex area, and consequently, the assessment of post-stroke neurologic deficits could be a challenge. This study has established a modified transcranial MCAO model in which the MCA at the trunk is partially occluded either permanently or transiently via a small cranial window. Since the occlusion location is relatively proximal to the origin of the MCA, this model generates brain damage in both the cortex and striatum. Extensive characterization of this model has demonstrated an excellent long-term survival rate, even in aged mice, as well as readily detectable neurologic deficits. Therefore, the MCAO mouse model described here represents a valuable tool for experimental stroke research.

מחבר זרקור: טכניקות חדשניות וכיוונים עתידיים בחקר שבץ מוחי 

This protocol demonstrates a unique mouse stroke model with a medium-sized infarct and an excellent survival rate. This model allows preclinical stroke researchers to extend the ischemia duration, use aged mice, and assess long-term functional outcomes.

מודל שונה של חסימת עורק מוחי אמצעי טרנס-גולגולתי לחקר תוצאות שבץ מוחי בעכברים מזדקנים

In experimental stroke research, middle cerebral artery occlusion (MCAO) with an intraluminal filament is widely used to model ischemic stroke in mice. ...

מודל של איסכמיה מוחית חולפת על ידי חסימה של עורק מוחי אמצעי

Transient Middle Cerebral Artery Occlusion Model of Stroke

Stroke stands as a major cause of death or chronic disability globally. Nevertheless, existing optimal treatments are limited to reperfusion therapies during the acute phase of ischemic stroke. To gain insights into stroke physiopathology and develop innovative therapeutic approaches, in vivo rodent models of stroke play a fundamental role. The availability of genetically modified animals has particularly propelled the use of mice as experimental stroke models.
In stroke patients, occlusion of the middle cerebral artery (MCA) is a common occurrence. Consequently, the most prevalent experimental model involves intraluminal occlusion of the MCA, a minimally invasive technique that doesn't require craniectomy. This procedure involves inserting a monofilament through the external carotid artery (ECA) and advancing it through the internal carotid artery (ICA) until it reaches the branching point of the MCA. After a 45 min arterial occlusion, the monofilament is removed to allow reperfusion. Throughout the process, cerebral blood flow is monitored to confirm the reduction during occlusion and subsequent recovery upon reperfusion. Neurological and tissue outcomes are evaluated using behavioral tests and magnetic resonance imaging (MRI) studies.

מחבר זרקור: הערכת נזק איסכמי לשבץ מוחי באמצעות מודל חסימת עורק המוח התיכון 

This protocol describes the model of transient focal cerebral ischemia in mice through intraluminal occlusion of the middle cerebral artery. Additionally, examples of outcome assessment are shown using magnetic resonance imaging and behavioral tests.

מודל חולף של חסימת עורק מוחי אמצעי חולף

Stroke stands as a major cause of death or chronic disability globally. Nevertheless, existing optimal treatments are limited to reperfusion therapies ...