Para comenzar, asegure a la rata en un cono de restricción de plástico, encierre el extremo grande del cono alrededor de la base de la cola. Asegúrese de que el animal esté cómodo y que la respiración no esté restringida durante todo el procedimiento. Sumerja la cola en agua tibia durante aproximadamente un minuto para dilatar la vena y seque la cola con una toalla de papel.
En el retenedor, coloque al animal boca abajo con la cola acostada sobre una almohadilla térmica. Para seleccionar la vena de la cola adecuada para el muestreo, gire todo el animal hacia el lado derecho o izquierdo. Utilice el tercio terminal de la cola para la punción de los vasos sanguíneos, ya que los vasos se vuelven más superficiales en esta zona.
Limpie la cola con toallitas de etanol al 70% en el sitio de punción y colóquela en el borde de la almohadilla térmica, creando un ángulo en el tercio terminal de la cola. Esto lleva la vena a la superficie y crea más espacio para tomar la muestra. Para la toma de muestras de sangre, mueva el émbolo hacia adelante y hacia atrás en la jeringa varias veces para suavizar la extracción y luego tire del émbolo para crear presión negativa en la jeringa.
Asegure la cola plana en la almohadilla térmica con el índice y el dedo medio no dominantes. Coloque el dedo medio proximalmente y el dedo índice distalmente con el sitio de punción entre estos dos dedos. Deslice la jeringa de insulina contra el dedo índice con el ojo de la aguja apuntando hacia arriba hasta que se inserte en la vena.
Esto crea un ángulo de 35 grados entre la aguja y la cola. Una vez que la aguja ha entrado en la vena, la sangre fluirá hacia la jeringa. Extraiga lentamente el émbolo de la jeringa a una velocidad constante para recoger el volumen deseado.
Retire la jeringa de la cola y permita que se forme una gota de sangre en el lado de punción de la cola. Aspire esta sangre para recoger unos microlitros más de sangre, en caso de un procedimiento no estéril. Aplique presión en el sitio de punción para detener el sangrado y limpie el área con una toallita con alcohol nueva.
Después de retirar la rata del cono, devuélvala a su jaula. Las tasas de éxito con los métodos de punción de la vena de la cola se compararon con la tasa de éxito del método de punción de la vena del pene bajo anestesia. Curiosamente, bajo anestesia, la vena de la cola se volvió muy poco confiable y tuvo una tasa de éxito de solo el 25%Las tasas de éxito mostraron resultados casi similares para la punción de la vena de la cola en ratas conscientes y la punción de la vena del pene bajo anestesia.
El muestreo de sangre se realizó en menos de seis minutos en la punción de la vena de la cola sin anestesia, y el método de punción de la vena del pene bajo anestesia, mientras que el método de punción de la vena de la cola bajo anestesia tomó más de ocho minutos debido a múltiples fallas.
