Comience creando una imagen compuesta utilizando las cuatro imágenes obtenidas de cada ratón. Utilice un editor de gráficos para alinear todos los vasos sanguíneos, emplee la cabeza del nervio óptico y los patrones de los vasos sanguíneos como puntos de referencia para alinear la fibra compuesta, superponga las imágenes compuestas y las imágenes confocales de la misma retina teñida con ICAM2, para lograr la alineación in vivo y ex vivo. El gramo de fibra vis-oct compuesto se compara con la imagen confocal correspondiente de la retina montada en plano.
Inmunotinción con TUJ1 para axones de RGC. Los vasos sanguíneos exhiben estructuras ramificadas distinguibles que pueden coincidir con los vasos sanguíneos marcados con ICAM2 en la imagen confocal. La comparación lado a lado entre la microscopía confocal ex vivo y la vis-oct in vivo reveló redes idénticas de haces de axones RGC y vasculatura retiniana circundante.
