Expresión y purificación de alto rendimiento de portadores de solutos humanos para estudios estructurales y bioquímicos

Los portadores de solutos, o SLC, son responsables de absorber nutrientes y están involucrados en enfermedades humanas. Sin embargo, hay pocos medicamentos dirigidos a las SLC porque están poco estudiados. Desarrollamos enfoques eficientes para clonar, expresar y purificar SLC.

Nuestro flujo de trabajo produce proteínas puras, lo que permite realizar estudios bioquímicos y estructurales y, en última instancia, proporciona información para las campañas de descubrimiento de fármacos. Con las numerosas funciones que desempeñan los procesos biológicos, las enfermedades y la administración de fármacos, las SLC han recibido cada vez más atención y se han convertido en atractivas dianas terapéuticas. Los proyectos privados y públicos de ReSOLUTE IMI generaron recursos y datos de acceso abierto para permitir nuevos descubrimientos en la función, la fisiología, la patología y la orientación terapéutica de SLC.

Tradicionalmente, las SLC eran difíciles de estudiar, ya que son proteínas integrales de membrana con diversos sustratos y diversos mecanismos de transporte. Recientemente, Cryo-EM, el sistema de expresión de BacMam y los nuevos reactivos de solubilización han supuesto un cambio radical en su caracterización. Se necesitan muestras de proteínas puras para estudios bioquímicos y estructurales.

En humanos, los portadores de solutos a menudo tienen un rendimiento pobre cuando se sobreexpresan y son inestables cuando se purifican. Por lo tanto, en el pasado, cada objetivo requería años para desarrollar estructuras individuales para producir la muestra de proteína para aplicaciones posteriores. Nuestro método está optimizado para el estudio paralelo y rentable de múltiples objetivos o construcciones de un solo objetivo.

Por lo tanto, equilibra cuidadosamente la flexibilidad experimental, el costo, el tiempo y los recursos de laboratorio. Además, ofrecemos acceso abierto a todos nuestros protocolos y recursos en este artículo y en el portal web de ReSOLUTE.