Высокопроизводительная экспрессия и очистка носителей растворенных веществ человека для структурных и биохимических исследований

Носители растворенных веществ, или SLC, отвечают за поглощение питательных веществ и участвуют в заболеваниях человека. Тем не менее, существует мало препаратов, нацеленных на SLC, потому что они плохо изучены. Мы разработали эффективные подходы к клонированию, экспрессии и очистке SLC.

Наш рабочий процесс позволяет получать чистые белки, что позволяет проводить биохимические и структурные исследования и, в конечном итоге, дает информацию для кампаний по разработке лекарств. Благодаря многочисленным ролям в биологических процессах, заболеваниях и доставке лекарств, SLC все чаще привлекают внимание и становятся привлекательными терапевтическими мишенями. В рамках частных, государственных проектов ReSOLUTE IMI были созданы ресурсы и данные с открытым доступом, позволяющие делать новые открытия в области функционирования SLC, физиологии, патологии и терапевтического таргетирования.

Традиционно SLC было сложно изучать, поскольку они представляют собой интегральные мембранные белки с различными субстратами и разнообразными механизмами переноса. В последнее время Крио-ЭМ, система экспрессии BacMam и новые реагенты для солюбилизации привели к существенному изменению их характеристик. Образцы чистого белка необходимы для биохимических и структурных исследований.

У человека носители растворенных веществ часто имеют плохой выход при чрезмерной экспрессии и нестабильную при очистке. Таким образом, в прошлом для каждой мишени требовались годы для разработки отдельных структур для производства образца белка для последующих применений. Наш метод оптимизирован для параллельного и экономичного исследования нескольких мишеней или конструкций одной мишени.

Таким образом, он тщательно балансирует между гибкостью эксперимента, стоимостью, временем и лабораторными ресурсами. Кроме того, мы предлагаем открытый доступ ко всем нашим протоколам и ресурсам в этой статье и на веб-портале ReSOLUTE.