Transferencia adoptiva de células T P14 a ratones portadores de tumores

Para realizar la transferencia adoptiva, revise a los ratones portadores de tumores de 6 a 8 días después de la implantación del tumor, cuando los tumores son palpables. El día anterior a la transferencia, inyectar por vía intraperitoneal cuatro miligramos de ciclofosfamida. El día de la transferencia, aspire 200 microlitros de suspensión de células P14 con una jeringa de insulina de 100 U.

Retire las burbujas de la jeringa. A continuación, coloque al ratón en una jaula e irradie con una lámpara infrarroja durante 5 a 10 minutos para expandir la vena de la cola. A continuación, utilice el fijador del ratón para mantener el ratón en su sitio.

Endereza la cola y límpiala con etanol al 75%. Inserte la aguja paralela a la vena de la cola y tire suavemente hacia atrás del émbolo. Si no hay sangre fluyendo hacia la jeringa, empuje lentamente la suspensión celular hacia la vena.

Una vez completada la inyección, saque rápidamente la aguja. Presione suavemente el lugar de la inyección con una bola de algodón y devuelva el ratón a una nueva jaula limpia. Observe de cerca al ratón durante varios minutos para detectar cualquier efecto adverso.