Para empezar, coloque al animal anestesiado e intubado boca arriba y cúbralo con toallas estériles. Utilice la electrocauterización monopolar para hacer una incisión de 20 centímetros, que se extienda desde la escotadura esternal proximalmente hasta la apófisis xifoides distalmente, y para incidir capas de músculos, grasa subcutánea y tejido conectivo hasta el esternón. A continuación, realice una esternotomía media, empleando una sierra oscilante.
Para una visualización eficiente del mediastino, utilice un retractor de tórax especializado. Diseccionar adherencias con electrocauterio monopolar o tijeras Metzenbaum. A continuación, exponga LIMA diseccionando el músculo paraesternal y la grasa.
A continuación, inicie la disección de la LIMA elevando el borde esternal izquierdo para garantizar una visualización óptima. Aplique una tracción suave a la adventicia y exponga las ramas arteriales y venosas de la LIMA. Emplee la disección roma con una punta de electrocauterización para separarla cuidadosamente de la pared torácica.
Use hemo clips en las ramas y cauterice el lado de la pared torácica de estas ramas. A continuación, recorte el extremo distal de la LIMA justo antes del punto de bifurcación y divida el conducto. Asegure el extremo distal con una sutura de seda 2-O atada libremente.
Después de preparar el extremo proximal para el injerto, evalúe la calidad del flujo manualmente permitiendo que el injerto sangre brevemente. Ahora sujete el extremo distal del conducto LIMA con una pinza bulldog atraumática para evitar el sangrado. Estabilice la arteria descendente anterior izquierda, o LAD, con cinta de retracción de silicona y un estabilizador de tejido que esté asegurado al retractor esternal.
Realizar una arteriotomía en la arteria de la DA distal a la estenosis, utilizando una cuchilla de 11 hojas, y extenderla con unas tijeras de iris. Coloque una derivación coronaria de tamaño adecuado en la arteria DA. Realice la anastomosis de LIMA a LAD utilizando una sutura no absorbible de 7-O en una técnica de derivación sin bomba.
Tome una suspensión de exosomas de tres milímetros y use una jeringa de cinco mililitros equipada con una aguja de calibre 18 para mezclarla. A continuación, pipetee gradualmente 1,5 mililitros de esta suspensión en dos esponjas de colágeno absorbibles, colocadas en una placa de Petri de tamaño mediano. Para apuntar a la región de hibernación del corazón, coloque la esponja de exosomas boca abajo en el epicardio de la región septal anterior en la distribución de la arteria DA.
Coloque con cuidado dos esponjas para cubrir completamente la región de hibernación. Use una malla de poliglactina en cada esponja de colágeno para garantizar una cobertura adecuada y cose la malla en el epicardio con suturas finas interrumpidas de 7-O. Haga una incisión de arma blanca separada cerca de la cara inferior de la incisión de esternotomía y coloque el tubo torácico con cuidado en la cara anterior del corazón.
Aproximar el esternón utilizando suturas no absorbibles, empleando un patrón en forma de ocho. Cierre las capas de músculo y piel utilizando suturas absorbibles 2-O y 3-O, respectivamente, siguiendo el procedimiento estándar. Después de evacuar la cavidad torácica con un tubo torácico, selle la herida con una sutura de cuerda de bolsa.
Una vez cerrada la herida, retire el tubo torácico. En reposo, se compara la tasa máxima de llenado sobre el volumen diastólico final entre cuatro grupos de animales. En la infusión de dobutamina en dosis bajas, el grupo con miocardio en hibernación tuvo una disminución en la tasa máxima de llenado.
El grupo de cirugía de revascularización coronaria mostró mejoría, mientras que el grupo de injerto de revascularización coronaria, más el grupo de células madre mesenquimales, experimentó un aumento significativo. El análisis de resonancia magnética reveló que el injerto de derivación de la arteria coronaria, más el grupo de células madre mesenquimales no altera la función sistólica regional en reposo. Sin embargo, bajo estrés, este grupo mostró una mejoría significativa en la función sistólica regional en comparación con el injerto de derivación de la arteria coronaria.
