Para comenzar, coloque el ratón anestesiado sobre una almohadilla absorbente o pañal. Pellizca el dedo del ratón para confirmar el cese de los reflejos. Con cinta quirúrgica, asegure todas las extremidades con la cavidad torácica hacia arriba.
Con pinzas y tijeras, abra con cuidado la cavidad torácica para exponer el corazón. Inserte una aguja roma de calibre 23 en el ventrículo izquierdo del corazón para la perfusión. Luego mezcle cinco mililitros de solución de compuesto de caucho de silicona, con cinco mililitros del diluyente en un tubo de 50 mililitros.
Con una aguja roma de calibre 23 conectada a una manguera, inyecte 10 mililitros del compuesto mezclado en el corazón. Al día siguiente, con unas pinzas finas, retire suavemente el cráneo del ratón y coloque el cerebro extraído en paraformaldehído al 4% a temperatura ambiente. Después de una incubación de 24 horas, lavar el cerebro tres veces en PBS y almacenarlo en sacarosa al 30% a cuatro grados centígrados.
Las pictogramas de los cerebros ilustraron el agrandamiento de la arteria basala y el aumento de la tortuosidad alrededor del círculo de Willis después de la inyección de elastasa en comparación con el grupo de control PBS. En comparación con el grupo de control tratado con PBS, se observó una dilatación significativa de los vasos sanguíneos después de una sola inyección de elastasa en la cisterna magna de ratones de tres meses de edad, que se mantuvo durante tres meses.
