Cultivo in vitro de Plasmodium falciparum y sincronización de sorbitol para la transfección con el fin de desentrañar mecanismos compensatorios utilizando CDPK1

Para comenzar, cultive la cepa NF54 de Plasmodium falciparum en hematocrito al 2% de glóbulos rojos O + humanos en medio RPMI completo suplementado. Para la sincronización del sorbitol, granule los parásitos asíncronos en un tubo cónico de 50 mililitros a 2.300 G durante tres minutos a temperatura ambiente. Después de desechar el sobrenadante, incubar los glóbulos rojos parasitados con nueve volúmenes de sorbitol al 5% durante 10 minutos a 37 grados centígrados.

Después de la incubación, granule los glóbulos rojos como se demostró anteriormente y deseche el sorbitol. Lave los parásitos tratados con sorbitol con medios RPMI y RPMI incompletos sin AlbuMAX y bicarbonato de sodio. Posteriormente incubarlos en RPMI completo para obtener los parásitos en etapa de anillo.