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Identificación de proteínas compañeros de interacción en células de mamífero utilizando SILAC-inmunoprecipitación cuantitativos Proteómica

Experimentos de inmunoprecipitación SILAC representan un poderoso medio para descubrir nueva proteína: proteína interacciones. Al permitir la cuantificación relativa precisa de la abundancia de proteínas tanto en el control y las muestras de ensayo, verdaderos interacciones se puede distinguir fácilmente de los contaminantes experimentales, y las interacciones de baja afinidad conservada a través del uso de condiciones de tampón menos estrictos.

Capítulos en este video

0:05

Title

1:49

Harvesting of SILAC-labeled Cell Lysates

3:39

Binding Lysate to Anti-GFP Beads

4:45

Preparation of Samples for MS Analysis

6:11

Data Analysis I: Understanding the Results and Removal of Low-confidence Identifications

8:58

Data Analysis III: Merging Replica Datasets

12:22

Conclusion

7:36

Data Analysis II: Selecting High Confidence Interactions for Further Study

10:59

Results: Identification of Translation Initiation Factor – Binding Proteins

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