No hay fondos para declarar.

El procedimiento de músculo esquelético como se describe sigue las directrices de la Junta de Revisión Institucional de la Universidad Estatal de los Apalaches. NOTA: El equipo se compone de un operador (Ph.D. o MD entrenado en la técnica de la biopsia), y al menos uno, pero idealmente, tres o más técnicos. El operador es responsable de conducir y supervisar todos los aspectos del procedimiento de biopsia del músculo esquelético. Un técnico (técnico # 1) es inmediatamente responsable de asistir al operador con todos los aspectos de la extracción del músculo. Esto incluye ser las &quot;manos no estériles&quot; y la aplicación de succión con una jeringa estéril. Un segundo técnico (técnico # 2) se involucra en la conversación con el sujeto y masajes en las piernas enfrente del sujeto durante el procedimiento para minimizar la ansiedad del sujeto. El tercer técnico (técnico 3 #) es responsable de la manipulación y el procesamiento de la muestra de músculo esquelético. Medidas analíticas Downstream dictan cuántas additSe requieren técnicos ional para el procesamiento / preparación de la muestra de músculo esquelético. 1. Asunto Preparación <ol><li> Recopilar, preparar y organizar los materiales especificados para el procedimiento de la biopsia muscular (Tabla 1). Descontaminar y esterilizar la aguja Bergström (cánula exterior y de trocar interior) y el émbolo según la práctica estándar 16. </li><li> Revise la forma de consentimiento con el tema. La porción de la biopsia del músculo esquelético del Consentimiento para Participar forma utilizada en la Universidad Estatal de los Apalaches se ofrece en el suplemento en línea 1. <ol><li> Hable con el tema sobre los aspectos generales del procedimiento de biopsia muscular con un enfoque en los posibles riesgos del procedimiento, preparación de la piel, la aplicación de la anestesia, las sensaciones típicas. Indique al sujeto que lean atentamente el consentimiento para participar formulario y firmarlo para confirmar que el diseño y los procedimientos de estudio se entienden. </li></ol></li><li> Confirme que los sujeto no es alérgica a &quot;___ caína&quot; medicamentos de tipo (por ejemplo, lidocaína). </li><li> Indique al sujeto que mentir supina sobre una mesa acolchada con el muslo expuesto. Coloque dos empapadores absorbentes desechables con forro de plástico debajo de la pierna del sujeto. Coloque la pierna de una manera relajada, con una pequeña toalla enrollada debajo del talón, de tal manera que la rodilla está completamente extendida (elevado ~ 1 cm), colocando así el vasto lateral en una posición acortada. </li><li> Haga que el operador instrucciones a la sujeta a contrato momentáneamente el músculo del muslo expuesto de modo que la zona de la biopsia puede ser visualizado. Nota: El vasto lateral sitio de la biopsia se justo anterior a la fascia lata (banda illiotibial), aproximadamente un tercio de la distancia entre la parte superior de la rótula y el trocánter mayor 7. </li><li> Tener la marca del operador justo debajo (~ 0,5 cm) del sitio de la incisión con un marcador permanente de punta fina. </li><li> Haga que el operador determinar el espesor del pliegue cutáneo aproximado por pincHing el pliegue cutáneo. </li><li> Tener el operador y técnicos se laven las manos con agua tibia y jabón y ponerse guantes desechables. </li><li> Tienes el operador retire el cabello de una región ~ 15 cm x 15 cm alrededor del sitio de la biopsia (por medio de máquinas de cortar). Nota: recorte el pelo de la zona de la biopsia evita que el pelo se metan en la incisión durante el procedimiento y durante el cierre, y la depilación permite un mejor contacto entre los cierres de cinta y la piel (ver 3.4). </li><li> Haga que el operador de esterilizar la zona con hisopos pre-empapado con un antiséptico tópico, (como povidona yodada o gluconato de clorhexidina para sujetos alérgicos al yodo / mariscos). Comience en el centro y trabajar en círculos concéntricos hacia el borde exterior de la zona rasurada. Como mínimo, repetir dos veces más con un hisopo nuevo pre-empapado cada vez. </li></ol> 2. procedimiento de biopsia <ol><li> Haga que el operador retire guantes desechables, lavarse las manos con agua tibia y jabón, y Don gl quirúrgico estérilOves utilizando una técnica aséptica. </li><li> Tener técnico # 1 presente el paño fenestrado estéril para el operador. Tener el operador, utilizando una técnica aséptica, colocar el paño sobre la zona de la biopsia para mantener un campo estéril. </li><li> Tener técnico # 1 presente al operador una jeringa de 5 ml, equipado con una aguja de 21 mientras se mantiene una técnica aséptica. Limpie la parte superior del vial lidocaína con un algodón empapado en alcohol. <ol><li> Haga que el operador retire inmediatamente 5 ml de lidocaína. Retire la aguja 21G de la jeringa y desechar la aguja en un contenedor de objetos punzantes. </li><li> Tener técnico # 1 presente el operador con una aguja de 1 ½ pulgadas de 25, mientras que el mantenimiento de una técnica aséptica. Haga que el operador de la pulgada aguja de 1 ½ a la jeringa y evacuar a las burbujas de aire de la jeringa. </li></ol></li><li> Tener técnico # 1 spray de cloruro de etilo en el sitio de la incisión (~ 0.5 cm por encima de la marca de tinta indeleble en la piel) hasta que la piel parece &quot;blanquear&quot;. <ol><li> Hahan el operador inserte la aguja aproximadamente horizontal a la piel en la dermis, aspirar la aguja, y luego infiltrarse con ~ 100 l de lidocaína para producir una &quot;ampolla&quot; 2-4 mm de diámetro. <ol><li> Tener el aspirado operador de la aguja (retirar ligeramente el émbolo de la jeringa) para confirmar que la aguja no se ha colocado en un vaso sanguíneo. Si aparece sangre en la jeringa, retire la aguja, deseche en un contenedor de objetos punzantes, y comenzar de nuevo en el 2,3. </li><li> Tener el avance operador de la aguja en el tejido subcutáneo, aspirar la aguja, y luego infiltrarse en el tejido con ~ 1 ml de lidocaína para formar una ampolla. Una vez que la ampolla se ha desplomado, insertar la aguja de 1 ½ pulgadas de la jeringa lidocaína-cargado verticalmente en el sitio de la incisión, parando superficial a la fascia. Nota: El sujeto puede sentir una ligera sensación de picadura momentánea de la inyección inicial de la lidocaína (similar a una picadura de abeja). </li></ol></li><li> Asegúrese de que la operaco no se infiltra el músculo con lidocoine porque es miotóxico 17-19. </li><li> Tener el aspirado operador de la aguja y luego inyectar lentamente los restantes 4 ml de lidocaína mientras se retira la aguja del muslo. Coloque una gasa estéril sobre el lugar de inyección y permitir que el sujeto se relaje mientras que el anestésico local entre en vigor. </li></ol></li><li> Después de 2-3 minutos, tener técnico # 1 presente el operador de un bisturí mientras se mantiene una técnica aséptica. <ol><li> Tener el operador ligeramente sondear el sitio de la biopsia con la punta del escalpelo para confirmar que el área se anestesia. Si es necesario, inyectar otros 3-4 ml de lidocaína en el sitio de la incisión, véase 2.4.1.2. </li></ol></li><li> Haga que el operador haga una recta de 1 cm de la incisión a través de la piel y los tejidos subcutáneos (~ 2-3 mm por encima de la marca de tinta) paralela al fémur. <ol><li> Haga que el operador inserte el bisturí más profundo para hacer una incisión a través de la fascia en el músculo. Haga esto una vez en cada dirección<html> . Nota: El sujeto puede sentir una punzada o presión con el corte más profundo si la hoja corta bisturí en el músculo. </li><li> Tener técnico # 2 involucrar el tema en la conversación y masajear la pierna opuesta. </li></ol></li><li> Haga que el operador de una generosa cantidad de gasa estéril sobre el lugar de la incisión y la biopsia y aplicar presión directa sobre la incisión para reducir el sangrado. <ol><li> Tener técnico # 1 conecte la llave de paso del metal de 3 vías a la jeringa desechable de 60 ml y el tubo de extensión de 30 cm (Figura 1). </li><li> Tienes técnico # 1 conecte un extremo del conector cónico tubo de plástico en el extremo libre del tubo de extensión y inserte firmemente el otro extremo del conector cónico tubo de plástico en la gran final de una punta de pipeta de 200 l con ~ 15-18 mm de la punta cortada. </li></ol></li></ol>.jpg &quot;width =&quot; 500 &quot;/&gt; Figura 1. La aguja Bergström. (A) La aguja Bergström (5 mm) se compone de (a) la cánula externa y (b) interno de trocar, los componentes asociados incluyen (c) del émbolo, (d) la punta de pipeta 200 l con ~ 15-18 mm cortó , (e) ahusada conector de plástico, (f) de 3 vías llave de paso de metal, (g) tubo de extensión 30 cm, y (h) de la jeringa desechable de 60 ml. (B) La aguja Bergström (5 mm) y los componentes asociados montado. ( C) El trocar interior de la aguja Bergström (5 mm) retirado aproximadamente 1 cm se abre la ventana de la cánula exterior. <ol start="9"><li> Después de que el sangrado haya disminuido, tienen técnico # 1 Abra la bolsa de autoclave esteriliza y se presenta el 5 mm aguja de biopsia y trocar interior (Figura 1) para el operador mientras se mantiene una técnica aséptica. <ol><li> Haga que el operador de montar la aguja (cánula exterior y trocar interior), comprobar la alineación y la acción de deslizamiento. </li> &lt;/ Ol&gt; </li><li> Tener el operador sujetar firmemente el conjunto de aguja (cánula exterior y de trocar interior) con las dos manos para evitar que el trocar interior gire. Ha técnico # 1 inserte firmemente la punta de corte de la pipeta en la parte superior de la porción trocar interior de la aguja de la biopsia con un ligero movimiento a la baja torsión. Asegúrese de que técnico # 1 no toca el operador o la aguja de biopsia, sólo la punta de la pipeta. </li><li> Haga que el operador introduce la aguja de biopsia en el tejido a través de la incisión. Localizar la incisión en la fascia (un &quot;sensación&quot; adquirida) con la punta de la aguja de biopsia. Avance la aguja un poco más allá del ángulo de la fascia y luego la aguja hacia abajo, hacia el suelo cuando la aguja se introduce en el músculo. Nota: Los sujetos pueden experimentar una leve molestia (por ejemplo, &quot;la presión profunda&quot;, o sensación de calambre leve) como la incisión a través de la fascia se encuentra con la punta de la aguja de biopsia y la aguja se introduce en el músculo. <ol> &lt;li&gt; Tienes técnico # 2 instruir el tema para estar &quot;relajado&quot; y no se contraiga sus músculos del muslo, mientras que el operador está avanzando la aguja en el músculo. </li></ol></li><li> Una vez que la aguja de biopsia está en posición, tener la señal de operador técnico # 1 para abrir la jeringa desechable de 60 ml. <ol><li> Tienes técnico # 1, tire rápidamente la jeringuilla disponible 60 ml abierto a la marca de 40-50 cc para crear succión dentro de la aguja de la biopsia. </li><li> Tienes el operador tire del trocar interno hacia fuera aproximadamente 1 cm para abrir la ventana de la cánula exterior mientras se mantiene la posición de la externo de trocar dentro del músculo. Haga que el operador de cerrar rápidamente el trocar interior para cortar (clip) y recoger la muestra de músculo. Tener la señal del operador técnico # 1 para liberar la succión. </li><li> Tienes técnico # 1 abre la llave de paso a la sala para liberar la succión. </li><li> Tener el operador girar la aguja de biopsia 90 ° y repita el proceso. Si es necesario, haga que el operador REPEAt el procedimiento de rotación de hasta 3 veces (para un total de 4 clips). </li></ol></li><li> Haga que el operador aplica contra-presión directa en el sitio de la incisión con una gasa estéril mientras se quita la aguja de biopsia en el muslo, con cuidado de no coger fascia o de la piel. Si siente resistencia significativa, vuelva a cortar mientras se aplica un movimiento de torsión al trocar interior. </li><li> Tras la retirada de la aguja de biopsia del muslo, tiene el operador tire de la parte posterior interno de trocar 1 cm para inspeccionar visualmente el lumen de la cánula exterior para estimar si se recogió una cantidad adecuada de tejido. <ol><li> Tener la mano del operador de la aguja de la biopsia al técnico # 1. Para mantener una técnica aséptica asegurar que técnico # 1 sólo toca la aguja, no el operador. Tener técnico # 1 mano la aguja de biopsia al técnico # 3. </li></ol></li><li> Tener técnico # 3 Retire el tejido de la aguja de la biopsia. <ol><li> Tener técnico # 3 uso del émbolo (Figura 1) y un par de pinzas de punta finapara asegurar que todo el tejido muscular se elimina de la interno de trocar y la cánula externa. </li><li> Tener técnico # 3 pesan rápidamente la muestra a confirmar que se recogió una cantidad adecuada de tejido muscular y colocar las muestras en un bloque de disección en frío de hielo. </li></ol></li><li> Tienes técnico # 3 diseccionar cuidadosamente tejido conectivo visible y la grasa de las muestras de músculo. Ha técnico # 3 preparar las muestras de músculo para el almacenamiento de acuerdo con los análisis posteriores. Por ejemplo, colocar inmediatamente las muestras en un criovial y congelamiento rápido en nitrógeno líquido, montar y congelar por histología, o lugar en una criovial con inhibidor de RNasa, etc </li><li> Si es necesario, repita el procedimiento con una segunda aguja de biopsia esterilizada mientras se mantiene una técnica aséptica. </li></ol> 3. Clausura <ol><li> Haga que el operador aplique presión directa en lugar de la biopsia con una gasa estéril y una bolsa de hielo durante 10-15 minutos. </li><li> Una vez lograda la hemostasia, tener la pr consumo de alcohol operadoralmohadillas ep para eliminar la sangre seca de la zona alrededor de la incisión. </li><li> Tener técnico # 1 presente un tubo de adhesivo quirúrgico tópico y el aplicador para el operador. Tienes el operador montar el tubo de adhesivo quirúrgico y aplicador sin tocar la punta del aplicador o la parte superior del tubo. </li><li> Tienes el operador tire de la incisión se cerró con una mano mientras se aplica una sola capa de adhesivo quirúrgico en la parte superior de la incisión seca con la otra mano. Después el adhesivo se cura (~ 90 seg), aplicar closuresperpendicular cinta a la incisión. Alternativamente, cerrará la incisión con dos 4-0 suturas estériles. </li><li> Haga que el operador aplica presión directa mediante la colocación de 3 a 4 febrero &quot;x 2&quot; gasas no estériles en el sitio de la incisión y seguro con una envoltura adhesiva autoadhesiva. </li><li> Haga que el operador proporcione el tema verbal y las instrucciones escritas sobre el cuidado de las heridas, reacciones normales y anormales, y las pautas de actividad para los siguientes 1 a 4 días (ver línea Dopplement 2). </li></ol>

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The authors have no conflicts of interest.

Este video ofrece un resumen paso a paso del procedimiento de biopsia de músculo esquelético utilizado en el Laboratorio de Rendimiento Humano de la ASU. Este procedimiento, con pequeñas modificaciones, se ha utilizado para recoger aproximadamente 1.600 biopsias musculares durante los últimos 13 años. Las muestras de biopsia muscular han proporcionado datos importantes en las investigaciones basadas en nutrición deportiva, dando lugar a importantes descubrimientos de la investigación. ...

La técnica de biopsia percutánea o &quot;semi-abierto&quot; se utiliza para obtener muestras de tejido músculo esquelético de pacientes humanos y sujetos de investigación. Duchenne (1806-1875) es reconocido como el primero en construir una aguja con un trocar para obtener el músculo esquelético de sujetos que viven a través de la biopsia percutánea 1. En la década de 1960, Bergström introdujo una aguja de biopsia percutánea similar a la descrita por Duchenne 2-4. Veinte años más tarde, Evans et al. 5 modificado la técnica mediante la aplicación de succión a través del trocar de corte de la aguja Bergström. Esta modificación puede mejorar el rendimiento de tejido de 3 a 5 veces 6,7 y se emplea en entornos de investigación clínica y biomédica. Esta técnica tiene y seguirá fomentando el diagnóstico de las miopatías y nuestra comprensión de la estructura y función de los músculos esqueléticos. La técnica de biopsia muscular percutánea es straightforward. Cuando se hace correctamente, con estricto apego a la técnica aséptica, los riesgos asociados son mínimos. El procedimiento de biopsia muscular se considera como una herramienta de investigación para proyectos de investigación. Algunas instituciones académicas permiten profesores investigadores entrenados con un doctorado, con la supervisión directa del médico, para obtener biopsias de músculo y otros requieren de un médico certificado por el consejo para realizar la técnica. El equipo de biopsia ASU ha realizado con éxito más de 1.600 biopsias musculares durante los últimos 13 años 8-15. El propósito de este video es para describir la aguja Bergström modificado muscular percutánea técnica de biopsia 5 para obtener muestras de tejido de músculo esquelético de las vasto lateral de sujetos humanos.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="969">
	<tbody>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;width:439px;">Name of Material / Equipment</td>
			<td style="width:185px;">Company</td>
			<td style="width:141px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:204px;">Comments /&#160; Description</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Bergstr&#246;m biopsy needle, 5 x 100mm</td>
			<td style="width:185px;">Stille Surgical Inc.</td>
			<td>119-29187-50</td>
			<td>1 ea</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Durasorb blue pad</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>22-031-340</td>
			<td>case of 300</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Prep Razor Disposable</td>
			<td>Moore Medical</td>
			<td>89760</td>
			<td>1 ea</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Shave Cream</td>
			<td>Moore Medical</td>
			<td>92869</td>
			<td>1 can</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Alcohol Swab</td>
			<td>Moore Medical</td>
			<td>98721</td>
			<td>box/200</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Povidone-iodine Swabsticks (3 pack)</td>
			<td>Moore Medical</td>
			<td>90691</td>
			<td>pack of 50</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Face masks</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>19-039-690</td>
			<td>case of 50</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Sterile Gloves; sz 6.5</td>
			<td>Moore Medical</td>
			<td>68128</td>
			<td>box of 50 pairs</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Sterile Gloves; sz 7.0</td>
			<td>Moore Medical</td>
			<td>68129</td>
			<td>box of 50 pairs</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Sterile Gloves; sz 8.5</td>
			<td>Moore Medical</td>
			<td>68132</td>
			<td>box of 50 pairs</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Fenestrated Towel Drape</td>
			<td>Moore Medical</td>
			<td>92712</td>
			<td>case of 50</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Lidocaine (1% HCl, w/o Epi</td>
			<td>Dealmed</td>
			<td>427902</td>
			<td>30cc vial</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Ethyl Chloride spray</td>
			<td>Dealmed</td>
			<td>386020</td>
			<td>3.5 fl. Oz. bottle</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">5 mL syringe w/ 21G needle</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>14-827-48</td>
			<td>case of 100</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">25G 5/8&#34; needle</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>14-826AA</td>
			<td>case of 100</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">25G 1 1/2&#34; needle</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>14-826-49</td>
			<td>case of 100</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Single-Use Scalpels&#160; w/ #11 blade</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>0-8927-5B</td>
			<td>box of 20</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">60 mL Syringe</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>13-689-8</td>
			<td>case of 40</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">~30 inch extension tubing</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>14-169-7A</td>
			<td>roll of 50ft</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Metal stopcock</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>01-290-38</td>
			<td>each</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Polypropylene tubing connector w/ tapered ends, 3.2 to 5.5 mm</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>15-315-28A</td>
			<td>case of 100</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Yellow pipette tips (1-200 &#181;L)</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>02-681-2</td>
			<td>cut off&#160; ~15-18 mm of the tip</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Topical surgical adhesive</td>
			<td>Medline</td>
			<td>MSC091076</td>
			<td>case of 36 tubes</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Topical surgical adhesive</td>
			<td>Medline</td>
			<td>MSC091076Z</td>
			<td>box of 6 tubes</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Butterfly stitches (adhesive strips) 1/2&#34; x 4&#34; (6 per pack)</td>
			<td>Moore Medical</td>
			<td>93050</td>
			<td>box/300</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Bandadge, Strip, 3/4 x 3 in.</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>19-027-202</td>
			<td>pack of 100</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Adhesive bandage (5m rolls)</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>19-027-768</td>
			<td>case of 36</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">1&#34; paper surgical tape</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>19-027-761</td>
			<td>case of 12</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Sutures (4-0 reverse cutting, FS2)</td>
			<td>Moore Medical</td>
			<td>82926</td>
			<td>box of 36</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">4 x 4 sterile gauze pads</td>
			<td>Moore Medical</td>
			<td>66949</td>
			<td>pkg/50</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">2 x 2 non-sterile gauze pads</td>
			<td>Moore Medical</td>
			<td>37336</td>
			<td>pkg/200</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">3 x 4 Non-Adherent Pads</td>
			<td>Moore Medical</td>
			<td>74389</td>
			<td>bx/100</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Autoclave bags 3.5 x 9</td>
			<td>Moore Medical</td>
			<td>40390</td>
			<td>box of 200</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Autoclave bags 5.25 x 10</td>
			<td>Moore Medical</td>
			<td>40391</td>
			<td>box of 200</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Autoclave indicator tape</td>
			<td>Moore Medical</td>
			<td>31608</td>
			<td>box of 250</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Lab Coats&#8212;small</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>23-900-520A&#160;</td>
			<td>10/pk</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Lab Coats&#8212;medium</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>23-900-520B&#160;</td>
			<td>10/pk</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Lab Coats&#8212;large</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>23-900-520C&#160;</td>
			<td>10/pk</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Germicidal Disposable Cloth Wipes</td>
			<td>Moore Medical</td>
			<td>62879</td>
			<td>Can/160</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

human skeletal muscle biopsy procedures using the modified bergstr&#246;m technique

La técnica de biopsia percutánea permite a los investigadores y los clínicos para recolectar muestras de tejido músculo esquelético. La técnica es segura y altamente eficaz. Este video describe la técnica de biopsia percutánea usando una aguja de Bergström modificado para obtener muestras de tejido de músculo esquelético de los vasto lateral de sujetos humanos. La aguja Bergström consiste en una cánula externa con una pequeña abertura (&quot;ventana&quot;) en el lado de la punta y un trocar interior con una cuchilla de corte en el extremo distal. Bajo anestesia y asépticas condiciones locales, la aguja se hace avanzar en el músculo esquelético a través de una incisión en la piel, tejido subcutáneo, y fascia. A continuación, se aplica succión a la interno de trocar, el trocar exterior se tira hacia atrás, el tejido muscular esquelético se introduce en la ventana de la cánula exterior por la succión, y el trocar interior se cierra rápidamente, reduciendo así el recorte o la muestra de tejido del músculo esquelético . La aguja se gira 90 °60, y otro corte, se hace. Este proceso puede repetirse tres veces más. Esta técnica de corte múltiple típicamente produce una muestra de 100 a 200 mg o más en sujetos sanos y se puede hacer inmediatamente antes, durante, y después de una sesión de ejercicio u otra intervención. Después de vestirse post-biopsia de la zona de la incisión, los sujetos reanudan sus actividades de la vida diaria de inmediato y puedan participar plenamente en la actividad física vigorosa en 48-72 horas. Los sujetos deben evitar el ejercicio intenso durante 48 horas para reducir el riesgo de herniación del músculo a través de la incisión en la fascia.

El procedimiento de biopsia muscular como se describió anteriormente permite al investigador para recoger rápidamente y consistentemente muestras de tejido de músculo esquelético. El rendimiento típico en sujetos sanos, atléticos es de 200 mg o más en una sola pasada con 3-4 clips. El procedimiento tarda 15-20 minutos, la mayor parte de los cuales se gasta en preparación para la incisión. En los estudios basados ​​en el ejercicio, muestras de músculo a menudo se toman antes y después del ejercicio, con un...

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Human Skeletal Muscle Biopsy Procedures Using the Modified Bergstr&amp;#246;m Technique

The purpose of this video is to present the modified Bergstr&#246;m skeletal muscle biopsy technique on human subjects.

Procedimientos de biopsia de músculo esquelético humano utilizando la técnica de Bergström Modificado

The percutaneous biopsy technique enables researchers and clinicians to collect skeletal muscle tissue samples. The technique is safe and highly ...

human-skeletal-muscle-biopsy-procedures-using-modified-bergstrm

Research

JoVE Journal

Medicine

Human Skeletal Muscle Biopsy Procedures Using the Modified Bergstr&#246;m Technique

39.5K vistas.  Appalacian State University. The purpose of this video is to present the modified Bergström skeletal muscle biopsy technique on human subjects. 

Video: Human Skeletal Muscle Biopsy Procedures Using the Modified Bergstr&#246;m Technique

Myo-mechanical Analysis of Isolated Skeletal Muscle

To assess the in vivo effects of therapeutic interventions for the treatment of muscle disease 1,2,3, quantitative methods are needed that measure force generation and fatigability in treated muscle. We describe a detailed approach to evaluating myo-mechanical properties in freshly explanted hindlimb muscle from the mouse. We describe the atraumatic harvest of mouse extensor digitorum longus muscle, mounting the muscle in a muscle strip myograph (Model 820MS; Danish Myo Technology), and the measurement of maximal twitch and tetanic tension, contraction time, and half-relaxation time, using a square pulse stimulator (Model S48; Grass Technologies). Using these measurements, we demonstrate the calculation of specific twitch and tetanic tension normalized to muscle cross-sectional area, the twitch-to-tetanic tension ratio, the force-frequency relationship curve and the low frequency fatigue curve 4. This analysis provides a method for quantitative comparison between therapeutic interventions in mouse models of muscle disease 1,2,3,5, as well as comparison of the effects of genetic modification on muscle function 6,7,8,9.

To assess the in vivo effects of therapeutic interventions for muscle disease, methods are needed to quantitate force generation and fatigability in treated muscle. We detail an approach to evaluating myo-mechanical properties in explanted mouse hindlimb muscle. This analysis provides a robust approach to quantitating the effects of genetic modification on muscle function, as well as comparison of therapies in mouse models of muscle disease.

Myo-mecánico Análisis de músculo esquelético aislado

To assess the in vivo effects of therapeutic interventions for the treatment of muscle disease 1,2,3, quantitative methods are needed that measure force ...

Investigación

Medicina

Skeletal Muscle Gender Dimorphism from Proteomics

Gross contraction in skeletal muscle is primarily determined by a relatively small number of contractile proteins, however this tissue is also remarkably adaptable to environmental factors1 such as hypertrophy by resistance exercise and atrophy by disuse. It thereby exhibits remodeling and adaptations to stressors (heat, ischemia, heavy metals, etc.)2,3. Damage can occur to muscle by a muscle exerting force while lengthening, the so-called eccentric contraction4. The contractile proteins can be damaged in such exertions and need to be repaired, degraded and/or resynthesized; these functions are not part of the contractile proteins, but of other much less abundant proteins in the cell. To determine what subset of proteins is involved in the amelioration of this type of damage, a global proteome must be established prior to exercise5 and then followed subsequent to the exercise to determine the differential protein expression and thereby highlight candidate proteins in the adaptations to damage and its repair. Furthermore, most studies of skeletal muscle have been conducted on the male of the species and hence may not be representative of female muscle. 
In this article we present a method for extracting proteins reproducibly from male and female muscles, and separating them by two-dimensional gel electrophoresis followed by high resolution digital imaging6. This provides a protocol for spots (and subsequently identified proteins) that show a statistically significant (p &lt; 0.05) two-fold increase or decrease, appear or disappear from the control state. These are then excised, digested with trypsin and separated by high-pressure liquid chromatography coupled to a mass spectrometer (LC/MS) for protein identification (LC/MS/MS)5. This methodology (Figure 1) can be used on many tissues with little to no modification (liver, brain, heart etc.).

A straight-forward set of methods to isolate and determine the identity of the most abundant proteins expressed in skeletal muscle. About 800 spots are discerned on a two-dimensional gel from 10 mg muscle; this allows for the determination of gender-specific protein expression. These methods will give equivalent results in most tissues.

Músculo Esquelético dimorfismo de género de Proteómica

Gross contraction in skeletal muscle is primarily determined by a relatively small number of contractile proteins, however this tissue is also remarkably ...

Skin Punch Biopsy Explant Culture for Derivation of Primary Human Fibroblasts

Tissues and cell lines derived from an individual with disease are ideal sources to study disease-related cellular phenotypes. Patient-derived fibroblasts in this protocol have been successfully used in the derivation of induced pluripotent stem cells to model disease1. Early passages of these fibroblasts can also be used for cell-based functional assays to study specific disease pathways, mechanisms2 and subsequent drug screening approaches. The advantage of the presented protocol over enzymatic procedures are 1) the reproducibility of the technique from small amounts of tissue derived from older patients, e.g. patients affected with Parkinson's disease, 2) the technically simple approach over more challenging methodologies using enzymatic treatments, and 3) the time consideration: this protocol takes 15-20 min and can be performed immediately after biopsy arrival. Enzymatic treatments can take up to 4 hr and have the problems of overdigestion, reduction of cell viability and subsequent attachment of cells when not handled properly. This protocol describes the dissection and preparation of a 4-mm human skin biopsy for derivation of a fibroblast culture and has a very high success rate which is important when dealing with patient-derived tissue samples. In this culture, keratinocytes migrate out of the biopsy tissue within the first week after preparation. Fibroblasts appear 7-10 days after the first outgrowth of keratinocytes. DMEM high glucose media supplemented with 20% FBS favors the growth of fibroblasts over keratinocytes and fibroblasts will overgrow the keratinocytes. After 2 passages keratinocytes have been diluted out resulting in relatively homogenous fibroblast cultures which expresses the fibroblast marker SERPINH1 (HSP-47). Using this approach, 15-20 million fibroblasts can be derived in 4-8 weeks for cell banking. The skin dissection takes about 15-20 min, cells are then monitored once a day under the microscope, and media is changed every 2-3 days after attachment and outgrowth of cells.

The fibroblast explant culture protocol from human skin punch biopsies is a technically robust and simple way to derive skin cells within 4-8 weeks for banking of about 15-20 million cells at a low passage number.

Piel biopsia en sacabocados explante cultura para Derivación de fibroblastos humanos primarios

Tissues and cell lines derived from an individual with disease are ideal sources to study disease-related cellular phenotypes. Patient-derived fibroblasts ...

Tibial Nerve Transection - A Standardized Model for Denervation-induced Skeletal Muscle Atrophy in Mice

The tibial nerve transection model is a well-tolerated, validated, and reproducible model of denervation-induced skeletal muscle atrophy in rodents. Although originally developed and used extensively in the rat due to its larger size, the tibial nerve in mice is big enough that it can be easily manipulated with either crush or transection, leaving the peroneal and sural nerve branches of the sciatic nerve intact and thereby preserving their target muscles. Thus, this model offers the advantages of inducing less morbidity and impediment of ambulation than the sciatic nerve transection model and also allows investigators to study the physiologic, cellular and molecular biologic mechanisms regulating the process of muscle atrophy in genetically engineered mice. The tibial nerve supplies the gastrocnemius, soleus and plantaris muscles, so its transection permits the study of denervated skeletal muscle composed of fast twitch type II fibers and/or slow twitch type I fibers. Here we demonstrate the tibial nerve transection model in the C57Black6 mouse. We assess the atrophy of the gastrocnemius muscle, as a representative muscle, at 1, 2, and 4 weeks post-denervation by measuring muscle weights and fiber type specific cross-sectional area on paraffin-embedded histologic sections immunostained for fast twitch myosin.

The tibial nerve transection model is a well-tolerated, validated, and reproducible model of skeletal muscle atrophy. The model surgical protocol is described and demonstrated in C57Black6 mice. &#160;

Transección del nervio tibial - Un modelo normalizado para la atrofia del músculo esquelético denervación inducida en ratones

The tibial nerve transection model is a well-tolerated, validated, and reproducible model of denervation-induced skeletal muscle atrophy in rodents. ...

Murine Cervical Heart Transplantation Model Using a Modified Cuff Technique

Mouse models are of special interest in research since a wide variety of monoclonal antibodies and commercially defined inbred and knockout strains are available to perform mechanistic in vivo studies. While heart transplantation models using a suture technique were first successfully developed in rats, the translation into an equally widespread used murine equivalent was never achieved due the technical complexity of the microsurgical procedure. In contrast, non-suture cuff techniques, also developed initially in rats, were successfully adapted for use in mice1-3. This technique for revascularization involves two major steps I) everting the recipient vessel over a polyethylene cuff; II) pulling the donor vessel over the formerly everted recipient vessel and holding it in place with a circumferential tie. This ensures a continuity of the endothelial layer, short operating time and very high patency rates4.
Using this technique for vascular anastomosis we performed more than 1,000 cervical heart transplants with an overall success rate of 95%. For arterial inflow the common carotid artery and the proximal aortic arch were anastomosed resulting in a retrograde perfusion of the transplanted heart. For venous drainage the pulmonary artery of the graft was anastomosed with the external jugular vein of the recipient5.
Herein, we provide additional details of this technique to supplement the video.

The murine cervical heart transplantation model is well suited for immunological as well as ischemia reperfusion injury studies. We modified the procedure using a non-suture cuff technique and performed more than 1,000 successful transplants with this approach.
Herein, we provide additional details of this technique to supplement the video.

Murino Cervical Trasplante Cardiaco Modelo Usando una técnica de Cuff Modificado

Mouse models are of special interest in research since a wide variety of monoclonal antibodies and commercially defined inbred and knockout strains are ...

High-throughput Flow Cytometry Cell-based Assay to Detect Antibodies to N-Methyl-D-aspartate Receptor or Dopamine-2 Receptor in Human Serum

Over the recent years, antibodies against surface and conformational proteins involved in neurotransmission have been detected in autoimmune CNS diseases in children and adults. These antibodies have been used to guide diagnosis and treatment. Cell-based assays have improved the detection of antibodies in patient serum. They are based on the surface expression of brain antigens on eukaryotic cells, which are then incubated with diluted patient sera followed by fluorochrome-conjugated secondary antibodies. After washing, secondary antibody binding is then analyzed by flow cytometry. Our group has developed a high-throughput flow cytometry live cell-based assay to reliably detect antibodies against specific neurotransmitter receptors. This flow cytometry method is straight forward, quantitative, efficient, and the use of a high-throughput sampler system allows for large patient cohorts to be easily assayed in a short space of time. Additionally, this cell-based assay can be easily adapted to detect antibodies to many different antigenic targets, both from the central nervous system and periphery. Discovering additional novel antibody biomarkers will enable prompt and accurate diagnosis and improve treatment of immune-mediated disorders.

Over the recent years, live cell-based assays have been used successfully to detect antibodies against surface and conformational antigens. Here, we describe a method using high-throughput flow cytometry enabling the analysis of large cohorts of patients. Detection of novel antibodies will improve diagnosis and treatment of immune-mediated disorders.

Ensayo de alto rendimiento basado en células citometría de flujo para detectar anticuerpos a la N-metil-D-aspartato receptor o dopamina-2 del receptor en suero humano

Over the recent years, antibodies against surface and conformational proteins involved in neurotransmission have been detected in autoimmune CNS diseases ...

Preparation and Respirometric Assessment of Mitochondria Isolated from Skeletal Muscle Tissue Obtained by Percutaneous Needle Biopsy

Respirometric profiling of isolated mitochondria is commonly used to investigate electron transport chain function. We describe a method for obtaining samples of human Vastus lateralis, isolating mitochondria from minimal amounts of skeletal muscle tissue, and plate based respirometric profiling using an extracellular flux (XF) analyzer. Comparison of respirometric profiles obtained using 1.0, 2.5 and 5.0 &#956;g of mitochondria indicate that 1.0 &#956;g is sufficient to measure respiration and that 5.0 &#956;g provides most consistent results based on comparison of standard errors. Western blot analysis of isolated mitochondria for mitochondrial marker COX IV and non-mitochondrial tissue marker GAPDH indicate that there is limited non-mitochondrial contamination using this protocol. The ability to study mitochondrial respirometry in as little as 20 mg of muscle tissue allows users to utilize individual biopsies for multiple study endpoints in clinical research projects.

Methods for biopsy of Vastus lateralis, preparation of purified mitochondria, and respirometric profiling are described. The use of small muscle volume makes this technique suitable for clinical research applications.

Evaluación de Preparación y respirometría de mitocondrias aisladas de tejido músculo esquelético Obtenidos percutánea Biopsia con aguja

Respirometric profiling of isolated mitochondria is commonly used to investigate electron transport chain function. We describe a method for obtaining ...

Human Vastus Lateralis Skeletal Muscle Biopsy Using the Weil-Blakesley Conchotome

Percutaneous muscle biopsy using the Weil-Blakesley conchotome is well established in both clinical and research practice. It is a safe, effective and well tolerated technique. The Weil-Blakesley conchotome has a sharp biting tip with a 4 - 6 mm wide hollow. It is inserted through a 5 - 10 mm skin incision and can be maneuvered for controlled tissue penetration. The tip is opened and closed within the tissue and then rotated through 90 -180&#176; to cut the muscle. The amount of muscle obtained following repeated sampling can vary from 20 mg to 290 mg which can be processed for both histology and molecular studies. The wound needs to be kept dry and vigorous physical activity kept to a minimum for approximately 72 hr although normal levels of activity can restart immediately following the procedure. This procedure is safe and effective when close attention is paid to the selection of subjects, full asepsis and post procedure care. &#160;Both right and left vastus lateralis are suitable for biopsy dependent on participant preference.

Human Vastus Lateralis Skeletal Muscle Biopsy Using the Weil-Blakesley Conchotome

This video demonstrates the technique of percutaneous muscle biopsy of the human vastus lateralis using the Weil-Blakesley conchotome.

Humano<em&gt; vasto externo</em&gt; Esquelético biopsia muscular utilizando el Weil-Blakesley Conchotome

Percutaneous muscle biopsy using the Weil-Blakesley conchotome is well established in both clinical and research practice. It is a safe, effective and ...

Phosphorus-31 Magnetic Resonance Spectroscopy: A Tool for Measuring In Vivo Mitochondrial Oxidative Phosphorylation Capacity in Human Skeletal Muscle

Skeletal muscle mitochondrial oxidative phosphorylation (OXPHOS) capacity, which is critically important in health and disease, can be measured in vivo and noninvasively in humans via phosphorus-31 magnetic resonance spectroscopy (31PMRS). However, the approach has not been widely adopted in translational and clinical research, with variations in methodology and limited guidance from the literature. Increased optimization, standardization, and dissemination of methods for in vivo 31PMRS would facilitate the development of targeted therapies to improve OXPHOS capacity and could ultimately favorably impact cardiovascular health. 31PMRS produces a noninvasive, in vivo measure of OXPHOS capacity in human skeletal muscle, as opposed to alternative measures obtained from explanted and potentially altered mitochondria via muscle biopsy. It relies upon only modest additional instrumentation beyond what is already in place on magnetic resonance scanners available for clinical and translational research at most institutions. In this work, we outline a method to measure in vivo skeletal muscle OXPHOS. The technique is demonstrated using a 1.5 Tesla whole-body MR scanner equipped with the suitable hardware and software for 31PMRS, and we explain a simple and robust protocol for in-magnet resistive exercise to rapidly fatigue the quadriceps muscle. Reproducibility and feasibility are demonstrated in volunteers as well as subjects over a wide range of functional capacities.

Phosphorus-31 Magnetic Resonance Spectroscopy: A Tool for Measuring In Vivo Mitochondrial Oxidative Phosphorylation Capacity in Human Skeletal Muscle

This work demonstrates the feasibility of an in vivo phosphorus-31 magnetic resonance spectroscopy (31PMRS) technique to quantify mitochondrial oxidative phosphorylation (OXPHOS) capacity in human skeletal muscle.

El fósforo-31 espectroscopía de resonancia magnética: una herramienta para medir<em&gt; En Vivo</em&gt; Capacidad de la fosforilación oxidativa mitocondrial en el músculo esquelético humano

Skeletal muscle mitochondrial oxidative phosphorylation (OXPHOS) capacity, which is critically important in health and disease, can be measured in vivo ...

Mouse Model for Pancreas Transplantation Using a Modified Cuff Technique

Mouse models have several advantages in transplantation research, including easy handling, a variety of genetically well-defined strains, and the availability of the widest range of molecular probes and reagents to perform in vivo as well as in vitro studies. Based on our experience with various murine transplantation models, we developed a heterotopic pancreas transplantation model in mice with the intent to analyze mechanisms underlying severe ischemia reperfusion injury-associated early graft damage. In contrast to previously described techniques using suture techniques, herein we describe a new procedure using a non-suture cuff technique. 
In recent years, we have performed more than 300 pancreas transplantations in mice with an overall success rate of &gt;90%, a success rate never described before in mouse pancreas transplantation. The backbone of this non-suture cuff technique for graft revascularization consists of two major steps: (I) pulling the recipient vessel over a polyethylene/polyamide cuff and fixing it with a circumferential ligature, and (II) placing the donor vessel over the everted recipient vessel and fixing it with a second circumferential ligature. The resultant continuity of the endothelial layer results in less thrombogenic lesions with high patency rates and, finally, high success rates.
In this model, arterial anastomosis is achieved by pulling the abdominal aorta of the donor graft over the everted common carotid artery of the recipient animal. Venous drainage of the graft is achieved by pulling the portal vein of the graft over the everted external jugular vein of the recipient. This manuscript provides details and crucial steps of the organ recovery and organ implantation procedures, which will allow researchers with microsurgical skills to perform the transplantation successfully in their laboratories.

Among abdominal solid organ transplantation, pancreatic grafts are prone to develop severe ischemia reperfusion injury-associated graft damage, leading eventually to early graft loss. This protocol describes a model of murine pancreas transplantation using a non-suture cuff technique, ideally suited for analyzing these early, deleterious damages.