자금 지원 선언 없습니다.

설명 된 골격 근육 절차는 애팔 래 치아 주립 대학위원회 (Institutional Review Board)의 지침을 따른다. NOTE : 팀 연산자 (박사 또는 생검 기법에서 숙련 MD), 및 적어도 하나의 구성되지만 이상적으로, 세 개 이상의 기술자. 오퍼레이터는 전도성 및 골격근 생검 절차의 모든 측면을 감독하고있다. 한 기술자 (기술자 # 1) 근육​​ 추출의 모든 측면을 돕는 오퍼레이터 즉시 책임이있다. 이것은 &quot;비 멸균 손&quot;인 및 멸균 주사기로 흡입을 적용 포함되어 있습니다. 둘째 기술자 (기술자 # 2) 주체의 불안을 최소화하기 위해 절차를 수행하는 동안 피사체와 마사지 피사체의 반대 다리와 대화에 종사. 셋째 기술자 (3 기술자 #)는 취급 및 골격근 샘플을 처리 할 책임이있다. 다운 스트림 분석 방법은 얼마나 많은와 T를 지시하는 ional 기술자 골격 근육 샘플을 준비 / 처리를 위해 필요합니다. 1 주제 준비 <ol><li> 수집 준비하고 근육 생검 절차 (표 1)에 지정된 물질을 구성. 오염 제거 및 버그 스트롬 바늘 (외측 및 내측 뉼러 투관침) 및 16 표준 관행에 따라 플런저 살균. </li><li> 피사체 동의서를 검토합니다. 애팔 래 치아 주립 대학에서 사용하는 양식을 참여 할 수있는 동의의 골격 근육 조직 검사 부분은 온라인으로 보충 한에 제공됩니다. <ol><li> 절차의 가능한 위험, 피부 준비, 마취의 응용 프로그램, 일반적인 감각에 초점을 맞춘 근육 생검 절차의 일반적인 측면에 대한 주제로 이야기하십시오. 조심스럽게 양식을 참여 및 연구 설계 및 절차를 이해하는 것을 확인하기 위해 서명하는 동의서를 읽고 주제를 지시합니다. </li></ol></li><li> 의되었는지 확인변동될 알레르기하지 않습니다에 &quot;___ 케인&quot;형 약물 (예를 들어, 리도카인). </li><li> 노출 된 허벅지와 패딩 테이블에 누운 거짓말 주제를 지시합니다. 피사체의 다리 아래에 플라스틱 받침 두 개의 일회용 흡수 underpads를 놓습니다. 따라서 단축 위치에 광근의 lateralis를 배치, 발 뒤꿈치 아래 작은 수건 롤, 같은 무릎이 완전히 확장되었는지 (상승 ~ 1cm)으로 편안하게 다리를 놓습니다. </li><li> 조작자가 생검 사이트 가시화 될 수 있도록 일시적으로 노출 허벅지의 근육을 수축 피사체를 지시하게한다. 주 : 광근 단지 대퇴근 (illiotibial 밴드), 슬개골의 상단과 대전 자부 (7) 사이의 거리의 약 3 분의 1로되어 전방 생검 사이트 lateralis. </li><li> 아래 사항을 운영자 마르크 (~ 0.5 cm) 좋은 점 영구 마커 절개 사이트를 가지고있다. </li><li> 운영자는 pinc에 의해 대략적인 피하 지방의 두께를 결정 했피하 지방을 힝. </li><li> 연산자를 가지고 기술자 비누와 따뜻한 물로 손을 씻고 일회용 장갑을 돈. </li><li> 운영자가 (가위로) 생검 사이트 주위 ~ 지역에서 15cm X 15cm를 머리를 제거해야합니다. 생검 사이트에서 머리를 클리핑 절차를 수행하는 동안 절개에 들어가기에서 닫는 동안 머리를 방지하고, 머리 제거는 테이프 폐쇄 피부 (3.4 참조) 사이의 더 나은 접촉을 허용 : 있습니다. </li><li> 운영자가 면봉으로 영역을 소독이 국소 소독제로 미리 적신 (요오드 / 조개류에 알레르기 과목 포비돈 - 요오드 클로르헥시딘 글루 콘산 등). 중앙에서 시작하여 클리핑 영역의 바깥 가장자리쪽으로 동심원으로 작동합니다. 최소한, 새로운 사전 흠뻑 젖은 면봉으로 두 번 더 할 때마다 반복합니다. </li></ol> 2 생검 절차 <ol><li> 운영자가, 일회용 장갑을 제거 비누와 따뜻한 물로 손을 씻고, 멸균 수술 GL을 돈이무균 기술을 사용하여 oves. </li><li> 기술자 # 1 현재에게 운영자에게 살균 fenestrated 드레이프가 있습니다. 무균 기술을 사용하여 연산자를 가지고 무균 영역을 유지하기 위해 조직 검사 사이트를 통해 드레이프를 놓습니다. </li><li> 기술자 # 1 본보기 유무 연산자 무균 기술을 유지하면서 21 G 바늘 장착 5 ㎖ 주사기. 알코올 면봉으로 리도카인 유리 병의 상단을 청소합니다. <ol><li> 운영자가 바로 리도카인 5 ㎖을 인출하게한다. 주사기에서 21 G 바늘을 제거하고 날카로운 물건 용기에 바늘을 폐기​​합니다. </li><li> 무균 기술을 유지하면서 기술자 # 1 현재에게 1 ½ 인치 25 G 바늘 연산자를 가지고있다. 운영자 놓고 주사기 상에 1 ½ 인치 바늘이 주사기에서 공기 방울을 대피. </li></ol></li><li> 절개 사이트에서 기술자 # 1 스프레이 에틸 클로라이드 (~을 피부에 지울 수없는 잉크 마르크 이상 0.5 cm)이 피부에 나타날 때까지 &quot;희게.&quot; <ol><li> 하조작자가 직경 &quot;여과포&quot;2-4밀리미터 생산 리도카인 100 ~ μL와 침투 한 후, 피부 진피에 대략 수평 바늘을 삽입 바늘 대기음 및 없는데. <ol><li> 바늘이 혈관에 배치되어 있지 않은 것을 확인하기 위해 (약간 주사기의 플런저를 철회) 운영자에게 대기음 바늘을 가지고있다. 혈액이 주사기에 나타나면, 바늘을 철회 날카로운 물건 용기에 버리고 2.3에서 다시 시작합니다. </li><li> , 운전자에게 미리 피하 조직에 주사 바늘을 가지고 니들 대기음 후 여과포를 형성하기 위해 리도카인 ~ 1 ml의 조직으로 침투. 물집이 가라되면 근막에 피상적 중지, 수직 절개 부위에 리도카인로드 주사기에 1 ½ 인치 바늘을 삽입합니다. 참고 : 피사체가 (봉침과 유사) 리도카인의 초기 주입시 약간의 순간 쏘는 감각을 느낄 수 있습니다. </li></ol></li><li> 운전 방식 있는지 확인그것은 17 ~ 19 myotoxic 때문에 또는 lidocoine와 근육에 침투하지 않습니다. </li><li> 운영자 흡인에게 바늘을하고 허벅지에서 바늘을 철회하면서 천천히 리도카인의 나머지 4 ㎖의 주사. 주사 부위를 통해 멸균 거즈를 놓고 국소 마취제가 적용되는 동안 피사체가 휴식을 취할 수 있습니다. </li></ol></li><li> 무균 기술을 유지하면서 2 ~ 3 분 후, 운영자 메스를 기술자 # 1 본이있다. <ol><li> 가볍게 영역이 마취되어 있는지 확인하기 위해 메스의 팁 생검 사이트를 조사 연산자를 가지고있다. 필요한 경우, 절개 부위에 리도카인의 또 다른 3 ~ 4 ㎖의 주사 2.4.1.2를 참조하십시오. </li></ol></li><li> 조작자가 대퇴골에 피부와 피하 조직 (~ 잉크 마크 위 2-3mm)를 통해 평행 직선 1 cm 절개를 확인하게한다. <ol><li> 조작자가 근육에 근막 통해 절개 있도록 메스 깊이 삽입하게한다. 각 방향으로 한 번이 작업을 수행<html> . 참고 : 피사체가 근육에 메스 블레이드 상처 경우 깊은 컷 쑤시는듯한 아픔하거나 압력을 느낄 수 있습니다. </li><li> 기술자 # 2를 가지고하는 것은 대화의 주제를 참여 반대 다리를 마사지. </li></ol></li><li> 운영자 장소에게 절개 생검 사이트를 통해 멸균 거즈의 자유 양을하고 출혈을 줄이기 위해 절개에 직접 압력을 적용합니다. <ol><li> 기술자 # 1 일회용 60 ML의 주사기와 30cm 확장 튜브 (그림 1)에 3 방향 금속 꼭지를 연결해야합니다. </li><li> 기술자 # 1 확장 호스의 자유 단부에 테이퍼 플라스틱 호스 연결 관의 한쪽 끝을 연결하고 단단히의 ~ 15-18mm과 200 μL 피펫 팁의 큰 단부에 테이퍼 플라스틱 호스 연결 관의 타단을 삽입 유무 끝은 절단. </li></ol></li></ol>.JPG &quot;폭 =&quot;500 &quot;/&gt; 그림 1 버그 스트롬 바늘. (A) 버그 스트롬 바늘 (5mm)은 (a) 외측 뉼러 및 (b) 내부 투관침 구성되어, 관련 구성 요소는 (c), 플런저 (D) 15-18밀리미터가 잘린 ~ 200 μL 피펫 팁을 포함 (전자) 테이퍼 플라스틱 커넥터, (f)는 3 웨이 금속 꼭지, (g) 30cm 확장 튜브, 및 (H) 일회용 60 ML의 주사기. (B) 버그 스트롬 바늘 (5mm) 및 관련 부품 조립. ( C) 철회 버그 스트롬 바늘 (5mm)의 내부 투관침은 약 1cm는 외부 캐 뉼러의 창을 엽니 다. <ol start="9"><li> 출혈이 가라 앉은 후, 기술자 # 1은 오토 클레이브 멸균 봉지를 열고 무균 기술을 유지하면서, 오퍼레이터 5mm 생검 바늘 및 내측 투관침 (도 1)을 제시한다. <ol><li> 작업자는 바늘 (외측 및 내측 뉼러 투관침)을 조립 한 배향 및 슬라이딩 동작을 확인한다. </li> &lt;/ OL&gt; </li><li> 연산자를 가지고 확실하게 회전하는 내부 투관침을 방지하기 위해 두 손으로 니들 어셈블리 (외부 정맥 및 내부 투관침)을 누르고 있습니다. 기술자 # 1은 단단히 약간 하향 비틀림 모션 생검 바늘의 내 ​​투관침 부의 상부로 잘라 피펫 팁을 삽입했다. 운영자 또는 생검 바늘 만 피펫 팁을 만지지 않는 기술자 # 1을 확인하십시오. </li><li> 조작자가 절개를 통해 조직으로 생검 바늘을 도입하게한다. 생검 바늘의 끝 근막의 절개 (인수 &quot;느낌&quot;)을 찾습니다. 바늘이 근육으로 전진으로 바닥을 향해 아래로 바늘 바로 다음 근막과 각도를지나 바늘을 전진. 참고 : 주제는 근막을 통해 절개 생검 바늘의 끝 위치와 바늘이 근육으로 전진 등 일부 경미한 불편 함 (예를 들어, &quot;깊은 압력&quot;또는 가벼운 경련 감각)가 발생할 수 있습니다. <ol> &lt;리&gt; &quot;편안한&quot;체류 기술자 # 2 지시합니다에게 주제를 가지고 운전자가 근육에 바늘을 진행하는 동안 자신의 허벅지 근육을 수축하지. </li></ol></li><li> 생검 바늘 위치에 오면, 일회용 60 ML의 주사기를 엽니 운영자 신호 기술자 # 1이 있습니다. <ol><li> 기술자 # 1이 빠르게 생검 바늘 내에서 흡입을 만들기 위해 40 ~ 50 CC 마크에 열려 일회용 60 ML의 주사기를 가져 되세요. </li><li> 조작자가 근육 내 외측 투관침의 위치를​​ 유지하면서 외부 캐 뉼러의 창을 열고 밖으로 약 1cm 내측 투관침 당겨있다. 운영자가 신속하게 (클립)를 절단하고 근육 시료를 수집하는 내측 투관침을 닫고있다. 흡입을 해제 운영자 신호 기술자 # 1 되세요. </li><li> 기술자 # 1 흡입을 해제 할 수있는 방에 콕을 열고있다. </li><li> 연산자를 가지고 생검 바늘을 90 ° 회전하고 프로세스를 반복합니다. 필요한 경우, 운전자가 반복 하오(4 탄창 총) 3 배 회전 절차를 t. </li></ol></li><li> 근막이나 피부 끼이지 않도록주의하면서, 허벅지에서 생검 바늘을 제거하는 동안 운전자가 멸균 거즈로 절개 사이트에 직접 반대 압력을 적용해야합니다. 상당한 저항이 느껴지는 경우 내측 투관침에 비틀림 운동을인가하면서, 다시 잘랐다. </li><li> 허벅지로부터 생검 바늘 제거하여, 시각적으로 조직의 적절한 양이 수집되었는지 추정 외측 뉼러의 루멘을 검사하기 위해 운전자가 다시 1cm를 내측 투관침 당겨있다. <ol><li> 작업자 손에게 # 1을 기술자에게 생검 바늘을 가지고있다. 무균 기법은 그 기술자 # 1을 위해 유지하기 만하면 바늘 아니라 운영자 접촉. 기술자 # 1 손에게 # 3를 기술자에게 생검 바늘을 가지고있다. </li></ol></li><li> 기술자 # 3 제거에게 생검 바늘의 조직을 가지고있다. <ol><li> 기술자 # 3 사용에게 플런저 (그림 1) 및 미세 팁 포셉 한 쌍을 가지고모든 근육 조직이 내부 투관침과 바깥 쪽 정맥에서 제거되었는지 확인합니다. </li><li> 기술자 # 3 신속 근조직의 충분한 양이 수집되었는지 확인하고 빙냉 해부 블록에 샘플을 배치하는 시료의 무게를 가지고있다. </li></ol></li><li> 기술자 # 3주의 깊게 근육 샘플에서 볼 결합 조직과 지방을 해부있다. 기술자 # 3은 하류의 분석에 따라 저장을 위해 근육 샘플을 준비했다. 예를 들어, 즉시 cryovial에서 샘플을 배치하고 액체 질소에 동결 스냅 마운트의 RNase 억제제 등으로 cryovial에서 조직 학적, 또는 장소를 동결 </li><li> 필요한 경우 무균 기술을 유지하면서, 제 멸균 생검 바늘 절차를 반복한다. </li></ol> 3 폐쇄 <ol><li> 작업자는 멸균 거즈 10-15 분 동안 얼음 팩 생검 사이트에 직접 압력을 적용하게한다. </li><li> 지혈이 달성되면, 오퍼레이터 사용 알콜 (PR)를 가지고EP 패드는 절개 주변에서 말린 혈액을 제거합니다. </li><li> 기술자 # 1 현재에게 운영자에게 국소 수술 접착제 도포 기의 튜브를 가지고있다. 조작자가 선단 도포 또는 튜브의 상단을 건드리지 않고 수술 접착제 도포의 튜브를 조립하게한다. </li><li> 한편으로 건조 절개 수술 맨 위에 접착제의 단일 층을 도포하는 동안 운전자가 절개 한 손으로 당겨 닫혀있다. 접착제 경화 (~ 90 초) 후, 절개 테이프 closuresperpendicular을 적용합니다. 또한,이 무균 4-0 봉합과 절개를 닫습니다. </li><li> 조작자가 절개 사이트 3-4 2 &quot;× 2&quot;비 멸균 거즈 패드를 배치하여 직접 압력을 적용하고 자기 부착 접착제로 고정 랩이있다. </li><li> 조작자가 구두 피사체 적절한 상처 치료, 정상 및 비정상 반응에 작성 지시 한 다음 1~4일위한 활동 가이드 라인 (온라인 SU 참조 제공 유무pplement 2). </li></ol>

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The authors have no conflicts of interest.

이 동영상은 ASU 인간 성능 연구소에서 사용되는 골격 근육 생검 절차의 단계별 요약을 제공합니다. 작은 수정 사항이 절차는, 지난 13 년 동안 약 1600 근육 조직 검사를 수집하는 데 사용되었다. 근육 생검 샘플은 중요한 연구의 발견으로 이어지는, 스포츠 영양 기초 연구에 중요한 자료를 제공하고 있습니다. 수정 된 버그 스트롬 골격 근육 조직 검사 기법을 수행 할 때주의해...

경피적 또는 &#39;세미 오픈&#39;조직 검사 기술은 인간의 환자와 연구 대상에서 골격 근육 조직 표본을 얻기 위해 사용된다. 뒤 시엔 느 (1,806에서 1,875 사이)은 경피적 생검 일을 통해 생활 과목에서 골격 근육을 얻기 위해 투관침으로 바늘을 구성하는 것이 첫번째로 적립됩니다. 1960 년대에 버그 스트롬은 뒤 시엔 느 2-4에서 기재 한 것과 유사한 경피적 생검 바늘을 도입했다. 20 년 후, 에반스 등. 5 버그 스트롬 바늘의 절단 투관침을 통해 흡입을 적용하여 기술을 수정했습니다. 본 변형 예에서는 5 배 6,7 티슈 3의 수율을 향상시킬 수 있고, 생물 의학 연구와 임상 설정에서 사용된다. 이 기술은 가지고 있으며, 근육 병증의 진단 및 골격 근육의 구조와 기능에 대한 우리의 이해를 지속적으로 육성 해 나갈 것입니다. 경피적 근육 생검 기법이다 straightforward. 제대로 할 때, 무균 기술에 대한 엄격한 준수와 관련된 위험을 최소화합니다. 근육 조직 검사 절차는 연구 프로젝트에 대한 임상 도구로 간주된다. 일부 교육 기관은 근육 조직 검사를 얻기 위해, 직접 의사의 감독으로, 박사 학위와 교수 연구원을 교육 훈련을 받았 다른 기술을 수행하는 보드 인증 의사를 필요로합니다. ASU 조직 검사 팀은 이전에는 성공적으로 십삼년 8-15 중 1600여 근육 생검을 수행하고있다. 이 동영상의 목적은 인체의 측광 근 lateralis에서 골격근 조직 샘플을 얻기 위해 수정 된 버그 스트롬 바늘 경피적 근육 생검 기법 5를 설명한다.

<table><tbody><tr><td>Bergstr&amp;ouml;m biopsy needle, 5 x 100 mm</td><td>Stille Surgical Inc.</td><td>119-29187-50</td><td>1 ea</td></tr><tr><td>Durasorb blue pad</td><td>Fisher</td><td>22-031-340</td><td>case of 300</td></tr><tr><td>Prep razor disposable</td><td>Moore Medical</td><td>89760</td><td>1 ea</td></tr><tr><td>Shave cream</td><td>Moore Medical</td><td>92869</td><td>1 can</td></tr><tr><td>Alcohol swab</td><td>Moore Medical</td><td>98721</td><td>box/200</td></tr><tr><td>Povidone-iodine swabsticks (3 pack)</td><td>Moore Medical</td><td>90691</td><td>pack of 50</td></tr><tr><td>Face masks</td><td>Fisher</td><td>19-039-690</td><td>case of 50</td></tr><tr><td>Sterile gloves; sz 6.5</td><td>Moore Medical</td><td>68128</td><td>box of 50 pairs</td></tr><tr><td>Sterile gloves; sz 7.0</td><td>Moore Medical</td><td>68129</td><td>box of 50 pairs</td></tr><tr><td>Sterile gloves; sz 8.5</td><td>Moore Medical</td><td>68132</td><td>box of 50 pairs</td></tr><tr><td>Fenestrated towel drape</td><td>Moore Medical</td><td>92712</td><td>case of 50</td></tr><tr><td>Lidocaine (1% HCl, w/o Epi)</td><td>Dealmed</td><td>427902</td><td>30 cc vial</td></tr><tr><td>Ethyl chloride spray</td><td>Dealmed</td><td>386020</td><td>3.5 fl. Oz. bottle</td></tr><tr><td>5 ml syringe w/ 21 G needle</td><td>Fisher</td><td>14-827-48</td><td>case of 100</td></tr><tr><td>25 G 5/8&quot; needle</td><td>Fisher</td><td>14-826AA</td><td>case of 100</td></tr><tr><td>25 G 1 1/2&quot; needle</td><td>Fisher</td><td>14-826-49</td><td>case of 100</td></tr><tr><td>Single-use scalpels w/ #11 blade</td><td>Fisher</td><td>0-8927-5B</td><td>box of 20</td></tr><tr><td>60 ml Syringe</td><td>Fisher</td><td>13-689-8</td><td>case of 40</td></tr><tr><td>~30 inch extension tubing</td><td>Fisher</td><td>14-169-7A</td><td>roll of 50 ft</td></tr><tr><td>Metal stopcock</td><td>Fisher</td><td>01-290-38</td><td>each</td></tr><tr><td>Polypropylene tubing connector w/ tapered ends, 3.2 to 5.5 mm</td><td>Fisher</td><td>15-315-28A</td><td>case of 100</td></tr><tr><td>Yellow pipette tips (1-200 &amp;micro;l)</td><td>Fisher</td><td>02-681-2</td><td>cut off ~15-18 mm of the tip</td></tr><tr><td>Topical surgical adhesive</td><td>Medline</td><td>MSC091076</td><td>case of 36 tubes</td></tr><tr><td>Topical surgical adhesive</td><td>Medline</td><td>MSC091076Z</td><td>box of 6 tubes</td></tr><tr><td>Butterfly stitches (adhesive strips) 1/2&quot; x 4&quot; (6 per pack)</td><td>Moore Medical</td><td>93050</td><td>box/300</td></tr><tr><td>Bandadge, Strip, 3/4 x 3 in.</td><td>Fisher</td><td>19-027-202</td><td>pack of 100</td></tr><tr><td>Adhesive bandage (5 m rolls)</td><td>Fisher</td><td>19-027-768</td><td>case of 36</td></tr><tr><td>1&quot; paper surgical tape</td><td>Fisher</td><td>19-027-761</td><td>case of 12</td></tr><tr><td>Sutures (4-0 reverse cutting, FS2)</td><td>Moore Medical</td><td>82926</td><td>box of 36</td></tr><tr><td>4 x 4 Sterile gauze pads</td><td>Moore Medical</td><td>66949</td><td>pkg/50</td></tr><tr><td>2 x 2 Non-sterile gauze pads</td><td>Moore Medical</td><td>37336</td><td>pkg/200</td></tr><tr><td>3 x 4 Non-adherent pads</td><td>Moore Medical</td><td>74389</td><td>bx/100</td></tr><tr><td>Autoclave bags 3.5 x 9</td><td>Moore Medical</td><td>40390</td><td>box of 200</td></tr><tr><td>Autoclave bags 5.25 x 10</td><td>Moore Medical</td><td>40391</td><td>box of 200</td></tr><tr><td>Autoclave indicator tape</td><td>Moore Medical</td><td>31608</td><td>box of 250</td></tr><tr><td>Lab coats&amp;mdash;small</td><td>Fisher</td><td>23-900-520A&amp;nbsp;</td><td>10/pk</td></tr><tr><td>Lab coats&amp;mdash;medium</td><td>Fisher</td><td>23-900-520B&amp;nbsp;</td><td>10/pk</td></tr><tr><td>Lab coats&amp;mdash;large</td><td>Fisher</td><td>23-900-520C&amp;nbsp;</td><td>10/pk</td></tr><tr><td>Germicidal Disposable Cloth Wipes</td><td>Moore Medical</td><td>62879</td><td>Can/160</td></tr></tbody></table>

human skeletal muscle biopsy procedures using the modified bergstr&#246;m technique

경피적 생검 기술은 연구자와 임상의 골격 근육 조직 샘플을 수집 할 수 있습니다. 이 기술은 안전하고 매우 효과적이다. 이 동영상은 인체의 광근의 lateralis에서 골격 근육 조직 샘플을 얻기 위해 수정 된 버그 스트롬 바늘을 사용하여 경피적 생검 기술에 대해 설명합니다. 버그 스트롬 바늘 선단 절삭 블레이드 팁의 측면의 작은 개구 ( &#39;윈도우&#39;)와 내측 투관침과 캐 뉼러 외부로 구성된다. 국소 마취하고 무균 조건 하에서, 니들은 피부, 피하 조직 및 근막에 절개를 통하여 골격근에 진출한다. 다음에, 흡인 내측 투관침에인가되고, 따라서, 절단 또는 골격근 조직 샘플 패스, 외측 투관침은 골격근 조직을 흡인 외측 뉼러의 윈도우로 흡입되고, 다시 당기면, 내측 투관침 빠르게 닫혀 . 주사 바늘을 90 ° 회전(60), 그리고 또 다른 컷이 이루어집니다. 이 과정은 세 번 이상 반복 될 수있다. 이것은 여러 절단 기법은 일반적 건강한 피험자 100-200 밀리그램 이상의 샘플을 생산하고 동안, 직전에 수행 할 수 있으며, 운동이나 다른 간섭의 시합 후의. 절개 사이트의 후 조직 검사 드레싱에 따라, 환자는 일반적으로 바로 일상 생활의 활동을 재개하고 완벽하게 48 ~ 72 시간 이내에 격렬한 신체 활동에 참여할 수 있습니다. 주제는 근막의 절개를 통해 근육의 탈출증의 위험을 줄이기 위해 48 시간 동안 무거운 저항 운동을 피해야한다.

전술 한 바와 같이 근육 생검 절차가 신속하고 지속적으로 골격근 조직 샘플을 수집 할 수 있도록 연구. 건강, 체육 과목에서 전형적인 수율은 3-4 클립 단일 패스에서 200 밀리그램 이상이다. 절차는 절개 준비에 소요되는 대부분이 15 ~ 20 분, 소요. 운동 기반 연구에서 근육 샘플은 종종 복구하는 동안 수집 된 하나 또는 두 개의 샘플, 전후 운동을 가져옵니다. 이 디자인으로, 운동 후에 머리 (반대?...

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Human Skeletal Muscle Biopsy Procedures Using the Modified Bergstr&#246;m Technique

The purpose of this video is to present the modified Bergstr&#246;m skeletal muscle biopsy technique on human subjects.

수정 된 버그 스트롬 기술을 이용하여 인간의 골격 근육 생검 절차

The percutaneous biopsy technique enables researchers and clinicians to collect skeletal muscle tissue samples. The technique is safe and highly ...

human-skeletal-muscle-biopsy-procedures-using-modified-bergstrm

Research

JoVE Journal

Medicine

39.8K 조회수.  Appalacian State University. The purpose of this video is to present the modified Bergström skeletal muscle biopsy technique on human subjects. 

비디오: Human Skeletal Muscle Biopsy Procedures Using the Modified Bergström Technique

Isolation and Quantitative Immunocytochemical Characterization of Primary Myogenic Cells and Fibroblasts from Human Skeletal Muscle

The repair and regeneration of skeletal muscle requires the action of satellite cells, which are the resident muscle stem cells. These can be isolated from human muscle biopsy samples using enzymatic digestion and their myogenic properties studied in culture. Quantitatively, the two main adherent cell types obtained from enzymatic digestion are: (i) the satellite cells (termed myogenic cells or muscle precursor cells), identified initially as CD56+ and later as CD56+/desmin+ cells and (ii) muscle-derived fibroblasts, identified as CD56&#8211; and TE-7+. Fibroblasts proliferate very efficiently in culture and in mixed cell populations these cells may overrun myogenic cells to dominate the culture. The isolation and purification of different cell types from human muscle is thus an important methodological consideration when trying to investigate the innate behavior of either cell type in culture. Here we describe a system of sorting based on the gentle enzymatic digestion of cells using collagenase and dispase followed by magnetic activated cell sorting (MACS) which gives both a high purity (&#62;95% myogenic cells) and good yield (~2.8 x 106 &#177; 8.87 x 105 cells/g tissue after 7 days in vitro) for experiments in culture. This approach is based on incubating the mixed muscle-derived cell population with magnetic microbeads beads conjugated to an antibody against CD56 and then passing cells though a magnetic field. CD56+ cells bound to microbeads are retained by the field whereas CD56&#8211; cells pass unimpeded through the column. Cell suspensions from any stage of the sorting process can be plated and cultured. Following a given intervention, cell morphology, and the expression and localization of proteins including nuclear transcription factors can be quantified using immunofluorescent labeling with specific antibodies and an image processing and analysis package.

The main adherent cell types derived from human muscle are myogenic cells and fibroblasts. Here, cell populations are enriched using magnetic-activated cell sorting based on the CD56 antigen. Subsequent immunolabelling with specific antibodies and use of image analysis techniques allows quantification of cytoplasmic and nuclear characteristics in individual cells.

인간의 골격근에서 기본 근육 조직 세포와 섬유 아 세포의 분리 및 정량 면역 세포 화학 특성

The repair and regeneration of skeletal muscle requires the action of satellite cells, which are the resident muscle stem cells. These can be isolated ...

연구

발생학

Myo-mechanical Analysis of Isolated Skeletal Muscle

To assess the in vivo effects of therapeutic interventions for the treatment of muscle disease 1,2,3, quantitative methods are needed that measure force generation and fatigability in treated muscle. We describe a detailed approach to evaluating myo-mechanical properties in freshly explanted hindlimb muscle from the mouse. We describe the atraumatic harvest of mouse extensor digitorum longus muscle, mounting the muscle in a muscle strip myograph (Model 820MS; Danish Myo Technology), and the measurement of maximal twitch and tetanic tension, contraction time, and half-relaxation time, using a square pulse stimulator (Model S48; Grass Technologies). Using these measurements, we demonstrate the calculation of specific twitch and tetanic tension normalized to muscle cross-sectional area, the twitch-to-tetanic tension ratio, the force-frequency relationship curve and the low frequency fatigue curve 4. This analysis provides a method for quantitative comparison between therapeutic interventions in mouse models of muscle disease 1,2,3,5, as well as comparison of the effects of genetic modification on muscle function 6,7,8,9.

To assess the in vivo effects of therapeutic interventions for muscle disease, methods are needed to quantitate force generation and fatigability in treated muscle. We detail an approach to evaluating myo-mechanical properties in explanted mouse hindlimb muscle. This analysis provides a robust approach to quantitating the effects of genetic modification on muscle function, as well as comparison of therapies in mouse models of muscle disease.

절연 골격근의 묘 - 기계 분석

To assess the in vivo effects of therapeutic interventions for the treatment of muscle disease 1,2,3, quantitative methods are needed that measure force ...

의학

X-ray Diffraction of Intact Murine Skeletal Muscle as a Tool for Studying the Structural Basis of Muscle Disease

Transgenic mouse models have been important tools for studying the relationship of genotype to phenotype for human diseases including those of skeletal muscle. Mouse skeletal muscle has been shown to produce high quality X-ray diffraction patterns on third generation synchrotron beamlines providing an opportunity to link changes at the level of the genotype to functional phenotypes in health and disease by determining the structural consequences of genetic changes. We present detailed protocols for preparation of specimens, collecting the X-ray patterns and extracting relevant structural parameters from the X-ray patterns that may help guide experimenters wishing to perform such experiments for themselves.

We present detailed protocols for performing small-angle X-ray diffraction experiments using intact mouse skeletal muscles. With the wide availability of transgenic mouse models for human diseases, this experimental platform can form a useful test bed for elucidating the structural basis of genetic muscle diseases

근육 질환의 구조적 기초를 연구하기위한 도구로 그대로 뮤린 골격 근육의 X 선 회절

Transgenic mouse models have been important tools for studying the relationship of genotype to phenotype for human diseases including those of skeletal ...

Isolation, Culture, Characterization, and Differentiation of Human Muscle Progenitor Cells from the Skeletal Muscle Biopsy Procedure

The use of primary human tissue and cells is ideal for the investigation of biological and physiological processes such as the skeletal muscle regenerative process. There are recognized challenges to working with human primary adult stem cells, particularly human muscle progenitor cells (hMPCs) derived from skeletal muscle biopsies, including low cell yield from collected tissue and a large degree of donor heterogeneity of growth and death parameters among cultures. While incorporating heterogeneity into experimental design requires a larger sample size to detect significant effects, it also allows us to identify mechanisms that underlie variability in hMPC&#160;expansion capacity, and thus allows us to better understand heterogeneity in skeletal muscle regeneration. Novel mechanisms that distinguish the expansion capacity of cultures have the potential to lead to the development of therapies to improve skeletal muscle regeneration.

We present techniques for isolating, culturing, characterizing, and differentiating human primary muscle progenitor cells (hMPCs) obtained from skeletal muscle biopsy tissue. hMPCs obtained and characterized through these methods can be used to subsequently address research questions related to human myogenesis and skeletal muscle regeneration.

골격 근 생검 절차에서 인간 근육 선조 세포의 격리, 배양, 특성화 및 분화

The use of primary human tissue and cells is ideal for the investigation of biological and physiological processes such as the skeletal muscle ...

Performing Human Skeletal Muscle Xenografts in Immunodeficient Mice

Treatment effects observed in animal studies often fail to be recapitulated in clinical trials. While this problem is multifaceted, one reason for this failure is the use of inadequate laboratory models. It is challenging to model complex human diseases in traditional laboratory organisms, but this issue can be circumvented through the study of human xenografts. The surgical method we describe here allows for the creation of human skeletal muscle xenografts, which can be used to model muscle disease and to carry out preclinical therapeutic testing. Under an Institutional Review Board (IRB)-approved protocol, skeletal muscle specimens are acquired from patients and then transplanted into NOD-Rag1null IL2r&gamma;null (NRG) host mice. These mice are ideal hosts for transplantation studies due to their inability to make mature lymphocytes and are thus unable to develop cell-mediated and humoral adaptive immune responses. Host mice are anaesthetized with isoflurane, and the mouse tibialis anterior and extensor digitorum longus muscles are removed. A piece of human muscle is then placed in the empty tibial compartment and sutured to the proximal and distal tendons of the peroneus longus muscle. The xenografted muscle is spontaneously vascularized and innervated by the mouse host, resulting in robustly regenerated human muscle that can serve as a model for preclinical studies.

Complex human diseases can be challenging to model in traditional laboratory model systems. Here, we describe a surgical approach to model human muscle disease through the transplantation of human skeletal muscle biopsies into immunodeficient mice.

면역 결핍 마우스에서 인간 골격 근 이종이식 수행

Treatment effects observed in animal studies often fail to be recapitulated in clinical trials. While this problem is multifaceted, one reason for this ...

Quantification of Subcellular Glycogen Distribution in Skeletal Muscle Fibers using Transmission Electron Microscopy

With the use of transmission electron microscopy, high-resolution images of fixed samples containing individual muscle fibers can be obtained. This enables quantifications of ultrastructural aspects such as volume fractions, surface area to volume ratios, morphometry, and physical contact sites of different subcellular structures. In the 1970s, a protocol for enhanced staining of glycogen in cells was developed and paved the way for a string of studies on the subcellular localization of glycogen and glycogen particle size using transmission electron microscopy. While most analyses interpret glycogen as if it is homogeneously distributed within the muscle fibers, providing only a single value (e.g., an average concentration), transmission electron microscopy has revealed that glycogen is stored as discrete glycogen particles located in distinct subcellular compartments. Here, the step-by-step protocol from tissue collection to the quantitative determination of the volume fraction and particle diameter of glycogen in the distinct subcellular compartments of individual skeletal muscle fibers is described. Considerations on how to 1) collect and stain tissue specimens, 2) perform image analyses and data handling, 3) evaluate the precision of estimates, 4) discriminate between muscle fiber types, and 5) methodological pitfalls and limitations are included.

A modified post-fixation procedure increases the contrast of glycogen particles in tissue. This paper provides a step-by-step protocol describing how to handle the tissue, conduct the imaging, and use stereological methods to obtain unbiased and quantitative data on fiber type-specific subcellular glycogen distribution in skeletal muscle.

투과 전자 현미경을 이용한 골격근섬유의 세포하 글리코겐 분포의 정량화

With the use of transmission electron microscopy, high-resolution images of fixed samples containing individual muscle fibers can be obtained. This ...

생화학

Preparation and Respirometric Assessment of Mitochondria Isolated from Skeletal Muscle Tissue Obtained by Percutaneous Needle Biopsy

Respirometric profiling of isolated mitochondria is commonly used to investigate electron transport chain function. We describe a method for obtaining samples of human Vastus lateralis, isolating mitochondria from minimal amounts of skeletal muscle tissue, and plate based respirometric profiling using an extracellular flux (XF) analyzer. Comparison of respirometric profiles obtained using 1.0, 2.5 and 5.0 &#956;g of mitochondria indicate that 1.0 &#956;g is sufficient to measure respiration and that 5.0 &#956;g provides most consistent results based on comparison of standard errors. Western blot analysis of isolated mitochondria for mitochondrial marker COX IV and non-mitochondrial tissue marker GAPDH indicate that there is limited non-mitochondrial contamination using this protocol. The ability to study mitochondrial respirometry in as little as 20 mg of muscle tissue allows users to utilize individual biopsies for multiple study endpoints in clinical research projects.

Methods for biopsy of Vastus lateralis, preparation of purified mitochondria, and respirometric profiling are described. The use of small muscle volume makes this technique suitable for clinical research applications.

경피적 바늘 생검에 의해 획득 골격근 조직에서 고립 된 미토콘드리아의 준비 및 호흡계 평가

Respirometric profiling of isolated mitochondria is commonly used to investigate electron transport chain function. We describe a method for obtaining ...

MyDoBID- 근육 섬유 유형을 효율적으로 식별하기 위한 새로운 기술

Fiber Type Identification of Human Skeletal Muscle

The technique described here can be used to identify specific myosin heavy chain (MHC) isoforms in segments of individual muscle fibers using dot blotting, hereafter referred to as Myosin heavy chain detection by Dot Blotting for IDentification of muscle fiber type (MyDoBID). This protocol describes the process of freeze-drying human skeletal muscle and isolating segments of single muscle fibers. Using MyDoBID, type I and II fibers are classified with MHCI- and IIa-specific antibodies, respectively. Classified fibers are then combined into fiber type-specific samples for each biopsy.
The total protein in each sample is determined by Sodium Dodecyl-Sulfate Polyacrylamide Gel Electrophoresis (SDS-PAGE) and UV-activated gel technology. The fiber type of samples is validated using western blotting. The importance of performing protein loading normalization to enhance target protein detection across multiple western blots is also described. The benefits of consolidating classified fibers into fiber type-specific samples compared to single-fiber western blots, include sample versatility, increased sample throughput, shorter time investment, and cost-saving measures, all while retaining valuable fiber type-specific information that is frequently overlooked using homogenized muscle samples. The purpose of the protocol is to achieve accurate and efficient identification of type I and type II fibers isolated from freeze-dried human skeletal muscle samples.
These individual fibers are subsequently combined to create type I and type II fiber type-specific samples. Furthermore, the protocol is extended to include the identification of type IIx fibers, using Actin as a marker for fibers that were negative for MHCI and MHCIIa, which are confirmed as IIx fibers by western blotting. Each fiber type-specific sample is then used to quantify the expression of various target proteins using western blotting techniques.

저자 스포트라이트: MyDoBID 기법을 사용한 골격근 섬유 유형의 미스터리 해독 

This protocol demonstrates single-fiber isolation from freeze-dried human skeletal muscle and fiber-type classification according to Myosin heavy chain (MHC) isoform using the dot blotting technique. Identified MHC I and II fiber samples can then be further analyzed for fiber type-specific differences in protein expression using western blotting.

수정 된 버그 스트롬 기술을 이용하여 인간의 골격 근육 생검 절차

요약

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이 비디오의 챕터

인간의 골격근에서 기본 근육 조직 세포와 섬유 아 세포의 분리 및 정량 면역 세포 화학 특성

절연 골격근의 묘 - 기계 분석

근육 질환의 구조적 기초를 연구하기위한 도구로 그대로 뮤린 골격 근육의 X 선 회절

골격 근 생검 절차에서 인간 근육 선조 세포의 격리, 배양, 특성화 및 분화

면역 결핍 마우스에서 인간 골격 근 이종이식 수행

투과 전자 현미경을 이용한 골격근섬유의 세포하 글리코겐 분포의 정량화

경피적 바늘 생검에 의해 획득 골격근 조직에서 고립 된 미토콘드리아의 준비 및 호흡계 평가

인체 골격근의 섬유 유형 식별

인체 골격근의 섬유 유형 식별

인체 골격근의 섬유 유형 식별