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Aplicación de Ensayo inmunoensayo de largo plazo culta Interferón-γ ligado a enzimas para la evaluación efectoras y de memoria T respuestas celulares en el ganado

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•

15:57 min

•

July 11th, 2015

DOI :

10.3791/52833-v

July 11th, 2015

•

Mayara F. Maggioli¹^,², Mitchell V. Palmer¹, H. Martin Vordermeier³, Adam O. Whelan³, James M. Fosse⁴, Brian J. Nonnecke¹, W. Ray Waters¹

¹Infectious Bacterial Diseases Research Unit, National Animal Disease Center, Agricultural Research Service, United States Department of Agriculture, ²Department of Veterinary Pathology, College of Veterinary Medicine, Iowa State University, ³UK Veterinary Laboratories Agency, ⁴Visual Services, National Centers for Animal Health, Animal and Plant Health Inspection Service, United States Department of Agriculture

Resumen

Cultivaron interferón-γ ensayo inmunospot ligado a enzimas a largo plazo se utiliza como una medida de respuestas de memoria centrales y se correlaciona con respuestas a la vacuna anti-micobacterianas protectoras. Con este ensayo, las células mononucleares de sangre periférica son estimulados con antígenos de micobacterias y la interleucina-2 durante 14 días, permitiendo la diferenciación y expansión de las células T de memoria centrales.

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Capítulos en este video

0:00

Title

1:40

Methods

2:05

Long-term Culture

3:38

Elispot Assay Day 1

4:30

Elispot Assay Day 2

5:15

Adherent Cell Isolation

5:37

Flow Cytometry Plate Preparation

6:15

Harvest the 13 Day Long-term Cells

9:05

Elispot Assay Day 3

10:04

Alkaline Phosphatase Preparation

11:08

Substrate Solution Preparation

11:55

Reading the Plate

12:12

Performing Flow Cytometry

12:25

Results

14:37

Conclusions

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