El Programa de Investigación Científica y Desarrollo Tecnológico (20224128) de la ciudad de Baise apoyó este trabajo. Los autores agradecen al Dr. Dev Sooranna del Imperial College de Londres y a YMUN por editar el manuscrito. YYX y ZYW contribuyeron por igual a este estudio.

Efectos terapéuticos de las píldoras Xiaoyao sobre la osteoporosis posmenopáusica en ratones

Los autores declaran que no existe conflicto de intereses.

Según las estadísticas, la osteoporosis causa 1,5 millones de fracturas cada año en los Estados Unidos, y la gran mayoría de ellas ocurren en mujeres posmenopáusicas27. Con el aumento del envejecimiento de la población, se prevé que la mayoría de las futuras fracturas de cadera del mundo se producirán en Asia y que en 2050 el número total de ellas en todo el mundo alcanzará los 8,2 millones28. El costo de prevenir las fracturas es casi igual al de tratarlas, y el...

La Organización Mundial de la Salud (OMS) define la osteoporosis (OP) como una enfermedad caracterizada por una disminución de la masa ósea y un deterioro de la microarquitectura del tejido óseo, lo que conduce a un aumento de la fragilidad ósea y, por lo tanto, a un mayor riesgo de fractura1. La importancia clínica de la osteoporosis es que puede conducir a fracturas, las cuales se asocian con alta mortalidad, morbilidad y costos económicos2. La osteoporosis posmenopáusica (PMOP) es causada por una disminución de los niveles de estrógeno en las mujeres después de la menopausia, lo que conduce a un aumento de la actividad de los osteoclastos, lo que resulta en pérdida ósea y destrucción de la microestructura ósea. Esto a menudo causa osteoporosis con un grave impacto en la salud3. Las terapias actuales para la PMOP incluyen terapia de reemplazo de estrógenos, bifosfonatos y hormona paratiroidea, pero pueden tener diversos grados de efectos adversos, un cumplimiento insuficiente a largo plazo y altos costos4. Por lo tanto, la medicina herbal asequible es una alternativa viable para una gran proporción de la población.
Las píldoras Xiaoyao están incluidas en la FarmacopeaChina 5 y contienen ocho componentes herbales, que incluyen Chai Hu, Angelica sinensis, Paeonia lactiflora blanca, Atractylodes macrocephala, Poria cocos, Menthae Herba, regaliz y jengibre fresco. Se sabe que todas estas hierbas son efectivas para desintoxicar el hígado y fortalecer el bazo, nutrir la sangre y regular el ciclo menstrual, y la mezcla también se ha utilizado para tratarla depresión. Sin embargo, el papel de las píldoras Xiaoyao en la osteoporosis no está claro.
Los primeros estudios han sugerido que la inflamación puede conducir a la pérdida ósea7, y que la disminución de la densidad ósea asociada con este proceso puede acelerarse con la menopausia. Además, existe una fuerte relación entre el desarrollo de osteoporosis y la inflamación. El factor inflamatorio, interleucina-17 (IL-17), es un factor proinflamatorio secretado por las células Th17, un subconjunto de linfocitos T CD4+. Estas células se asocian con varias afecciones inflamatorias crónicas y desempeñan un papel importante en el desarrollo de la destrucción ósea en la artritis reumatoide8. Además, la IL-17 estimula el activador del receptor del ligando del factor nuclear κ B (RANKL), que regula la osteoclastogénesis, lo que conduce a una mayor resorción ósea que la formación ósea9. La IL-17 estimula la expresión de otras citocinas osteoclastogénicas como TNFα, IL-1, IL-6 e IL-8. Tiene la capacidad de sinergizar con otros factores inflamatorios, lo que lo convierte en un importante efector inflamatorio10.
Los estudios también han demostrado un vínculo entre las píldoras Xiaoyao y la inflamación. Shi et al.11 y Fang et al.12 han confirmado recientemente que las píldoras de Xiaoyao pueden reducir los niveles de IL-6 y TNF-α, respectivamente. En otro estudio sobre la esteatohepatitis asociada al metabolismo, se informó que las píldoras de Xiaoyao podrían regular al alza la expresión de ácido propiónico, que a su vez inhibe la expresión de TNF-α y ejerce un efecto antiinflamatorio13. Sin embargo, en la actualidad, no se sabe si las píldoras de Xiaoyao pueden regular el desarrollo de PMOM mediando una respuesta inflamatoria a través de la IL-17, que fue el objetivo de este estudio.
Este estudio predijo la intersección de los objetivos de las píldoras Xiaoyao y los genes relacionados con la osteoporosis a través de la farmacología de redes y el análisis bioinformático y analizó los genes que se cruzan para las interacciones de proteínas, GO y KEGG. Con base en los resultados previstos, se puede observar la expresión de Act1 e IL-6, que son proteínas clave en la vía de señalización de IL-17,14,15, así como los marcadores de recambio óseo fosfatasa alcalina (ALP) y colágeno tipo I (COL-1), para observar la eficacia terapéutica de las píldoras de Xiaoyao en el modelo de ratones PMOM.

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	<tbody>
		<tr>
			<td>1ml Sampler</td>
			<td>Guangxi Beilunhe Medical Industrial Group Co.</td>
			<td>JYQ001</td>
			<td>For anesthesia in mice</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4%polyformaldehyde</td>
			<td>Beijing Solarbio Science &#38; Technology Co.,Ltd.</td>
			<td>P1110</td>
			<td>For tissue fixation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6-0 absorbable suture (angled needle)</td>
			<td>Shanghai Pudong Jinhuan Medical Supplies Co.</td>
			<td>HZX-06</td>
			<td>For postoperative suturing</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Absorbent cotton ball</td>
			<td>Winner</td>
			<td>MIANQIU-500g</td>
			<td>For sterilization and hemostasis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adhesive slides</td>
			<td>Jiangsu Shitai Experimental Equipment Co.</td>
			<td>188105</td>
			<td>For tissue sectioning</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Amobarbital</td>
			<td>Sigma Aldrich (Shanghai) Trading Co.</td>
			<td>A-020-1ML</td>
			<td>For anesthesia in mice</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bluing Solution</td>
			<td>Beijing Solarbio Science &#38; Technology Co.,Ltd.</td>
			<td>G1866</td>
			<td>Blue coloration of the nuclei of cells after the action of hematoxylin differentiation solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>C57BL/6 mice</td>
			<td>Beijing Vital River Laboratory Animal Technology Co., Ltd.</td>
			<td>(SCXK 2033-0063)</td>
			<td>For use in animal experiments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carbon steel surgical blades</td>
			<td>Premier Medical Equipment Co.</td>
			<td>SP239</td>
			<td>For mouse surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CIKS/TRAF3IP2 Rabbit pAb</td>
			<td>BIOSS ANTIBODIES</td>
			<td>bs-6202R</td>
			<td>Binds to Act1 in tissues</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cole&#39;s Hematoxylin Solution (For Conventional Stain)</td>
			<td>Beijing Solarbio Science &#38; Technology Co.,Ltd.</td>
			<td>G1140</td>
			<td>For staining paraffin sections</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagen Type I Polyclonal antibody</td>
			<td>proteintech</td>
			<td>14695-1-AP</td>
			<td>Binds to COL-1 in tissues</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAB Substrate kit,20x</td>
			<td>Beijing Solarbio Science &#38; Technology Co.,Ltd.</td>
			<td>DA1010</td>
			<td>For tissue color development</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disposable surgical sheet 50*60CM</td>
			<td>Nanchang Xuhui Medical Equipment Co.</td>
			<td>SP4529777</td>
			<td>For mouse surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EDTA decalcification solution (pH 7.2)</td>
			<td>Beijing Solarbio Science &#38; Technology Co.,Ltd.</td>
			<td>E1171-500ml</td>
			<td>For tissue decalcification</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Enhanced Endogenous Peroxidase Bloching Buffer</td>
			<td>Beyotime Biotechnology</td>
			<td>P0100B</td>
			<td>Sequestration of tissue or cellular endogenous peroxidases</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Environmentally friendly dewaxing clear liquid</td>
			<td>Servicebio</td>
			<td>G1128-1L</td>
			<td>For dewaxing paraffin sections</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethyl Alcohol</td>
			<td>CHRON CHEMICALS</td>
			<td>64-17-5 (CAS)</td>
			<td>For dehydration of paraffin sections</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>General Purpose Antibody Diluent</td>
			<td>Epizyme Biotech</td>
			<td>PS119L</td>
			<td>For antibody dilution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hematoxylin Differentiation Solution</td>
			<td>Servicebio</td>
			<td>G1039-500ML</td>
			<td>For differentiation after hematoxylin staining and removal of excessively bound and non-specifically adsorbed dye from tissues</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hematoxylin Eosin (HE) Staining Kit</td>
			<td>Beijing Solarbio Science &#38; Technology Co.,Ltd.</td>
			<td>G1120-3*100ml</td>
			<td>For tissue staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High quality stainless steel surgical knife handle</td>
			<td>Premier Medical Equipment Co.</td>
			<td>SP0088</td>
			<td>For mouse surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HRP-conjugated Affinipure Goat Anti-Rabbit IgG(H+L)</td>
			<td>proteintech</td>
			<td>SA00001-2</td>
			<td>Binds to primary antibody and amplifies signal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IL-17A Polyclonal antibody</td>
			<td>proteintech</td>
			<td>13082-1-AP</td>
			<td>Binds to IL-17 in tissues</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IL-6 Polyclonal antibody</td>
			<td>proteintech</td>
			<td>21865-1-AP</td>
			<td>Binds to IL-6 in tissues</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Immunohistochemistry pen</td>
			<td>Beijing Zhongshan Jinqiao Biotechnology Co.</td>
			<td>ZLI-9305 (YA0310)</td>
			<td>For drawing circles in immunohistochemistry</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medical surgical suture Non-absorbent (ball) 5-0 3.5m</td>
			<td>Yangzhou Yuanlikang Medical Equipment Co.</td>
			<td>FHX-5-2</td>
			<td>For postoperative suturing</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medical Suture Needles Angle Needles 4*10 3/8</td>
			<td>Chaohu Binxiong Medical Equipment Co.</td>
			<td>FHZ612-4</td>
			<td>For postoperative suturing</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neutral Balsam</td>
			<td>Beijing Solarbio Science &#38; Technology Co.,Ltd.</td>
			<td>G8590</td>
			<td>As a slice sealer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS(1X)</td>
			<td>Shenzhen Mohong Technology Co.,Ltd</td>
			<td>B0015</td>
			<td>Buffer for slide washing and partial solution dilution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Protein Free Rapid Blocking Buffer (1X)</td>
			<td>Epizyme Biotech</td>
			<td>PS108P</td>
			<td>Avoiding non-specific binding of proteins</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rabbit Anti-Bone Alkaline Phosphatase antibody</td>
			<td>BIOSS ANTIBODIES</td>
			<td>bs-6292R</td>
			<td>Binds to alkaline phosphatase in tissues</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Saline</td>
			<td>Affiliated Hospital Youjiang Medical University For Nationalities</td>
			<td>LHN500</td>
			<td>For animals by gavage</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Shaving/Electric clippers</td>
			<td>HANGZHOU HUAYUAN PET PRODUCTS CO., LTD.</td>
			<td>DTJ-002</td>
			<td>For shaving mice</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stainless Steel Medical Needle Holder 14cm Coarse Needle</td>
			<td>Premier Medical Equipment Co.</td>
			<td>SP784</td>
			<td>For mouse surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stainless Steel Ophthalmic Forceps 10.5cm Curved (No Hook)</td>
			<td>Zhuoyouyue</td>
			<td>YKNWW-10.5</td>
			<td>For mouse surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stainless Steel Ophthalmic Scissors/Surgical Scissors 10CM Straight Tip</td>
			<td>Premier Medical Equipment Co.</td>
			<td>ZYJD-10-ZJ</td>
			<td>For mouse surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stainless Steel Tip Gastric Needle 12 Gauge 55mm Elbow</td>
			<td></td>
			<td>GWJ-12-55W</td>
			<td>For use in mice by gavage</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tris-EDTA Antigen Repair Fluid (50x)</td>
			<td>proteintech</td>
			<td>PR30002</td>
			<td>For antigen repair of paraffin sections</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wooden dissecting board 25*16cm</td>
			<td></td>
			<td>JP16*24</td>
			<td>For mouse surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xiaoyao pills</td>
			<td>Jiuzhitang Co.,Ltd.</td>
			<td>YPG-041</td>
			<td>For animal drug delivery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Others</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>R 4.3.1</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Data processing</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cytoscape3.9.1</td>
			<td>National Resource for Network Biology</td>
			<td></td>
			<td>Building a regulatory network for traditional Chinese medicine</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ImageJ 1.54f</td>
			<td>National Institutes of Health</td>
			<td></td>
			<td>Image processing for immunohistochemistry results</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adobe Photoshop 24.0.0</td>
			<td>Adobe</td>
			<td></td>
			<td>For image combination</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GraphpadPrism 9.5</td>
			<td>GraphPad Software</td>
			<td></td>
			<td>Statistical analysis of data</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>cellsens Dimension</td>
			<td>OLYMPUS</td>
			<td></td>
			<td>For slicing and photographing</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>OLYMPUS BX53</td>
			<td>OLYMPUS</td>
			<td></td>
			<td>For HE staining and immunohistochemical section photography</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

studies on the anti-inflammatory effect of xiaoyao pills in the treatment of postmenopausal osteoporosis in mice

La osteoporosis es una enfermedad metabólica común de las mujeres ancianas y posmenopáusicas, sin síntomas evidentes durante sus primeras etapas. En las últimas etapas de esta afección, los pacientes son propensos a sufrir fracturas, lo que puede afectar seriamente su salud y calidad de vida. El aumento de la esperanza de vida en todo el mundo ha convertido a la osteoporosis en una preocupación mundial. Las píldoras Xiaoyao fueron anteriormente Se utiliza en el tratamiento de la depresión. Además, el fármaco parecía tener una actividad similar a la del estrógeno, lo que afectó a la expresión de ALP, un marcador temprano específico del osteoblasto, y COL-1, un componente importante de la matriz extracelular ósea. Las píldoras de Xiaoyao se evaluaron por sus efectos sobre la osteoporosis posmenopáusica (PMOM) en ratones. Se accedió a la información objetivo de cada componente herbal de las píldoras Xiaoyao a través de la base de datos de Farmacología de los Sistemas de Medicina Tradicional China (TCMSP). La información de GeneCards, OMIM, PharmGkb, TTD, DrugBank y otros sitios web se utilizó para construir la red reguladora del complejo herbal a través de Cytoscape y la red String para evaluar las interacciones de las proteínas. Los ratones fueron ovariectomizados y tratados con dosis altas y bajas de píldoras Xiaoyao y estos se compararon con los controles. Sus síntomas se evaluaron mediante inmunocitoquímica de los tejidos óseos. Los resultados sugirieron que las píldoras de Xiaoyao tenían la capacidad de aliviar los síntomas de PMOM en ratones ovariectomizados a través de la vía de señalización IL-17. Este fármaco tiene el potencial de convertirse en un nuevo agente terapéutico para el tratamiento de la osteoporosis.

The World Health Organization (WHO) defines osteoporosis (OP) as a disease characterized by a decrease in bone mass and deterioration of the microarchitecture of bone tissue, leading to an increase in bone brittleness and, thus an increased risk of fracture1. The clinical significance of osteoporosis is that it can lead to fractures, which are associated with high mortality, morbidity, and economic costs2. Postmenopausal osteoporosis (PMOP) is caused by a decrease in estrogen levels in women after menopause, which leads to an increase in osteoclast activity, resulting in bone loss and destruction of bone microstructure. This often causes osteoporosis with a serious impact on health3. Current therapies for PMOP include estrogen replacement therapy, bisphosphonates, and parathyroid hormone, but they can have varying degrees of adverse effects, insufficient long-term compliance, and high costs4. Therefore, affordable herbal medicine is a viable alternative for a large proportion of the population.
Xiaoyao pills are included in the Chinese Pharmacopoeia5, and these contain eight herbal components, including Chai Hu, Angelica sinensis, White paeonia lactiflora, Atractylodes macrocephala, Poria cocos, Menthae Herba, licorice, and fresh ginger. All these herbs are known to be effective in detoxifying the liver and strengthening the spleen, nourishing the blood, and regulating the menstrual cycle, and the mixture has also been used for treating depression6. However, the role of Xiaoyao pills in osteoporosis is unclear.
Early studies have suggested that inflammation can lead to bone loss7, and that the decline in bone density associated with this process may be accelerated by menopause. In addition, there is a strong relationship between the development of osteoporosis and inflammation. The inflammatory factor, interleukin-17 (IL-17), is a pro-inflammatory factor secreted by Th17 cells, a subset of CD4+ T lymphocytes. These cells are associated with several chronic inflammatory conditions, and they play an important role in the development of bone destruction in rheumatoid arthritis8. Additionally, IL-17 stimulates nuclear factor-&#954; B ligand receptor activator (RANKL), which regulates osteoclastogenesis, leading to greater bone resorption than bone formation9. IL-17 stimulates the expression of other osteoclastogenic cytokines such as TNF&#945;, IL-1, IL-6, and IL-8. It has the ability to synergize with other inflammatory factors, making it an important inflammatory effector10.
Studies have also shown a&#160;link between Xiaoyao pills and inflammation. Shi et al.11 and Fang et al.12 have recently confirmed that Xiaoyao pills can reduce the levels of IL-6 and TNF-&#945;, respectively. In another study of metabolism-associated steatohepatitis, it was reported that Xiaoyao pills could upregulate the expression of propionic acid, which in turn inhibits the expression of TNF-&#945; and exerts an anti-inflammatory effect13. However, at present, it is not known whether Xiaoyao pills can regulate the development of PMOM by mediating an inflammatory response through IL-17, which was the aim of this study.
This study predicted the intersection of the targets of Xiaoyao pills and osteoporosis-related genes through network pharmacology and bioinformatics analysis and analyzed the intersecting genes for protein interactions, GO, and KEGG. Based on the predicted results, the expression of Act1 and IL-6, which are key proteins in the IL-17 signaling pathway, can be observed14,15, as well as the bone turnover markers alkaline phosphatase (ALP) and collagen type I (COL-1), to observe the therapeutic efficacy of the Xiaoyao pills in the PMOM mice model.

Autor destacado: Integración de la medicina tradicional china con la farmacología y la genómica modernas para evaluar la osteoporosis posmenopáusica en ratones 

Estudios sobre el efecto antiinflamatorio de las píldoras Xiaoyao en el tratamiento de la osteoporosis posmenopáusica en ratones

Ingredientes activos y objetivos de acción de las píldoras Xiaoyao Al buscar en la base de datos de TCMSP y realizar el cribado según los criterios de biodisponibilidad oral (OB) ≥ 30% y propiedades similares a los medicamentos (DL) ≥ 0,18, se encontró que existían 125 ingredientes activos en las píldoras de Xiaoyao. Entre ellos, los ingredientes 6, 4, 9, 13, 2, 6, 83 y 2 eran de Paeonia lactiflora blanca, Atractylodes macrocephala, Menthae herba, Chaihu, Angel...

La osteoporosis posmenopáusica se ha convertido en un problema de salud pública mundial. El objetivo de este estudio es explorar los efectos terapéuticos y los mecanismos relacionados de las píldoras de medicina tradicional china Xiaoyao sobre esta afección.

Osteoporosis is a common metabolic disease of elderly and postmenopausal women, with no obvious symptoms during its early stages. In the latter stages of ...

studies-on-anti-inflammatory-effect-xiaoyao-pills-treatment

Research

JoVE Journal

Biology

Studies on the Anti-Inflammatory Effect of Xiaoyao Pills in The Treatment of Postmenopausal Osteoporosis in Mice

289 vistas.  Youjiang Medical University for Nationalities. El alcance de este estudio fue el efecto terapéutico de la medicina china, píldoras Xiaoyao en ratones con osteoporosis posmenopáusica. En este estudio, queríamos confirmar si las píldoras Xiaoyao podrían ejercer un efecto terapéutico y el mecanismo específico. En este estudio, combinamos la medicina tradicional china con la farmacología y la genómica modernas, y la bioinformática de la artritis para afirmar nuestro análisis de lo que vimos mostra...

Video: Autor destacado: Integración de la medicina tradicional china con la farmacología y la genómica modernas para evaluar la osteoporosis posmenopáusica en ratones 

Osteoporosis is a common metabolic disease of elderly and postmenopausal women, with no obvious symptoms during its early stages. In the latter stages of this condition, the patients are prone to fractures, and this can seriously affect their health and quality of life. The worldwide increase in life expectancy has made osteoporosis a global concern. The Xiaoyao pills were previously 
used in the treatment of depression. In addition, the drug appeared to have estrogen-like activity, which affected the expression of ALP, an early osteoblast-specific marker, and COL-1, a major component of bone extracellular matrix. Xiaoyao pills were assessed for their effects on postmenopausal osteoporosis (PMOM) in mice. The target information of each herbal component of Xiaoyao pills was accessed through the Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology (TCMSP) database. Information from GeneCards, OMIM, PharmGkb, TTD, DrugBank, and other websites was used to construct the regulatory network of the herbal complex through Cytoscape and String network to assess the protein interactions. Mice were ovariectomized, and treated with high and low doses of Xiaoyao pills and these were compared to controls. Their symptoms were assessed by immunocytochemistry of bone tissues. The results suggested that Xiaoyao pills had the ability to alleviate the symptoms of PMOM in ovariectomized mice through the IL-17 signaling pathway. This drug has the potential to become a novel therapeutic agent for the treatment of osteoporosis.

Postmenopausal osteoporosis has become a global public health problem. The aim of this study is to explore the therapeutic effects and related mechanisms of the traditional Chinese medicine Xiaoyao pills on this condition.