Évaluation de la différence de couleur dans le placenta avec séquence de polyglobulie d’anémie gémellaire

Résumé

Chez les jumeaux monochorioniques avec séquence de polyglobulie d’anémie gémellaire (TAPS), le jumeau donneur et sa part placentaire correspondante sont pâles, tandis que le jumeau receveur et sa part placentaire ont un aspect pléthorique. Voici un protocole permettant de quantifier la différence de couleur du côté maternel du placenta TAPS après la naissance.

Résumé

La séquence de polyglobulie de l’anémie gémellaire (TAPS) survient chez 5 % des jumeaux monochorioniques et se caractérise par de grandes différences d’hémoglobine entre les jumeaux. Les critères de diagnostic postnatal du TAPS sont basés sur les paramètres hématologiques et les caractéristiques placentaires. L’examen placentaire après la naissance montre que la couleur de la face maternelle entre les territoires placentaires des jumeaux anémiques et polycytaires est remarquablement différente. La différence de couleur dans les placentas TAPS est plus élevée que dans les placentas monochorioniques avec transfusion fœto-fœtale péripartum aiguë ; il est donc utilisé comme critère de diagnostic supplémentaire pour le TAPS. Des logiciels tels qu’ImageJ permettent de mesurer l’intensité de la couleur dans les placentas TAPS à l’aide d’un ordinateur. Cependant, une méthode détaillée pour le calcul des différences de couleur entre les composants anémiques et polycythémiques des placentas TAPS n’a pas encore été décrite. Le protocole présenté ici fournit une méthode étape par étape pour analyser les différences de couleur du côté maternel des placentas TAPS à l’aide du logiciel ImageJ.

Introduction

Le TAPS est une forme chronique de syndrome de transfusion fœto-fœtale caractérisée par une grande différence d’hémoglobine (Hb) entre les jumeaux sans signes de séquences d’oligo-polyhydramnios¹. La principale pathogenèse du TAPS est liée à l’angioarchitecture placentaire unique, avec seulement quelques anastomoses minuscules permettant une transfusion chronique et à faible vitesse du donneur (jumeau anémique) au receveur (jumeau polycytaire^)2,3,4. Le diagnostic postnatal du TAPS est basé sur des tests hématologiques montrant une grande différence d’Hb et une grande différence de numération des réticulocytes et/ou une injection placentaire avec un colorant ne montrant que de minuscules anastomoses⁵. Cependant, le nombre de réticulocytes n’est pas toujours mesuré à la naissance et l’injection placentaire n’est pas systématiquement pratiquée dans la plupart des centres de médecine fœtale. Un critère diagnostique supplémentaire peut être utile pour aider à diagnostiquer les cas sans mesure de la numération des réticulocytes et sans injection de colorant placentaire. Une différence de couleur frappante entre la peau pâle d’un jumeau donneur et la peau pléthorique du jumeau receveur est constamment présente chez les jumeaux TAPS à la naissance. Une différence de couleur similaire du côté maternel entre les territoires placentaires des jumeaux anémiques et polycytaires est également détectée lors d’un examen macroscopique.

Il a récemment été émis l’hypothèse que cette différence de couleur placentaire peut être utilisée comme une méthode simple et précise pour confirmer un diagnostic TAPS après la naissance⁶. La quantification de la différence de couleur dans les placentas TAPS permet de gagner du temps par rapport à l’injection placentaire. De plus, la quantification de la différence de couleur dans les placentas TAPS est plus rentable que le nombre de réticulocytes. Les matériaux utilisés dans cette méthode sont facilement disponibles en milieu clinique Par conséquent, cette méthode fournit des critères simples et précis pour le diagnostic du TAPS. Le protocole décrit une méthode détaillée pour la quantification des différences de couleur du côté maternel des placentas monochorioniques avec TAPS.

Protocole

Ce protocole a été approuvé par le comité d’éthique du centre médical de l’Université de Leiden, et l’examen postnatal des placentas jumeaux monochorioniques humains fait partie des soins standard au centre médical de l’Université de Leiden. L’obtention du consentement pour l’examen postnatal des placentas jumeaux monochorioniques humains est levée au Centre médical de l’Université de Leiden.

1. Prélèvement et examen macroscopique TAPS

1. Utilisez tous les placentas jumeaux monochorioniques humains avec TAPS administrés à n’importe quel âge gestationnel. Gardez le placenta jumeau monochorionique humain aussi intact que possible. Libérez le placenta monochorionique aussi doucement que possible, si un retrait manuel est nécessaire.
   REMARQUE : Après la naissance, les sages-femmes ou les néonatologistes doivent transférer les placentas TAPS dans une boîte en plastique, puis au laboratoire.
2. Lorsque le premier nourrisson est mis au monde, utilisez une pince pour clamper le cordon ombilical afin de marquer l’ordre de naissance comme premier. Lorsque l’autre nourrisson est mis au monde, utilisez deux pinces pour clamper le cordon ombilical afin de marquer l’ordre de naissance comme deuxième.
3. Examiner le placenta par voie macroscopique, y compris l’intégrité du placenta, les types d’insertions du cordon ombilical, le nombre de vaisseaux ombilicaux et l’examen macroscopique de la membrane de division pour confirmer la chorionicité. Prélever la membrane inter-jumelle pour le diagnostic pathologique de la monochorionicité. Le diamètre des placentas TAPS dépend de l’âge gestationnel.
   REMARQUE : L’examen doit être effectué dans la semaine suivant l’accouchement pour éviter la formation de caillots sanguins adhésifs du côté maternel.
4. Conservez le placenta au réfrigérateur (1 à 4 °C) dans une boîte en plastique sèche jusqu’à l’examen, si nécessaire.

2. Préparation du côté maternel placentaire

1. Coupez la membrane amniotique le long du bord placentaire à l’aide de ciseaux. Faites attention aux vaisseaux sur la membrane et si l’insertion du cordon vélamentaire est présente pour empêcher le sang de s’écouler de la masse placentaire.
   REMARQUE : Dans l’insertion du cordon vélamentaire, les vaisseaux du cordon ombilical se déplacent vers la surface de la membrane amniotique sur une certaine distance avant de se fixer à la masse placentaire. Si les vaisseaux « nus » sont coupés, le sang de la masse placentaire peut s’écouler et faire des dégâts.
2. Retirez soigneusement les caillots sanguins pour éviter d’endommager les lobes placentaires.
3. Organisez les lobes placentaires du côté maternel pour éliminer l’espace entre les lobes. Les placentas ont généralement environ 15 lobes et peuvent être identifiés du côté maternel.

3. Préparation de la documentation

1. Placez le placenta sur un panneau en plastique avec le côté maternel vers le haut.
2. Exposer la face maternelle du placenta à la lumière (répartition uniforme à l’aide de deux lampes identiques sur les côtés gauche et droit). Utilisez des lampes qui ont une fonction de réglage de l’intensité lumineuse.
3. Pour réduire les reflets, prenez des photos numériques avec un appareil photo (Table des matériaux) dans des conditions de lumière modérée et évitez l’exposition directe à la source lumineuse.
4. Prenez des photos perpendiculaires au côté maternel du placenta.

4. Mesure informatisée à l’aide d’ImageJ

1. Ouvrez ImageJ sur l’ordinateur en cliquant sur l’icône du logiciel.
2. Cliquez sur « Fichier », puis « Ouvrir » pour ouvrir l’image placentaire. Une fois l’image souhaitée ouverte, cliquez sur « Image » | « Couleur », puis « Outil Chaînes » pour choisir la « Couleur » dans la liste déroulante.
   REMARQUE : Le logiciel peut identifier automatiquement la couleur de l’objet mesuré. Le placenta est rouge. Dans le logiciel, après avoir cliqué sur « Couleur », l’image placentaire sera automatiquement convertie en un canal de spectre rouge.
3. Cliquez sur « Sélections à main levée » pour dessiner respectivement le contour de la part placentaire pléthorique et pâle des jumeaux polycytaires et anémiques via l’inspection visuelle de différentes intensités de couleur de la face maternelle du placenta.
4. Cliquez sur « Analyser » | « Histogramme ». Obtenez l’histogramme de l’intensité des couleurs après avoir sélectionné la zone pléthorique ou la zone pâle, respectivement. Le mode affiché dans l’histogramme d’intensité représente la couleur la plus présente dans la zone placentaire sélectionnée.
5. Calculez le rapport de différence de couleur en divisant le mode d’intensité de couleur du jumeau anémique par le mode d’intensité de couleur du jumeau polycythémique.

Résultats

L’examen placentaire fournit des informations précieuses pour le diagnostic du TAPS. Les placentas TAPS sont caractérisés par la présence de quelques petites anastomoses vasculaires¹ (Figure 1, Figure 2). Cette caractéristique du placenta TAPS est liée à la pathogenèse du TAPS et constitue un critère de diagnostic postnatal. Semblable à la couleur des nouveau-nés à la naissance, la part plac...

Discussion

Les points clés pour obtenir un examen optimal basé sur notre expérience comprennent : 1) l’administration du placenta aussi doucement que possible pour éviter les dommages, surtout lorsque l’ablation manuelle est indiquée ; 2) examen des placentas MC peu après la naissance pour éviter la formation de caillots adhésifs (de préférence en quelques jours) ; 3) l’élimination en douceur de tous les caillots sanguins, évitant d’endommager les lobes placentaires ; 4) l’ex...

matériels

Name	Company	Catalog Number	Comments
20 ml syringes	BD Plastipak	300613
Color dye	Royal Talens Schoolverf	36716010 (blue); 36715010 (green); 36712350 (yellow); 36713570 (pink)
Digital camera	Canon Inc.	ixus 125 hs
ImageJ	National Institute of Health	For Windows ImageJ bundled with 64-bit Java 1.8.0_112
Umbilical catheters	Vygon	1270.08 (8 F) 1270.08 (5 F) 1270.04 (4 F) 1270.03 (3.5 F) 1270.02 (2.5 F)