Développement d’une sonde de microscopie à force atomique basée sur un dard bio-hybride Mosquito Stinger

Résumé

Des études quantitatives et contrôlées sur les comportements des insectes piqueurs sont cruciales pour concevoir des stratégies efficaces de lutte contre les maladies à transmission vectorielle. Dans ce contexte, une méthode de fabrication d’une sonde de microscopie à force atomique (AFM) bio-hybride est introduite.

Résumé

Les moustiques, connus pour être les animaux les plus meurtriers pour l’homme en raison de leur capacité à transmettre des maladies, posent un défi persistant à la santé publique. La stratégie de prévention primaire actuellement utilisée implique des répulsifs chimiques, qui s’avèrent souvent inefficaces car les moustiques développent rapidement une résistance. Par conséquent, l’invention de nouvelles méthodes préventives est cruciale. Un tel développement repose sur une compréhension approfondie des comportements de piqûre de moustique, ce qui nécessite une configuration expérimentale qui reproduit avec précision des scénarios de piqûre réels avec des paramètres de test contrôlables et des mesures quantitatives. Pour combler cette lacune, une sonde de microscopie à force atomique (AFM) bio-hybride a été conçue, avec un dard biologique - plus précisément, un labrum de moustique - comme pointe. Cette sonde bio-hybride, compatible avec les systèmes AFM standard, permet une simulation quasi authentique des comportements de pénétration des moustiques. Cette méthode marque une avancée dans l’étude quantitative des mécanismes de piqûre, conduisant potentiellement à la création de barrières efficaces contre les maladies à transmission vectorielle (MTV) et ouvrant de nouvelles voies dans la lutte contre les maladies transmises par les moustiques.

Introduction

L’Organisation mondiale de la santé (OMS) a indiqué que les maladies à transmission vectorielle (MTV) représentent plus de 17 % de toutes les maladies infectieuses, qui causent plus de 7 000 000 décès par an dans le monde. Par exemple, en tant qu’animal le plus mortel au monde, les moustiques propagent de nombreux agents pathogènes, tels que la dengue, le paludisme et le Zika, par l’intermédiaire d’arthropodes hématophages, entraînant 700 millions d’infections chaque année¹. Les explorations vers le développement de mesures efficaces pour prévenir les VBD sont d’une importance cruciale, y compris l’imitation des comportements de pénétration des....

Protocole

L’espèce de moustique utilisée pour ce protocole est une femelle adulte non infectée Aedes aegypti (A. aegypti), congelée et conservée dans un congélateur à -20 °C. L’espèce a été fournie par le NIH/NIAID Filariasis Research Reagent Resource Center pour distribution par BEI Resources, NIAID, NIH : Uninfected Aedes aegypti, Strain Black Eye Liverpool (Frozen), NR-48920. Les réactifs et l’équipement utilisés pour l’étude sont énumérés dans la table des matériaux.

1. Dissection du labium du proboscis

1. À l’aide d’une pince à épiler, placez un moustique mort sur une lame de ve....

Discussion

L’étape 1 du protocole vise à nettoyer l’échantillon biologique du labium indésirable. Pour ce faire, une incision est pratiquée sur le labium, mais pas sur le fascicule, qui repose directement sous le labium (Figure 1). Parce que le faisceau et le labium ne sont pas joints à leur interface (c’est-à-dire que le labium est libre de glisser le long du fascicule et n’est maintenu en place que par sa fixation à la tête du moustique), l’incision réalisée est destinée à sép.......

matériels

Name	Company	Catalog Number	Comments
5-SA-SE Straight Tapered Ultra Fine-Pointed Tweezers	Excelta	N/A	For manipulating/dissecting the proboscis.
C-4D Probe station	Everbeing Int’l Corp	N/A	Used for AFM assembly.
Tipless Tapping Mode Cantilever	NanoAndMore USA	TL-NCH	AFM cantilever used for mounting the labrum. Specs are shown here: Shape: Beam Force Constant: 42 N/m (10 - 130 N/m) Resonance Frequency: 330 kHz (204 - 497 kHz) Length: 125 µm (115 - 135 µm) Width: 30 µm (22.5 - 37.5 µm) Thickness: 4 µm ( 3 - 5 µm)
UV Expoxy	Let's resin	ALR00146	For stinger attachment.