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Synthèse en phase solide

Vue d'ensemble

Source : Vy M. Dong et Le Diane, Department of Chemistry, University of California, Irvine, CA

Synthèse en phase solide de Merrifield est un prix Nobel invention où une molécule du réactif est liée sur un support solide et subit des réactions chimiques successives pour former un composé désiré. Lorsque les molécules sont liées à un support solide, sous-produits et réactifs excédentaires peuvent être retirés en emportant les impuretés, tandis que le composé cible demeure lié à la résine. Plus précisément, nous permettra de présenter un exemple de synthèse de peptide de phase solide (RCR) pour illustrer ce concept.

Procédure

1. chargement de la résine

Pour un navire de synthèse de peptide 100mL, ajouter résine de chlorure (CCT) 2-chlorotrityl (1,1 mmol/g, g 0,360, 0.400 mmol). Ajouter 20 mL de DMF et laissez-les gonfler pendant 30 min sous le N_2.
Égoutter les perles sous vide et ajouter 10 mL de DMF.
Ajouter 500 mg Fmoc-Ala-OH (1,60 mmol) et 2,5 mL i -Pr₂EtN et mélanger sous N₂ pendant 15 min.
Égoutter le solvant sous vide et répéter le chargement avec Fmoc-A

Résultats

Résultats représentatifs pour synthesisfor de peptide de phase solide procédure 3.

Étape de la procédure	Couleur d’une solution
3.1	Control - clair, jaune clair Réaction de clair, jaune clair
3.2	Control - clair, jaune clair Réaction-bleu foncé
3.3	Sombre solution bleue, perles bleus... Log in or to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here Applications et Résumé Dans cette expérience, nous avons montré un exemple de synthèse en phase solide par l’intermédiaire de RCR grâce à la synthèse d’un dipeptide. Synthèse en phase solide est largement utilisée en chimie combinatoire pour construire des bibliothèques de composés pour le dépistage rapide. Il a été couramment utilisé pour synthétiser des peptides, oligosaccharides et acides nucléiques. En outre, ce concept a été implémenté dans la synthèse chimique. Parce qu’il est hét?... Log in or to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here Tags Valeur vide question 1. chargement de la résine Pour un navire de synthèse de peptide 100mL, ajouter résine de chlorure (CCT) 2-chlorotrityl (1,1 mmol/g, g 0,360, 0.400 mmol). Ajouter 20 mL de DMF et laissez-les gonfler pendant 30 min sous le N_2. Égoutter les perles sous vide et ajouter 10 mL de DMF. Ajouter 500 mg Fmoc-Ala-OH (1,60 mmol) et 2,5 mL i -Pr₂EtN et mélanger sous N₂ pendant 15 min. Égoutter le solvant sous vide et répéter le chargement avec Fmoc-Ala-OH pendant 15 min. Égoutter le solvant sous vide et laver les perles 10 ml DMFunder N₂et égoutter sous vide 3 x. 2. la déprotection du groupe Fmoc Ajouter 10 mL 20 % 4-méthylpipéridine dans le DMF et remuer les perles sous N₂ pendant 15 min. Égoutter le solvant sous vide et répétez la déprotection. Laver les billes avec 10 mL de DMF sous N₂ et drain sous vide 3 x. 3. exécution de l’essai de Kaiser Effectuer le test de Kaiser en ajoutant 1 à 2 gouttes de solution A (0,5 mL 0,01 M KCN, pyridine 24,5 mL), solution B (1 g ninhydrine, 20 mL de n-butanol) et la solution C (phénol 20 g, 10 mL de n-butanol) chacun dans deux tubes à essai. Un tube à essai sera le contrôle tandis que l’autre va surveiller la réaction. Ajouter quelques perles de la résine de la cuve de réaction à éprouvette de réaction et de la chaleur vers le haut les deux tubes à essai à 110 ° C. Si la déprotection est terminée, le contenu du tube à essai prennent une couleur bleu/violet foncée. Si la déprotection est incomplète ou défaillante, la solution reste jaune. Comparer l’éprouvette de réaction avec l’éprouvette de contrôle. 4. les blocs de construction prochaine de couplage Égoutter le solvant sous vide. Laver les billes avec 10 mL de N-méthyl-2-pyrrolidone N₂ et vidange le solvant sous vide. Pour commencer le prochain accouplement, ajoutez 10 mL NMP, 620 mgFmoc-Phe-OH (1,6 mmol), 610 mg HBTU (1,6 mmol) et 2,5 mLi -Pr₂EtN et laissez la résine à bouillonner sous N₂ pour 30 min. Égoutter le solvant sous vide. Laver les billes avec 10 mL de DMF sous N₂ et drain sous vide 3 x. Effectuer le Kaiser pour chercher l’achèvement de l’assemblage d’essai (voir étapes 3.1 à 3.3). Les perles et la solution dans l’éprouvette doivent être jaunes. 5. clivage du Peptide au large de la résine Fendre le reste du groupe Fmoc procédant 2.1 à 2.3. Après que le solvant est drainé sous vide, ajouter 40 mL de solution de clivage (95 % TFA, 2,5 % H₂O, conseils de 2,5 %) à la résine et la bulle sous N₂ pendant 3 h. Placer un nouveau ballon récepteur sur le synthétiseur de peptide et vidange theTFA solution contenant le peptide désiré sous vide dans le ballon à nouveau. 6. précipitation et j’ai la consolation du Peptide Séparer la solution TFA en 4 fioles coniques et ajouter 25 mL éther diéthylique froid (−20 ° C) à chaque flacon à précipiter le peptide. Centrifuger les flacons (3 000 tr/min, 0-4 ° C) pendant 20 min. décanter le reste de la solution TFA et éther des fioles coniques et de concentrer le précipité de peptide pour s’offrir le dipeptide désiré comme un solide blanc. Passer à... 0:04 Overview 1:24 Principles of Solid Phase Synthesis 3:54 Amino Acid Loading and Deprotection 6:13 Peptide Coupling and Isolation 8:02 Applications 9:15 Summary Vidéos de cette collection: Now Playing Synthèse en phase solide Organic Chemistry II 40.8K Vues Nettoyage de la verrerie Organic Chemistry II 123.1K Vues Substitution nucléophile Organic Chemistry II 99.2K Vues Agents reducteurs Organic Chemistry II 42.7K Vues Réaction de Grignard Organic Chemistry II 148.7K Vues Titrage du n-butyllithium Organic Chemistry II 47.6K Vues Appareil de Dean-Stark Organic Chemistry II 99.7K Vues Ozonolyse des alcènes Organic Chemistry II 66.8K Vues Organocatalyse Organic Chemistry II 16.6K Vues Réaction de couplage catalysé au palladium Organic Chemistry II 34.2K Vues Hydrogénation Organic Chemistry II 49.1K Vues Polymérisation Organic Chemistry II 93.7K Vues Point de fusion Organic Chemistry II 149.6K Vues Spectroscopie infrarouge Organic Chemistry II 213.8K Vues Polarimètre Organic Chemistry II 99.8K Vues Confidentialité Conditions d'utilisation Politiques Contactez-nous RECOMMANDER À LA BIBLIOTHÈQUE NEWSLETTERS JoVE Recherche JoVE Journal Collections de méthodes JoVE Encyclopedia of Experiments Archives Enseignement JoVE Core JoVE Science Education JoVE Lab Manual JoVE Business JoVE Quiz JoVE Playlist Faculty Site Auteurs Vue d'ensemble Processus de publication Comité éditorial Domaines et politique de publication Révision par les pairs FAQ Soumettre Bibliothécaires Vue d'ensemble Témoignages Abonnements Accès Ressources Conseil consultatif des bibliothèques FAQ À PROPOS DE JoVE Vue d'ensemble Direction Blog JoVE Help Center JoVE Sitemap Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. 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