Commencez par créer une image composite à l’aide des quatre images obtenues à partir de chaque souris. Utilisez un éditeur graphique pour aligner tous les vaisseaux sanguins, utilisez la tête du nerf optique et les modèles de vaisseaux sanguins comme points de repère pour aligner le gramme de fibre composite chevaucher les images composites et les images confococaux de la même rétine colorée avec ICAM2, pour obtenir un alignement in vivo et ex vivo. Le gramme de fibre vis-oct composite est comparé à l’image confocale correspondante de la rétine montée à plat.
Immuno coloration avec TUJ1 pour les axones RGC. Les vaisseaux sanguins présentent des structures ramifiées distinctes qui peuvent être appariées aux vaisseaux sanguins marqués ICAM2 sur l’image confocale. La comparaison côte à côte entre la microscopie confocale ex vivo et la vis-oct in vivo a révélé des réseaux de faisceaux axonaux RGC identiques et une vascularisation rétinienne environnante.