Transfert adoptif de lymphocytes T P14 chez des souris porteuses de tumeurs

Pour effectuer un transfert adoptif, vérifiez les souris porteuses de tumeurs 6 à 8 jours après l’implantation de la tumeur lorsque les tumeurs sont palpables. La veille du transfert, injectez par voie intrapéritonéale quatre milligrammes de cyclophosphamide. Le jour du transfert, aspirer 200 microlitres de suspension de cellules P14 à l’aide d’une seringue à insuline de 100 U.

Retirez les bulles de la seringue. Ensuite, placez la souris dans une cage et irradiez-la avec une lampe infrarouge pendant 5 à 10 minutes pour dilater la veine de la queue. Utilisez ensuite le fixateur de souris pour maintenir la souris en place.

Redressez la queue et essuyez-la avec de l’éthanol à 75 %. Insérez l’aiguille parallèlement à la veine de la queue et tirez doucement le piston vers l’arrière. S’il n’y a pas de sang qui circule dans la seringue, poussez lentement la suspension cellulaire dans la veine.

Une fois l’injection terminée, retirez rapidement l’aiguille. Appuyez doucement sur le site d’injection avec une boule de coton et remettez la souris dans une nouvelle cage propre. Observez attentivement la souris pendant plusieurs minutes pour détecter tout effet indésirable.