Pour commencer le développement de la méthode TIMS-TOF MS/MS, ouvrez l’application de contrôle TIMS. Sous les paramètres MS, réglez les valeurs de début et de fin du balayage sur 50 rapport masse/charge et 1 800 rapport masse/charge, respectivement. Sélectionnez le mode de polarité ionique sur positif et le mode de balayage sur parallèle, accumulation en série, fragmentation ou passif.
Ensuite, passez aux languettes sous la source et réglez le décalage de la plaque d’extrémité à 500 volts, le capillaire à 4, 500 volts, le nébuliseur à 3,0 bars, le gaz sec à 10,0 litres par minute et la température sèche à 200 degrés Celsius. Dans les paramètres du tire-seringue, attribuez la seringue à Hamilton un millilitre. Activez l’option active et réglez le débit sur 80,0 microlitres par heure.
Dans l’onglet MS/MS, sous ions précurseurs, réglez le nombre de rampes passives sur huit, la charge minimale sur une et la charge maximale sur cinq. Dans les paramètres de planification, activez les répétitions précurseurs et, sous l’exclusion active, cochez la case pour activer et définir la libération à 0,40 minute après. Ne réglez pas les paramètres d’énergie de collision et d’isolation avec les paramètres.
Cliquez ensuite pour activer la boîte d’encouragement TIMS. Pour effectuer l’étalonnage des domaines du rapport masse/charge et de la mobilité, sous les paramètres d’étalonnage du rapport masse/charge, sélectionnez l’un des profils de mixage de réglage préchargés dans la zone de liste de référence. Pour calibrer, chargez la seringue pour le TOF avec une solution de mélange d’ajustement.
En mode d’étalonnage, sur le côté droit de la fenêtre, choisissez entre linéaire, quadratique et quadratique amélioré pour obtenir le meilleur score
Dans le menu déroulant, sélectionnez Enregistrer sous pour générer un nouveau fichier de méthode MS.