Préparation d’échantillons pour 2D-HPLC-MS d’Aconit pendule

Commencez la préparation de l’échantillon en pesant le domotique de l’aconit, ou APB. À l’aide d’une balance de sensibilité d’un par 10 000, pesez 0,25 gramme d’APB sec dans un microtube à centrifuger de trois millilitres. Ajoutez-y 2,5 millilitres de méthanol, puis sonicate pendant 30 minutes à une puissance de 240 watts et une fréquence de 40 kilohertz.

Centrifugez l’échantillon soniqué à 1,2 G pendant cinq minutes et prélevez le surnageant. Filtrez-le à travers un filtre à membrane de 0,22 micron. Ensuite, préparez la phase mobile bidimensionnelle en utilisant de l’acétylnitrile comme phase organique ou phase B, et de l’eau ultra pure contenant 0,1% d’acide formique comme phase aqueuse ou phase A.Après avoir effectué une filtration diphasique à travers le filtre de 0,22 micron, soumettez les phases mobiles à une sonication ultrasonore à 40 kilohertz pendant 15 minutes.

Purgez la phase mobile remplacée pour éliminer les bulles. Sélectionnez une colonne C18 comme colonne 1D et une colonne hydrophile comme colonne 2D, et montez-les sur l’instrument. Pour ajuster le rapport de dérivation approprié, connectez le contour de l’instrument 2D-LC à l’entrée de masse par un T et l’autre extrémité du T à une ligne shuntée.

Ajustez le débit à une valeur appropriée pour garantir le débit approprié pour le spectre de masse.